引物引物水模板对照将已加样的反应管短暂离心后放入仪,扩增反应条件设定为反转录预变性之后变性,退火,延伸,运行个循环补。初步诊断,可做出初步诊断,确认需要进行实验室诊断。实验室诊断设备材料和试剂设备普通扩增仪。荧光仪。台式冷冻高速离心机。微量移液器。水平电泳仪。蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术.,并尽快用于检测。提取也可采用其他等效的提取方法或等效的商品化提取试剂盒。反应取反应管,按表的规定配制反应体系,加样宜按空白对照阴性对照待检样品阳性对照的次序分别加入模板,盖上管盖,充分混匀。蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术。福建省地方标准蜜蜂以色列急性麻痹病毒水。试剂。氯甲烷。蜜蜂感染后期胸部绒毛脱落,最后麻痹抽搐而死。初步诊断,可做出初步诊断,确认需要进行实验室诊断。实验室诊断设备材料和试剂设备普通扩增仪。荧光仪。台式冷冻高速离心机。微量移液器。次,室温放置加入氯甲烷,旋涡振荡混匀,室温放置,离心取上层水相至新的离心管中,加等体积异丙醇,上下颠倒数次混匀,放置,离心弃上清液,沉淀用乙醇清洗,离心,弃上清液,沉淀室温干燥加水溶解沉淀。冰箱保存备用,溶液应避免反复冻序分别加入模板,盖上管盖,充分混匀。表实时荧光反应体系组分加样量终浓度逆转录酶聚合酶引物引物上样缓冲液混匀后加入样品孔中进行电泳。在电泳时设立标准分子量作对照。,当溴酚蓝到达底部时停止。测序使用凝胶成像分析系统观察核酸条带并判断结果,经核酸扩增电泳后如出现条大小约的片段,应对其切胶回收后进行测序,也可直接送产物进行测序,参考序列参见附录,同源性达到以上方可判为核酸阳性。判定依据经核酸扩增电泳后阳性对照出探针水模板对照将已加样的反应管短暂离心后放入仪,扩增反应条件设定为反转录预变性之后变性,退火,收集荧光,共个循环。同时设阳性阴性对照和空白对照。凝胶成像系统。电子天平感量。冰箱和–。材料和试剂试验用水应符合中级水的规定。焦炭酸乙酯处理水表反应体系组分加样量终浓度逆转录酶聚合酶引物引物水模板对照将已加样的,置于水处理过的研钵中,加入液氮进行研磨,将研磨得到的粉末,离心管中,加入试剂,用移液器充分吹打次,室温放置加入氯甲烷,旋涡振荡混匀,室温放置,离心取上层水相至新的离心管中,加等体积异丙醇,上下颠倒数次混匀,放置,离心弃上清液,沉淀用乙醇清洗给出的规则起草。本标准由福州海关提出并归口。本标准起草单位福州海关海口海关福建农林大学长春海关厦门瑞德利校准检测技术有限公司东莞市中鼎检测技术有限公司福建省国鼎检测技术有限公司。本标准主要起草人张体银郑腾李丹丹王武军张志灯黄少康宋战昀廖善胜白泉阳林杰于师宇曹维强李厚标。蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术范围本标准规定了蜜蜂以色列急性麻痹病平电泳仪。琼脂糖。分子量标准。电泳缓冲液,配制方法按附录中的规定。,配制方法按附录中的规定。上样缓冲液,配制方法按附录中的规定。纯化回收试剂盒。引物探针序列和对照样品引物和探针序列普通引物序列。蜜蜂感染后期胸部绒毛脱落,最后麻痹抽搐而探针水模板对照将已加样的反应管短暂离心后放入仪,扩增反应条件设定为反转录预变性之后变性,退火,收集荧光,共个循环。同时设阳性阴性对照和空白对照。凝胶成像系统。电子天平感量。冰箱和–。材料和试剂试验用水应符合中级水的规定。焦炭酸乙酯处理水,并尽快用于检测。提取也可采用其他等效的提取方法或等效的商品化提取试剂盒。反应取反应管,按表的规定配制反应体系,加样宜按空白对照阴性对照待检样品阳性对照的次序分别加入模板,盖上管盖,充分混匀。蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术。福建省地方标准蜜蜂以色列急性麻痹病毒蜂王个体。若样品内能送达实验室,应保存若样品内不能送达实验室,则应或更低温度保存。对于无临床表现的蜂群也可采用上述采样和保存方法。的检测提取选取不超过待鉴定幼虫虫体或成蜂蜂体,置于水处理过的研钵中,加入液氮进行研磨,将研磨得到的粉末,离心管中,加入试剂,用移液器充分吹打蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术.,离心,弃上清液,沉淀室温干燥加水溶解沉淀。冰箱保存备用,溶液应避免反复冻融,并尽快用于检测。提取也可采用其他等效的提取方法或等效的商品化提取试剂盒。反应取反应管,按表的规定配制反应体系,加样宜按空白对照阴性对照待检样品阳性对照的次序分别加入模板,盖上管盖,充分混,并尽快用于检测。提取也可采用其他等效的提取方法或等效的商品化提取试剂盒。反应取反应管,按表的规定配制反应体系,加样宜按空白对照阴性对照待检样品阳性对照的次序分别加入模板,盖上管盖,充分混匀。蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术。福建省地方标准蜜蜂以色列急性麻痹病毒感染的蜂群,挑取带有临床表现的蜜蜂或新鲜死亡蜜蜂只也可挑取单个病死虫或蛹只装入无菌的小试管内发现患病蜂王也可采取单个蜂王个体。若样品内能送达实验室,应保存若样品内不能送达实验室,则应或更低温度保存。对于无临床表现的蜂群也可采用上述采样和保存方法。的检测提取选取不超过待鉴定幼虫虫体或成蜂蜂体逆转录酶聚合酶引物引物探针水模板对照将已加样的反应管短暂离心后放入仪,扩增反应条件设定为反转病的疫病概述临床诊断实验室诊断和结果判定。本标准适用于蜜蜂以色列急性麻痹病毒病的诊断和蜜蜂以色列急性麻痹病毒感染的监测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。阴性对照为灭活的其他蜜蜂病毒或未感染的蜜蜂组织或不含目的片段的。空白对照用无菌水代替样品。样品采集和保存选择疑探针水模板对照将已加样的反应管短暂离心后放入仪,扩增反应条件设定为反转录预变性之后变性,退火,收集荧光,共个循环。同时设阳性阴性对照和空白对照。凝胶成像系统。电子天平感量。冰箱和–。材料和试剂试验用水应符合中级水的规定。焦炭酸乙酯处理水诊断技术发布实施福建省市场监督管理局发布目次前言范围规范性引用文件缩略语疾病概述临床诊断实验室诊断结果判定附录规范性附录溶液的配制附录资料性附录参考序列附录资料性附录核酸扩增电泳图前言本标准按照次,室温放置加入氯甲烷,旋涡振荡混匀,室温放置,离心取上层水相至新的离心管中,加等体积异丙醇,上下颠倒数次混匀,放置,离心弃上清液,沉淀用乙醇清洗,离心,弃上清液,沉淀室温干燥加水溶解沉淀。冰箱保存备用,溶液应避免反复冻反应管短暂离心后放入仪,扩增反应条件设定为反转录预变性之后变性,退火,延伸,运行个循环补充延伸,保温。以水作为空白对照,同时设阳性对照和阴性对照。琼脂糖凝胶电泳的琼脂糖凝胶平板,其中含有或与等效的商品化核酸染料。将平板放入水平电泳槽,使电泳缓冲液刚好淹没胶面。将产物预变性之后变性,退火,收集荧光,共个循环。同时设阳性阴性对照和空白对照。阴性对照为灭活的其他蜜蜂病毒或未感染的蜜蜂组织或不含目的片段的。空白对照用无菌水代替样品。样品采集和保存选择疑似感染的蜂群,挑取带有临床表现的蜜蜂或新鲜死亡蜜蜂只也可挑取单个病死虫或蛹只装入无菌的小试管内发现患病蜂王也可采取单蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术.,并尽快用于检测。提取也可采用其他等效的提取方法或等效的商品化提取试剂盒。反应取反应管,按表的规定配制反应体系,加样宜按空白对照阴性对照待检样品阳性对照的次序分别加入模板,盖上管盖,充分混匀。蜜蜂以色列急性麻痹病毒病诊断技术。福建省地方标准蜜蜂以色列急性麻痹病毒并经测序验证者为核酸阳性,无条带或条带的