选到高效表达酵母菌发酵产生抗菌肽。

抗菌肽分离纯化。

离心收集表达上清液，采用硫酸铵沉淀抗菌肽。

经层析，收集各个洗脱峰，用分析鉴定目多肽所在峰。

将含有目多肽洗脱液用透析，冻干浓缩。

多肽于保存，用于分析鉴定及生物功能试验。

抗菌肽抗菌活性和抗菌谱测定。

采用琼脂扩散纸片法。

以大肠杆菌沙门氏菌，肠球菌链球菌分枝杆菌巴氏杆菌布鲁氏菌弧菌痢疾杆菌绿脓杆菌梭状芽孢杆菌李氏杆菌巨大芽孢杆菌醋酸钙不动杆菌金黄色葡萄球菌化脓链状球菌流感病毒疱疹病毒为受抑菌。

将大肠杆菌等受抑菌培养后分别室等仪器设备。

上述仪器设备基本上可满足本项目研究需要。

项目申请单位人才资源情况技术人员总数中高级技术人员比例项目申请单位南昌大学是我省唯所省部共建工程重点建设大学，人才资源丰富，科研力量雄厚。

生命科学学院有专任教师人，其中正副教授人，讲师人，中高级技术人员比例。

项目组人员专业结构职称结构项目组科研人员人，主要由生物化学与分子生物学专业微生物学专业人员组成，专业结构合理。

科研人员中，教授人副教授人助教人研究生人。

其中具有博士学位教师人。

项目新增投资筹集情况本项目申请科研经费万元。

四项目预期经济效益预期市场需求由于抗菌药物广泛应用和滥用，耐药菌株不断增加，对人类和动物健康造成了严重威胁。

抗菌肽杀菌力强，抗菌谱广，不良反应少，不诱导产生耐药菌株，因此，必将成为今后抗菌药物主导产品。

目前，国内还没有高效广谱抗菌肽产品面市，开发抗菌肽前景广阔。

预期盈利水平该技术推广可产生明显经济效益。

预期产业化前景本项目以现代生物技术方法研制具有较强广谱抗菌能力抗菌肽，并将其制成抗菌肽制剂。

研究成果实用性强，易于转化。

在产品研制工球菌流感病毒疱疹病毒为受抑菌。

将大肠杆菌等受抑菌培养后分别加入到平皿中，用玻璃刮铲将菌液涂布均匀，再将浸透被测样品液滤纸片放在培养基表面，标记后置于恒温箱中培养，观察抑菌效果，测定抑菌圈直径，了解抗菌肽抗菌谱。

将抗菌肽作为饲料添加剂进行动物实验。

项目技术质量指标项目产品达到主要技术性能指标执行质量标准通过国家相关行业许可认证等项目达到目标构建出抗菌肽酵母高效表达体系，大量表达抗菌肽。

研制出具有自主知识产权高效广谱抗菌肽制剂。

考核指标该酵母表达体系对抗菌肽表达稳定，表达量重复性。

抗菌肽抗菌活性高，抗菌谱广。

起到了至关重要作用。

因此，鱼类先天免疫系统中极有可能存在高效广谱生物抗菌肽。

我们在前期工作中克隆了高效广谱鱼类抗菌肽基因，本项目拟通过酵母表达获得抗菌肽，并将抗菌肽添加到饲料中，为日益严重鱼类和畜禽病害防治开辟新途径。

项目所处技术领域技术发展现状由于抗菌肽具有独特抗菌机制，广谱杀菌作用，高效抗菌活性以及靶菌株难以产生抗性等优点，因此有着广阔开发应用前景，是目前国际学术研究活跃领域之。

计算机检索表明，国外科学家作了大量工作，对抗菌肽研究已经取得了许多进展。

法国科学家蒂马克先生于年月创建了公司，目是尽可能得到不同类型抗菌肽分子。

迄今国外科学家已在不同生物中发现了多种抗菌肽，我国在抗菌肽研究方面起步较晚，仅有少量报道。

大量结果显示不同抗菌肽其抗菌活性和抗菌谱存在很大差异，因此继续寻找高效广谱生物抗菌肽，是广大生命科学工作者努力方向。

项目技术先进性，对相关领域技术进步推动作用本项目采用是先进分子生物学研究技术。

用基因克隆技术将我们从鱼肝脏中分离抗菌肽基因与具有高效表达启动子表达载体连接，构建重组分子。

然后用醋酸锂法将重组分子转入解脂耶氏酵母中，筛选高效表达抗菌肽工程菌，以工程菌工业化发酵生产抗菌肽，进而开发出高效广谱新型抗菌剂。

该项目实施对相关领域技术进步有定推动作用。

项目目前进展情况。

我们已进行了前期工作，用引起人畜共患病多种微生物诱导鱼，继而采用差异显示技术从经微生物诱导鱼肝脏中分离到了三个特异表达分子，并使用技术克隆了它们全长基因。

这些工作为本项目实施奠定了基础。

二技术方案论述项目技术关键点或创新点论述，项目完成时达到技术水平目前，人们主要以两种方法获得分阶段描述项目执行过程中各阶段目标年月将抗菌肽基因与具有高效表达启动子表达载体连接，构建重组表达载体。

月将重组载体转入解脂耶氏酵母，构建抗菌肽基因酵母表达系统。

月筛