峨眉岩白菜总三萜纯化及活性分析（药物分析论文） ㊣ 精品文档 值得下载

活性测定清除能力测定将第次和第次冻干提取物用乙醇溶解成相应浓度根据的方法测定自由基清除能力样液与乙醇溶液混匀，黑暗处放臵处测定吸光值自由基清除率根据峨眉岩白菜总三萜纯化及活性分析药物分析论文购自美国公司熊果酸标准品抗坏血酸乙醇冰乙酸高氯酸氢氧化钠氯化钠氯化铁盐酸氯乙酸铁氰化钾香草醛甲亚砜购自成都科龙化工试剂厂氨苄青霉素钠和琼脂粉购自北京索莱宝公司酵母提取物和胰蛋白胨购自英国公司高糖培养基培养基消化酶青霉素链霉素双抗和购自公司试剂购自武汉博士德生物公司购自杭州季青生物有限公司实验方法萜不同萜单体但关于峨眉岩白菜总萜的纯化研究较少峨眉岩白菜目前属于野生资源，还没有被充分开发利用因此本实验以我国特有物种峨眉岩白菜为研究对象，对其根中的总萜进行分离纯化，并比较纯化前后体外抗氧化抑菌和抑癌活性，为峨眉岩白菜的进步开发利用提供理论和技术支撑材料与方法材料与仪器实验材料供试材料采自川峨眉山海拔地区，由川农业大学胡超副教授鉴定为峨眉岩白菜将根用超纯水清洗遍，恒温烘干至恒重，岩白菜属，为我国特有多年生草本植物，分布于川西南地区，岩白菜属植物中主要的活性成分为岩白菜素，是治疗慢性支气管炎支气管哮喘等呼吸系统疾病的特效药物但目前大多研究主要集中在岩白菜素的提取修饰及其活性，忽略了其他活性成分的相关研究，有研究指出岩白菜中还含有萜黄酮多糖等活性成分，陈蕉等发现峨眉岩白菜多糖和黄酮提取物均具有定的抗氧化活性，但关于萜化合物的提取和活性研摘要以峨眉岩白菜为研究对象，采用沉淀分级溶解法初步纯化其总萜化合物并比较纯化前后总萜抗氧化抑菌和抑癌活性结果表明经次冻干后，样品提取率从降低到，提取物中总萜含量从升高到纯化后的总萜化合物总还原能力增强，对自由基的清除能力增强，由降低到峨眉岩白菜总萜对铜绿假单胞杆菌和枯草芽孢杆菌均有定的抑制能力，纯化后能提高总萜对两种菌的敏感度纯化后总萜提取取工艺安徽科技学院学报，樊梓鸾，赵梓煣，赵翔，等红豆越橘总萜的纯化及体外抗炎活性南京林业大学学报自然科学版，刘晓艳，陈艺煊，吴林秀，等响应面法优化灵芝总萜酶辅助提取工艺及其抗氧化活性研究食品科技，林水花，吴锦忠，吴建国毛花猕猴桃根中总萜成分纯化工艺研究海峡药学，蔡天娇，雷宏杰，王瑞珍，等红枣萜酸大孔吸附树脂纯化特性及其抗氧化活性研究食品工业科技，徐锦，汪雯翰，杨妍，等乙醇浓度后抑癌活性比较结论峨眉岩白菜中含有较丰富的总萜经沉底分级溶解纯化后，样品提取率从降低到，提取物中总萜含量从升高到，说明沉底分级溶解法能有效提高峨眉岩白菜中总萜含量经纯化后，峨眉岩白菜总萜的总还原能力增强，对自由基的由降低到和枯草芽孢杆菌均有定的抑制能力，在浓度下，对两种菌为轻度敏感经纯化后，在浓度下对两种菌为中度敏感并且总萜提取物能有效抑制细胞力从图中可以看出，纯化前峨眉岩白菜萜提取物对细胞具有较好的抑制能力，和的分别为和中可以看出纯化后萜提取物对细胞的抑制能力显著提高，和的分别为和，能显著提高峨眉岩白菜总萜对细胞的抑制能力图纯化前后抑癌活性比较纯化前后对细胞的抑制能力比较从图中可以看出峨眉岩白菜萜提取物对肺癌细胞具有定的抑制能力未纯化前随着萜提取物浓度升高，抑制率也逐渐上升，花总萜对种常见致病菌均有较强的抑制能力，而关于峨眉岩白菜总萜抑菌活性研究报道较少从表中可以看出纯化前后的峨眉岩白菜总萜化合物对枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞杆菌均有定的抑制能力抑菌圈均大于抑菌圈为时，表明药物对致病菌为轻度敏感抑菌圈为时，药物对致病菌为中度敏感纯化前峨眉岩白菜总萜在浓度下对两种菌均具有轻度敏感抑菌圈均在内纯化后在浓度下峨眉岩白菜总萜对峨眉岩白菜总三萜纯化及活性分析药物分析论文对提取灵芝萜含量的影响及提取物抗前列腺癌细胞的活性菌物学报，杨利军金丝小枣萜类化合物的提取和鉴定以及抗前列腺癌活性研究济南山东大学，刘素君，宋华，谢孔平峨眉岩白菜提取物抗肿瘤研究乐山师范学院学报，罗思源，曾辰，冯士令，陈涛，周莉君，丁春邦峨眉岩白菜总萜纯化及活性分析华中师范大学学报自然科学版，基金川农业大学大学生创新训练项目峨眉岩白菜总三萜纯化及活性分析药物分析论文菜化学成分初步研究新疆医学，陈蕉，黎云祥，陈光登，等两种岩白菜属植物根茎黄酮和多糖的提取及抗氧化活性研究食品工业科技，常霞，景炳年，范毅，等金银花总萜提取工艺及其抗菌抗氧化活性江苏农业科学，杜琳，黄清东，陈聪地，等蔓菁中两个新的萜化合物及其抗癌活性研究药学学报，杨艳，高渐飞，王丽，等马比木根茎提取物黄酮和萜含量及其降糖活性绿色科技，严小童，冯承涛响应面法优化女贞叶中萜类成分的差异，提取物中总萜含量也无显著变化因此，可以用沉淀分级溶解的方法对峨眉岩白菜总萜进行纯化纯化前后体外抗氧化活性比较从图中可以看出纯化前即第次冻干总萜提取物对自由基最大清除率为，为化后即第次冻干总萜提取物对自由基的最大清除率为，为越小代表抗氧化能力越强，纯化后，能降低总萜提取物对自由基的，由此可见经纯化后峨眉岩白菜总萜对自由基的清除率显著提高增殖，纯化前处理和后的分别为和降小为和肺癌细胞有定的抑制能力，纯化后能显著降低为和，能提高峨眉岩白菜总萜的抑癌活性因此沉淀分级溶解法可适用于峨眉岩白菜总萜的纯化，纯化后的总萜体外抗氧化抑菌活性和抑癌活性均有定程度的提高参考文献潘锦堂横断山岩白菜属新分类群植物分类学报，吕修梅，王军宪岩白菜属植物的研究进展中药材，吴红红，潘兰，陈刚，等新疆哈萨克药厚叶岩白最高抑制率达到，和的分别为和图从图中可以看出，纯化后的萜提取物对肺癌细胞的抑制能力提高，当浓度高于时，抑制率趋于平稳，最高抑制率为，和的分别为和经纯化后，能显著降低对的，说明经过重结晶纯化后，能显著提高峨眉岩白菜总萜对细胞的抑制能力本实验发现峨眉岩白菜总萜具有较强的抑癌活性，因此表明峨眉岩白菜提取物中抑癌活性成分可能为总萜图纯化种菌为轻度敏感，浓度下对两种菌为中度敏感抑菌圈均在内说明经纯化后，峨眉岩白菜总萜的抑菌活性得到提高表纯化前后抑菌活性比较注通过检测纯化前后抑菌圈的显著性表示，表示纯化前后对细胞的抑制能力比较多种植物萜提取物表现出较强的抑癌活性灵芝萜和金丝小枣萜对前列腺癌细胞均具有较好的抑制能力，刘素君等人发现峨眉岩白菜提取物对肺癌细胞和小鼠腹水瘤细胞有较好的抑制能从图中可以看出，在到之间，纯化后总萜的总还原能力高于纯化前蔡天娇等人发现红枣萜酸经纯化后，对自由基清除能力增强，由变为本实验中经纯化后，峨眉岩白菜总萜的体外抗氧化能力提高，说明有效成分经沉淀分级溶解纯化后达到了富集的效果图多次冻干后总萜含量变化表不同次数冻干后样品提取率图纯化前后体外抗氧化活性比较纯化前后抑菌活性比较植物萜提取物被证实具有定的抑菌能力，例如金银峨眉岩白菜总三萜纯化及活性分析药物分析论文作图和数据统计分析认为具有统计学意义结果与分析沉淀分级溶解法提高萜纯度从图中可以看出提取物中总萜含量较高，说明峨眉岩白菜中富含萜类化合物从表中可以看出，第次冻干的样品提取率为，提取物中总萜含量为图经次冻干后，样品提取率有所下降，为，而提取物中总萜含量显著提高，为说明在沉淀分级溶解过程中，提取率下降表示不溶于醇的杂质被过滤掉，显著提高峨眉岩白菜提取物中总萜含量冻干次和次的样品提取率无显在牛津杯中加入不同浓度的药物氨苄青霉素钠作为阳性对照，溶液作为空白对照将培养基放于培养箱中培养测定抑菌圈大小抑癌活性测定和细胞由川农业大学生命科学学院生物工程系惠赠细胞用高糖培养基培养含和双抗，细胞用培养基培养含和双抗在含氧化碳恒温培养箱中培养，每隔传代次待细胞处于对数生长期时，消化细胞并用缓冲液冲洗两下公式计算自由基清除率−，其中，为样品处理组吸光值，为乙醇代替样品空白组吸光值总还原能力测定将第次和第次冻干提取物用乙醇溶解成相应浓度根据等的方法测定总还原能力样液与铁氰化钾溶液和混匀，水浴，加入氯乙酸溶液，冷却加入氯化铁溶液和蒸馏水，混匀后在处测定吸光值吸光值越大表示总还原能力越强抑菌活性测定菌种准备枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞杆菌由提取乙醇与岩白菜根粉末充分混匀，下超声提取滤所得滤液蒸发浓缩，冷冻干燥得粉末状提取物总萜含量测定采用香草醛高氯酸法测定总萜含量取样液加入香草醛冰乙酸溶液和高氯酸，水浴后加入冰乙酸定容至，混匀静臵，于处测定吸光值标准曲线采用熊果酸标准品制作，将样品吸光值带入标准曲线计算总萜含量沉淀分级溶解法纯化第次提取液冷冻干燥得粉末状提取物为第次冻干提粉碎过目筛，干粉储存备用仪器与试剂台式冷冻干燥机宁波新芝生物科技股份有限公司电子天平德国公司实验室超纯水机川沃特尔科技发展有限公司电热恒温培养箱上海发科学仪器有限公司旋转蒸发器上海亚荣生化仪器超净工作台苏净集团安康公司制造酶标仪美国公司，苯基苦味基肼报道较少从植物中提取出的萜化合物已被证实具有抑菌抗癌保肝降糖等多种活性但不同植物中萜的含量不同马比木根中总萜含量为干重，茎中总萜含量为干重女贞叶中总萜含量仅为干重目前研究仅对岩白菜中萜化合物进行了定性分