样品打碎成细粉。细粉放人的聚乙烯离心管中提取，加人提取液粉碎种子，将细粉和提取液充分混合，于室温下放置或夜，于条件下离心，取清澈的上清液用于电泳。凝胶制备根据设备的结构和类型安装好清洁干净的胶膜。事先用硅处理玻璃板，可使电泳后的凝胶容易剥离。胶膜可以固定在塑料支架上，这样就可以在灌胶时保持住凝胶。制备两块凝胶的办法如下取凝胶缓冲液，加人丙烯酞胺，尿素，抗坏血酸，。硫酸亚铁，摇匀后再用凝胶缓冲液定容至，的过氧化氢溶液每凝胶溶液加，快速混随机数取至少粒种子，次重复，每个重复粒种子，如作染色体倍数的初始测定，可用粒当初始鉴定不能得出结论时，须再取粒种子进行鉴定。将种子置于适宜发芽床上萌发，当幼苗达到适当的生长阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定，有的需进步处理，有的可直接鉴定。在测定染色体倍数时，切开根尖或其他细胞在显微镜下进行鉴定。有些品种可根据其芽鞘颜色分类。将种子放在垫有潮湿滤纸的培养皿里萌发，当幼苗发育达到适当阶段时，鉴定芽鞘的颜色，其变异范围可以从绿色到紫色。可用氯化钠或盐酸溶液湿润滤纸使其加深颜色，或在鉴定前用紫外光照射幼苗大部分多花黑麦草品种的大多数幼苗根迹在紫外光下显现荧光，而大部分多年生黑麦草品种的大多数幼苗根迹不显现荧光。为了测定幼苗根迹对紫外光的反应，可将种子放在合适的无荧光的白色湿润滤纸上，在变温或恒温黑暗或弱光不超过条件子形态特征鉴定种及品种时，如有必要，可借助放大镜进行观察测定种子色泽时，可在自然光或特定光谱如波长为的紫外灯下观察。大麦属最有效的鉴定特征是籽粒形状外秤基部籽粒颜色腹沟基刺腹沟宽度小穆轴茸毛多少侧背脉纹齿状突起内外俘褶皱鳞被形状及茸毛稀密等。燕麦属的籽粒颜色是有效特征，可分为白色灰黄色黑色等。燕麦属和大麦籽粒颜色可在萦外光下加以区别，如白色燕麦种子显现荧光，黄色燕麦种子不显现荧光。豌豆属和羽扇豆属植物种在种子颜色大小和形状上存在着可供鉴别的差异，可在日光或紫外光下直接用肉眼进行观察。化学测定通常是借助种特别的化学试剂与种子特有成分反应来鉴定品种。羽扇豆属植物碱测定羽扇豆属种子中是否含有生物碱是种种间鉴别特征。先将种子放人水中浸泡，然后将每粒种子切薄片置于玻璃板上，衬以白色背景，加滴溶液卢戈氏液将。碘和。碘化钾溶于水中，水泵式油泵真空干燥器不同规格的移液管微量进样器试剂瓶烧杯容量瓶角烧瓶滴管培养皿注射器及针头等。所有化学试剂都应是分析纯级或相当的等级丙烯酞胺经专门纯化后用于电泳亚甲基双丙烯酞胺经专门纯化后用于电泳经甲基氨基甲烷甘氨酸盐酸十烷基硫酸钠丙醇琉基乙醇甲基甲酞胺过硫酸按或核黄素甲基乙胺甲醇冰乙酸抓乙酸蓝或蓝，或任何相当于考马斯亮蓝或系列染料的试剂澳酚蓝。，溶解于约蒸馏水中，滴加的盐酸溶液调盐酸约为每升蒸馏水中含盐酸原液，滴加这种溶液约，然后定容至，存放于下，溶解于约蒸馏水中，开始滴加盐酸原液约，之后再用几盐酸溶液加调，然后定容至.牧草种子检验规程种及品种鉴定.，然后冷却，再放人冰乙酸和乙醇的溶液中脱色，其间常加摇动结果鉴定通常采用比较方法，即比较样品的蛋白质谱带类型是否与标准对照品种的相致。应在每块胶片上都配加个已知样品作为对照，该对照品种应具有确定的蛋白质谱带及其详尽描述如对照品种的谱带清晰可辨，可作为该胶片的定性标准，对该胶进行分析比较，鉴定种子真实性及品种纯度。此外，由于每块胶片中都有已知分子重量的标准蛋白，不同的胶片可以借其得到校核，并计算出那些主要蛋白质谱带的分子重量。附录标准的附录鉴定燕麦品种的聚丙烯酸胺凝胶电泳的标准参照方法原理从种子中提出来的脉蛋白或乙醇溶蛋白初级燕麦蛋白可用的聚丙烯酞胺凝胶电泳进行分离，所产生的蛋白谱带可作为品种的指纹，这种指纹可用来鉴定未知品种，并通过分析单粒种子来测定品种的混杂程度即对品种进行鉴定。般推荐测定样品为粒种子。如要求非常准确地色是有效特征，可分为白色灰黄色黑色等。燕麦属和大麦籽粒颜色可在萦外光下加以区别，如白色燕麦种子显现荧光，黄色燕麦种子不显现荧光。豌豆属和羽扇豆属植物种在种子颜色大小和形状上存在着可供鉴别的差异，可在日光或紫外光下直接用肉眼进行观察。化学测定通常是借助种特别的化学试剂与种子特有成分反应来鉴定品种。羽扇豆属植物碱测定羽扇豆属种子中是否含有生物碱是种种间鉴别特征。先将种子放人水中浸泡，然后将每粒种子切薄片置于玻璃板上，衬以白色背景，加滴溶液卢戈氏液将。碘和。碘化钾溶于水中，若切片产生棕红色沉淀，即表明含生物碱。记录含或不含生物碱种子数。测定当对燕麦种子荧光测定有怀疑时，特别是对经处理或恶劣气候条件下收获的种子，则可用盐酸溶液测定将种子浸人盐酸溶液份盐酸溶液和份蒸馏水配制而成中，捞出种子置于滤纸上，使其自然风干，根据棕褐色多数情况下较为适宜。如果需要，可加人的滨酚蓝水溶液含的丙醇于各样品槽中作为指示剂也可预先混入提取缓冲原液见中。如果胶模原先用粘条密封，此时可将下方即底部的粘条取掉。用电极缓冲液将样品槽充满需小心，不要使样品液搅动。凝胶放置于电泳槽中，开始每块胶先用的电流电泳，当前沿指示剂迁移出浓缩胶后，电流增加至，直至澳酚蓝指示剂迁移到凝胶底部。温度应保持在范围，电极缓冲液可用自来水或冷却液进行循环冷却有数种不同的方法可用来固定和染色蛋白质如无需立即得出结果，在电泳结束后从胶模中取出凝胶放在固定液中，并缓缓摇动至少，再用蒸馏水漂洗，然后放于染色液见中至少通常过夜将染色后的凝胶用蒸馏水漂洗如果背景颜色较深，可加人，然后密封于聚乙烯袋中，供检查或拍照。如果密封得当，凝胶可于下保存若干个月。如需快速染色，凝胶可放在较高温度下固定和染色冷冻见中表的规定方法进行处理。当根系发育到足够程度幼苗根迹产生的荧光都能被检查出来时即可在紫外光灯下进行鉴定。为了看清伸人纸层内的根有无荧光，须将不显现荧光的幼苗从滤纸上取出。记载每重复显现荧光及无荧光的幼苗数及正常幼苗数。其结果用整数填报紫羊茅和羊茅可用与黑麦草属相同的方法进行鉴别。在含有氨的空气中，其根部本身会发出荧光。在紫外光照射下，紫羊茅根显现黄绿色的荧光，而羊茅根则显现蓝绿色荧光。种子可按规定的黑麦草属方法进行发芽。当幼苗充分发育后，便可进行鉴定，鉴定前可用取浓，加人喷施幼苗上，后在紫外灯下进行鉴定，记录每重复显现黄绿色或蓝绿色荧光的幼苗数。所播种子量要充足以保证能长成株植株，但攀缘的或甸旬的种数量可减少。种子按中的规定取得。.牧草种子检验规程种及品种鉴是比较方法，即比较燕麦的个未知样品的蛋白质谱带的轮廓外形与提取的可靠的参照样品是否致，同时加以分析。对于燕麦醇溶蛋白国际上没有统的命名体制，而且燕麦的蛋白谱带是按顺序记数或者测定它们的相对迁移率大麦黑麦草和普通早熟禾等种子的苯酚测定根据种子内外秤染色鉴定大麦燕麦和黑麦草种子。采用纸上法，于下预湿。将种子移人经。苯酚溶液结晶石碳酸加人蒸馏水湿润的滤纸上，室温下进行处理，燕麦，大麦，黑麦草和普通早熟禾，检查和记录颜色反应，与标准样品进行比较。通常颜色分为不着色浅褐色褐色深褐色黑褐色和黑色。的标准参照方法见附录标准的附录。的标准参照方法见附录标准的附录。了幼苗鉴定，试验样品按，从试验样品中随机数取至少粒种子，次重复，每个重复粒种子，如作染色体倍数的初始测定，可用粒。检验程序送验样品的重量送验样品的最低重量应符合表的规定。表种及栽培品种鉴定的送验样品最低重量种类限于实验室侧定田间小区及实脸室测定碗豆属，野豌豆属，羽扇豆属及种子大小类似的其他属大麦属，燕麦属，黑麦属及种子大小类似的其他属甜菜属及种子大小类似的其他属所有其他属按的规定分取试验样品，随机从试验样品中数取至少粒种子，检验时须设重复，每个重复不超过粒种子。如采用电泳法，试验样品的量可适当减少见附录标准的附录。根据种子形态特征鉴定种及品种时，如有必要，可借助放大镜进行观察测定种子色泽时，可在自然光或特定光谱如波长为的紫外灯下观察。大麦属最有效的鉴定特征是籽粒形状外秤基部籽粒颜色腹沟基刺腹沟宽度小穆轴茸毛多少侧背脉纹齿状突起内外俘褶皱鳞被形状及茸毛稀密等。燕麦属的籽粒颜冰醋酸，甘氨酸。，加无离子水定容至工，低温保存。冰醋酸，加无离子水定容至低温保存。固定及染色液把考马斯亮蓝或同类试剂甲醇和氛乙酸容于无离子水中。程序除去内外秤，用手钳夹碎样品，或用研磨或电动搅碎机将样品打碎成细粉。细粉放人的聚乙烯离心管中提取，加人提取液粉碎种子，将细粉和提取液充分混合，于室温下放置或夜，于条件下离心，取清澈的上清液用于电泳。凝胶制备根据设备的结构和类型安装好清洁干净的胶膜。事先用硅处理玻璃板，可使电泳后的凝胶容易剥离。胶膜可以固定在塑料支架上，这样就可以在灌胶时保持住凝胶。制备两块凝胶的办法如下取凝胶缓冲液，加人丙烯酞胺，尿素，抗坏血酸，。硫酸亚铁，摇匀后再用凝胶缓冲液定容至，的过氧化氢溶液每凝胶溶液加，快速混然后放于染色液见中至少通常过夜将染色后的凝胶用蒸馏水漂洗如果背景颜色较深，可加人，然后密封于聚乙烯袋中，供检查或拍照。如果密封得当，凝胶可于下保存若干个月。如需快速染色，凝胶可放在较高温度下固定和染色，然后冷却，再放人冰乙酸和乙醇的溶液中脱色，其间常加摇动结果鉴定通常采用比较方法，即比较样品的蛋白质谱带类型是否与标准对照品种的相致。应在每块胶片上都配加个已知样品作为对照，该对照品种应具有确定的蛋白质谱带及其详尽描述如对照品种的谱带清晰可辨，可作为该胶片的定性标准，对该胶进行分析比较，鉴定种子真实性及品种纯度。此外，由于每块胶片中都有已知分子重量的标准蛋白，不同的胶片可以借其得到校核，并计算出那些主要蛋白质谱带的分子重量。附录标准的附录鉴定燕麦品种的聚丙烯酸胺凝胶电泳的标准参照方法原理从种子中提出来的脉蛋白或乙醇种情况并不必采用国际