性,因此,本试验中的分离株为附录规范性附录和试脸用溶液的配制阿氏液配制葡萄糖柠檬酸钠柠檬酸氯化钠加蒸馏水至,散热溶解后调值至,高压灭菌,保存备用病毒悬液如感染性清最高稀释倍数作为滴度。高致病性禽流感诊断技术。间接酶联免疫吸附试验间接加样品带滴头,酶标测定仪。方法见附录,间接酶标抗体。抗原包被板制备方法见附录,样品准备将被检血清用稀释液见附录做,稀释。取出抗原包被板,倒掉孔内包被液,用洗液洗次。除和孔不加样品,留做空白调零,阴性血清高致病性禽流感诊断技术.,链霉素庆大霉素和制霉菌素,但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高倍,。在室温放置后样品应尽快处理,没有条件的可在存放几天,也可于低温条件下保存贮存最好。将棉拭子充分捻动拧干后弃去拭子粪便的悬液。样品液经离心,取上清液作为接种材料。高致病性禽流感诊断技后观察结果如果环境温度太高,可置环境下。对照孔红细胞将成明显的钮扣状沉到孔底。将板倾斜,观察红细胞有无呈泪滴状流淌。完全血凝不流淌的抗原或病毒最高稀释倍数代表个血凝单位,试验微量法。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点,终点稀释倍数除以即为含的抗原的稀释倍数。例如,如果血凝的终点滴度为,则抗原的稀释倍数应是,除以,孔加人的血凝素亚型鉴定。病毒分离和鉴定技术材料准备死禽采集气管脾肺肝肾和脑等组织样品,进行分别处理或者同时处理活禽病料应包括气管或泄殖腔拭子,尤其是以采集气管拭子更好小珍禽用拭子取样易造成损伤,可采集新鲜粪便。病料应放在含有抗菌素的值的等渗磷酸盐缓冲液内无可用的甘油盐水。抗生素的选择视当地情况而定,组织和气管拭子悬液中应含有青霉素琼脂板上按孔组的梅花形打孔中间孔,周围孔,孔径约,将孔中的琼脂用号针头斜面向上从右侧边缘插人,轻轻向左侧方向将琼脂挑出,勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂刚刚要溶化为止,封闭孔的底部,以防侧漏。用微量移液器或带有号针头的注射器,吸取抗原悬液滴人中间孔图的号,标准阳性血清分别加人外周的和孔中,被检血清按编号顺序分别加情况而定,组织和气管拭子悬液中应含有青霉素,链霉素庆大霉素和制霉菌素,但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高倍,。在室温放置后样品应尽快处理,没有条件的可在存放几天,也可于低温条件下保存贮存最好。将棉拭子充分捻动拧干后弃去拭子粪便的悬液。样品液经离心,取上清液作为接种材料。人另外个外周孔图的号孔。每孔均以加满不滋出为度,每加个样品应换个滴头病毒悬液如感染性鸡胚尿囊液加入第孔,混匀。从第孔吸取。病毒液加人第孔,混匀后吸取。加人第孔,如此进行对倍稀释至第孔,从第孔吸取弃之,换滴头。,体积分数为鸡红细胞悬液将鸡红细胞悬液充分摇匀后加人见附录,振荡混匀,在室温下静置本标准起草人唐秀英李海燕田国斌。高致病性禽流感诊断技术范围本标准规定了高致病性禽流感病毒分离与鉴定技术血凝和血梁抑制试验琼脂凝胶免疫扩散试验酶联免疫吸附试验间接的技术要求。本标准所规定的高致病性禽流感病毒分离与鉴定技术适用于各种禽类高致病性禽流感的病原分离和鉴定和间接适用于型禽流感病毒实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布目舀高致病性禽流感,简称是由正猫病毒科流感病毒属中的型流感病毒引起的,被世界动物卫生组织英,法,流感病毒引起的,被世界动物卫生组织英,法,列为类疾病,我国将其列为类动物疫病。本标准是参考诊断试验和疫苗标准手册。年版,并结合我国现有动物卫生法规及农业部对禽流感的相关政策和措施制定的。本标准的附录附录,第孔加人,。血清加人第孔内,充分混匀后吸于第孔,依次对倍稀释至第孔,从第孔吸取弃去。孔孔均加人含混匀的病毒抗原液,室温约静置至少,。体积分数为的鸡红细胞悬液混匀,轻轻混匀,静置约室温约,若环境温度太高可置条件下进行,对照红细胞将呈显钮扣状沉于孔底。结果判定以完全抑制个抗原的血人另外个外周孔图的号孔。每孔均以加满不滋出为度,每加个样品应换个滴头病毒悬液如感染性鸡胚尿囊液加入第孔,混匀。从第孔吸取。病毒液加人第孔,混匀后吸取。加人第孔,如此进行对倍稀释至第孔,从第孔吸取弃之,换滴头。,体积分数为鸡红细胞悬液将鸡红细胞悬液充分摇匀后加人见附录,振荡混匀,在室温下静置,链霉素庆大霉素和制霉菌素,但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高倍,。在室温放置后样品应尽快处理,没有条件的可在存放几天,也可于低温条件下保存贮存最好。将棉拭子充分捻动拧干后弃去拭子粪便的悬液。样品液经离心,取上清液作为接种材料。高致病性禽流感诊断技病性禽流感诊断技术范围本标准规定了高致病性禽流感病毒分离与鉴定技术血凝和血梁抑制试验琼脂凝胶免疫扩散试验酶联免疫吸附试验间接的技术要求。本标准所规定的高致病性禽流感病毒分离与鉴定技术适用于各种禽类高致病性禽流感的病原分离和鉴定和间接适用于型禽流感病毒的型特异性检验试验适用于禽流感病毒高致病性禽流感诊断技术.列为类疾病,我国将其列为类动物疫病。本标准是参考诊断试验和疫苗标准手册。年版,并结合我国现有动物卫生法规及农业部对禽流感的相关政策和措施制定的。本标准的附录附录附录附录附录为规范性附录,附录为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究,链霉素庆大霉素和制霉菌素,但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高倍,。在室温放置后样品应尽快处理,没有条件的可在存放几天,也可于低温条件下保存贮存最好。将棉拭子充分捻动拧干后弃去拭子粪便的悬液。样品液经离心,取上清液作为接种材料。高致病性禽流感诊断技,计算值。计算方法参见附录,判定此分离株为高致病性禽流感病毒株。试验鸡周龄,周龄鸡,只。感染鸡胚的尿囊液,血凝价在以上,未混有任何细菌和其他病毒。中华人民共和国国家标准高致病性禽流感诊断技术发布果才有效。价小于或等于判定试验阴性价等于为可疑,需重复试验价大于或等于为阳性。琼脂凝胶免疫扩散试验,溶液,配制方法见附录,制备方法见附录,标准阴性和阳性血清。打孔在制备的琼脂板上按孔组的梅花形打孔中间孔,周围孔,孔径约,将孔中的琼脂用号针头斜面向上从右侧边缘插人,轻轻向左侧方向附录附录附录为规范性附录,附录为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。测定法试验鸡周龄鸡,只。感染鸡胚的尿囊液,血凝价在以上,未混有任何细菌和其他病毒。将感染鸡胚尿囊液用生理盐水,稀释,以羽的剂量翅静脉接种。,连续观察人另外个外周孔图的号孔。每孔均以加满不滋出为度,每加个样品应换个滴头病毒悬液如感染性鸡胚尿囊液加入第孔,混匀。从第孔吸取。病毒液加人第孔,混匀后吸取。加人第孔,如此进行对倍稀释至第孔,从第孔吸取弃之,换滴头。,体积分数为鸡红细胞悬液将鸡红细胞悬液充分摇匀后加人见附录,振荡混匀,在室温下静置术。中华人民共和国国家标准高致病性禽流感诊断技术发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布目舀高致病性禽流感,简称是由正猫病毒科流感病毒属中的型的血凝素亚型鉴定。病毒分离和鉴定技术材料准备死禽采集气管脾肺肝肾和脑等组织样品,进行分别处理或者同时处理活禽病料应包括气管或泄殖腔拭子,尤其是以采集气管拭子更好小珍禽用拭子取样易造成损伤,可采集新鲜粪便。病料应放在含有抗菌素的值的等渗磷酸盐缓冲液内无可用的甘油盐水。抗生素的选择视当地情况而定,组织和气管拭子悬液中应含有青霉素毒的型特异性检验试验适用于禽流感病毒的血凝素亚型鉴定。病毒分离和鉴定技术材料准备死禽采集气管脾肺肝肾和脑等组织样品,进行分别处理或者同时处理活禽病料应包括气管或泄殖腔拭子,尤其是以采集气管拭子更好小珍禽用拭子取样易造成损伤,可采集新鲜粪便。病料应放在含有抗菌素的值的等渗磷酸盐缓冲液内无可用的甘油盐水。抗生素的选择视当地将琼脂挑出,勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂刚刚要溶化为止,封闭孔的底部,以防侧漏。用微量移液器或带有号针头的注射器,吸取抗原悬液滴人中间孔图的号,标准阳性血清分别加人外周的和孔中,被检血清按编号顺序分别加人另外个外周孔图的号孔。每孔均以加满不滋出为度,每加个样品应换个滴头。本标准起草人唐秀英李海燕田国斌。高致高致病性禽流感诊断技术.,链霉素庆大霉素和制霉菌素,但粪便和泄殖腔拭子所有的抗生素浓度应提高倍,。在室温放置后样品应尽快处理,没有条件的可在存放几天,也可于低温条件下保存贮存最好。将棉拭子充分捻动拧干后弃去拭子粪便的悬液。样品液