影方法，它在尽可能保留原有信息的基础上将高维空间中的样本映射到较低微的主成分空间中。通过分析原始数据的相互关系，采用坐标变换的方法对数据进行正交变换，消除数据间的相关关系，具有分析多变量主次关系的功能。近红外光谱谱带严重重叠，第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究可造成分析的困难，而在不丢失主要光谱信息的前提下选择为数较少的新变量来代替原来较多的变量，可有效解决光谱重叠的问题，从而提取所需的化学信息。试验内容样品的制备按照方法进行沙门氏菌细胞的活化和分离纯化，由试验小结中所得结论选择进行沙门氏菌种子液的制备，之后离心分离湿菌体，以定体积无菌水分三次洗涤沉淀部分，充分震荡摇匀使菌体分散开来，平板菌落计数法进行菌落计数结果为亿。另用移液枪移取菌液于大试管中，加入无菌水，充分振荡摇匀形成倍稀释菌悬液，然后逐级进行次倍稀释，制成组个浓度梯度的沙门氏菌全细胞悬液，浓度梯度值呈比差为的等差序列，备用。用超声波细胞粉碎仪破碎沙门氏菌的全细胞，破碎参数选为破碎间隔实际破碎总时间进行沙门氏菌细胞破碎，之后离心分离，沉淀部分为细胞质上清液为细胞质。将细胞质悬液充分震荡摇匀，用移液枪移取菌液于大试管中，加入无菌水，充分振匀形成倍稀释菌悬液，然后逐级进行次倍稀释过程，制成组浓度梯度的沙门氏菌细胞质悬液，个浓度梯度值呈比差为的等差序列，备用。组个浓度梯度的沙门氏菌细胞壁悬液的制备同细胞质悬液制备过程。单增李斯特氏菌样品的制备对单增李斯特氏菌进行细胞的活化和分离纯化，选进行单增李斯特氏菌种子液的制备，之后离心分离湿菌体，以定体积无菌水分三次洗涤沉淀部分，充分震荡摇匀使菌体分散开来，平板菌落计数法进行菌落计数结果为亿。选择超声波破碎参数为破碎间隔实际破碎总时间进行单增李斯特氏菌细胞破碎，之后离心分离，沉淀部分为细胞壁上清液为细胞质。三组倍稀释浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞壁细胞质悬液的制备同沙门氏菌。光谱信息的采集第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究试验参数选择分辨率仪器的分辨率影响近红外光谱的分析，而且对不同组分的影响是不同的，对于光谱重叠严重的部分，提高分辨率有利于光谱的分析，但过高会大大增加试验和数据处理工作量。有研究表明，当分辨率大于时，部分样品信息损失，较低的分辨率可以保证信噪比，综上本试验设分辨率为。扫描次数扫描次数是在次测量过程中对光谱的累加，累加后的光谱除以扫描次数即为每个样本的平均光谱。由于噪音在测量过程中是随机变化的，随着累加次数的增加，噪音相互抵消，影响变小，本实验设扫描次数为次。重复测定次数在测量过程中，同样品的多次测定，光谱会出现细微变化偶然误差影响，为了尽可能准确地取得样品的光谱信息，般个样品重复测定次，求平均光谱。光谱采集在相同的试验条件下，采用德国公司的型近红外光谱仪，对沙门氏菌单增李斯特菌的各组份进行近红外光谱进行透射扫描。为了获得较好的光谱图，整个试验的仪器分辨率扫描次数等参数保持严格致。设定仪器分辨率为，扫描次数为次，扫描范围，环境温度控制在左右，空气湿度左右，数据格式为，每个样品重复扫描次，其平均值作为该样品的光谱数据，每张光谱包含个波长点的吸光度值。得到不同浓度的沙门氏菌单增李斯特菌全细胞细胞壁和细胞质的近红外光谱叠加图如图图图图图图所示。图沙门氏菌全细胞的原始光谱第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究沙门氏菌细胞壁的原始光谱沙门氏菌细胞质的原始光谱李斯特菌病全细胞的原始光谱第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究李斯特菌病细胞壁的原始光谱李斯特菌病细胞质的原始光谱结果与分析沙门氏菌单增李斯特氏菌的近红外光谱鉴别沙门氏菌单增李斯特菌全细胞的主成分投影判别分析图是以沙门氏菌单增李斯特菌全细胞不同波数点下的吸光度值为特征值，进行多元散射预处理后进行分析，选取前两个主成分拟合原数据的效果图，图中横纵坐标的标注分别是第主分和第二主分的得分值。第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究图沙门氏菌单增李斯特菌全细胞主成分得分图从图中可以看出，分析可以良好的反映出沙门氏菌单增李斯特菌全细胞的差异性信息。沙门氏菌第组分得分范围在之间，第二组分得分范围在之间单增李斯特菌第组分得分范围在之间，第二组分得分范围在之间。可见两种菌的第主分得分范围明显不同，而第二主分得分范围几乎完全相同。不同的细菌，其细胞的物质组成是不样的。不同的物质在经过近红外光照射后会在不同的波段产生红外特异性吸收，且有着不同的吸收谱段，因此可以通过近红外光谱法区分开来。沙门氏菌单增李斯特菌细胞壁的主成分投影判别分析图是以沙门氏菌单增李斯特菌细胞壁不同波数点下的吸光度值为特征值，进行多元散射预处理后进行分析，选取前两个主成分拟合原数据的效果图，图中横纵坐标的标注分别是第主分和第二主分的得分值。第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究图沙门氏菌单增李斯特氏菌细胞壁主成分得分图侯玉林，邴春亭，逯家辉近红外反射光谱的主成份分析光谱学与光谱分析学陆峰，卢伟，肖振宇耐药型白念珠菌的红外光谱判别方法的初步研究分析化学，陆婉珍现代近红外光谱分析技术北京中国石化出版社张银，周孟然近红外光谱分析技术的数据处理方法红外技术，王佳华，韩东海苹果内部品质近红外光谱分析检测技术中外食品陆婉珍，袁洪福现代近红外光谱分析技术北京中国石化出版参考文献社严衍禄，赵龙莲近红外光谱分析基础与应用北京中国轻工业出版社，刘建学实用近红外光谱分析技术北京科学出版社李静，刘斌，岳田利，等近红外光谱分析技术及其在食品中的应用农产品加工，，，，卢蓉蓉近代仪器分析在乳品工业中的应用中国乳品工业，龚玉梅，张炜近红外光谱技术及其在林业中的应用光谱学与光谱分析，，梁高峰，贾宏汝近红外光谱分析技术及其在农业研究中的应用安徽农业科学，，艾立，梁琼麟亚太传统医学，蔡飞，陆峰傅立叶变换红外光谱结合化学计量学在微生物判别分类鉴定中的应用河南大学学报医学版，致谢致谢本文是在导师刘建学教授的悉心指导下完成的，以前需要什么资料我都是去图书馆找资料，但是图书馆的资料也是有限的且不方便，所以查资料的初期非常的费劲而且没有查到很有用的资料。老师了解了我的情况后教我到电子阅览室上查资料阅读文献。最后，我终于非常顺利的完成了开题报告，为试验阶段打下了坚实的基础。导师渊博的学识严谨的治学态度优良的工作作风宽广的胸怀和诚恳的待人态度将使学生终身收益。从论文立题试验设计与实施到论文的撰写与修改，自始到终都凝聚着导师的心血和关怀，在此谨向导师表示最崇高的敬意和最衷心的感谢,特别要感谢张雅琪师姐无私的关怀帮助和指导，没有你的帮助我是无论如何也写不出这篇论文的，再次说声谢谢。我今后定好好向你学习，乐于助人，谨记你的教导。在完成实验期间，我得到了许多老师和同学的帮助。做实验的过程中由于经费有限，有很多要用的东西不得不从实验室中借，在此特别感谢张敏老师辛莉老师宗留香老师等为我提供了许多便利的实验环境和实验指导。最后再次感谢所有指点过帮助过鼓励过我的人们,你们都是好人，你们都是伟大的人,从图中可以看出，分析可以良好的反映出沙门氏菌单增李斯特菌细胞壁的差异性信息。沙门氏菌第组分得分范围在之间，第二组分得分范围在之间单增李斯特菌第组分得分范围在之间，第二组分得分范围在之间。可见两种菌的第主分和第二主分得分范围完全不同。细菌的细胞壁都含有定量的肽聚糖，此外，革兰氏阴性菌的细胞壁还含有外膜这特殊组分，包括脂多糖脂质双层脂蛋白三部分革兰氏阳性菌还含有大量特殊组分磷壁酸。沙门氏菌为革兰氏阴性菌，单增李斯特氏菌为革兰氏阳性菌，其细胞壁组分不尽相同，不同的物质在经过近红外光照射后会在不同的波段产生红外特异性吸收，且有着不同的吸收谱段，因此可以通过近红外光谱法区分开来。沙门氏菌单增李斯特菌细胞质的主成分投影判别分析图是以沙门氏菌单增李斯特菌细胞质不同波数点下的吸光度值为特征值，进行多元散射预处理后进行分析，选取前两个主成分拟合原数据的效果图，图中纵横坐标的标注分别是第主分和第二主分的得分值。第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究图沙门氏菌单增李斯特菌细胞质主成分得分图从图中可以看出，分析可以良好的反映出沙门氏菌单增李斯特菌细胞质的差异性信息。沙门氏菌第组分得分范围在之间，第二组分得分范围在之间单增李斯特菌第组分得分范围在之间，第二组分得分范围在之间。可见两种菌的第主分得分范围明显不同，而第二主分得分范围有相似的地方。细菌的细胞质是指被细胞膜包围的除核区以外的切半透明胶体状颗粒状物质的总称，主要成分为核糖体贮藏物各种酶类中间代谢物质粒各种营养物质和大分子的单体等。两种不同的细菌其细胞质组分部分也不同，所以可以通过近红外光谱法区分开来。小结由于沙门氏菌单增李斯特菌的全细胞细胞壁和细胞质的组分不同，造成他们对近红外光的吸收不同，主成分投影判别分析法对其分析鉴别可以达到理想的效果。采用矢量归预处理方法，分别对不同浓度梯度下的沙门氏菌单增李斯特菌的全细胞细胞壁和细胞质进行主成分投影判别分第章沙门氏菌单增李斯特菌的近红外光谱研究析。结果显示不论是利用全细胞细胞壁还是细胞质的近红外光谱分析，都可以将大肠杆菌和单增李斯特菌区分开来。近红外光谱技术可以对沙门氏菌单增李斯特菌进行分类鉴别。第章结论第章结论总结采用平板划线分离培养法和选择性培养基对沙门氏菌单增李斯特菌进行分离培养，试验结果表明，用亚硫酸铋琼脂培养基改良的琼脂培养基，根据沙门氏菌单增李