谱分析物质的准分子离子峰，结合图谱判定液相图谱中对应峰的准分子量。二级质谱电离,质谱仪会自动选择信号较强的准分子离子流，得到准分子离子流的二级质谱图谱。从图谱中，可以判定出共有个特征峰，结合级质谱图与二级质谱图，对六个特征峰进行如下质谱分析峰次二次质谱如下峰保留时间。，。可能是鞣花酸或者槲皮素的分子离子峰，而，是鞣花酸的碎片模式，因此，峰物质为鞣花酸类黄酮甙，根据其准分子量黄酮甙元碎片模式以及糖甙的碎片分子量推测可能为鞣花酸共轭戊糖或者鞣花酸阿拉伯糖甙。峰峰峰物质的分子结构结构如下鞣花酸结构式峰次二次质谱如下峰保留时间。。，是槲皮素的碎片模式，因此，峰物质为槲皮素类黄酮甙，根据其准分子量黄酮甙元碎片模式以及糖甙的碎片分子量推测可能为槲皮素葡萄糖甙，或槲皮素半乳糖甙。峰峰峰物质的分子结构如下峰槲皮素葡萄糖甙结构式峰次二次质谱如下峰保留时间。。，是鞣花酸的碎片模式，鞣花酸物质标品的图谱与组分中峰的物质保留时间也致，因此，峰物质为鞣花酸。峰峰峰物质的分子结构相同，见峰。峰次二次质谱如下峰保留时间。，。是山奈酚的分子离子峰。因此，峰物质为山奈酚类黄酮甙，根据其准分子量黄酮甙元碎片模式以及糖甙的碎片分子量推测可能为山奈酚芸香糖甙。峰峰峰物质的分子结构如下峰山奈酚结构式峰次二次质谱如下峰保留时间。。,槲皮素的碎片模式，因此，峰物质为槲皮素类黄酮甙，根据其准分子量黄酮甙元碎片模式以及糖甙的碎片分子量推测可能为槲皮素，二葡萄糖甙，。峰峰峰物质的分子结构如下峰槲皮素，二葡萄糖甙峰次二次质谱如下峰保留时间。，。可能是鞣花酸或者槲皮素的分子离子峰，而，是鞣花酸的碎片模式。因此，峰物质为鞣花酸类黄酮甙，根据其准分子量黄酮甙元碎片模式以及糖甙的碎片分子量推测可能为鞣花酸乙基阿拉伯糖甙或者鞣花酸乙基木糖甙。峰科技于智峰,王敏,王军,等苦荞黄酮大孔吸附精提物的结构鉴定食品与发酵工业,盛龙生,汤坚,等液相色谱质谱联用技术在食品和药品分析中的应用北京化学工业出版社,,,,致谢在为期两个多月的本科毕业论文的实验过程中，在导师的指导与帮助下，不但使我能够更周密的设计与进行实验，同时也让我学到了更多的理论知识及实验操作能力。为今后的学习打下了良好的基础。本论文是在导师黄丽老师的悉心指导下完成的，导师渊博的学识严谨的教学态度及随和的为人，使我受益非浅。在此，向黄老师致以衷心的感谢。在整个实验过程中，还得到了滕建文教授和于兰老师的指导与帮助。同时，还要感谢师姐师兄，以及同团队的同学的帮助。峰峰物质的分子结构如下峰鞣花酸乙基阿拉伯糖甙综上可知，甜茶中黄酮类物质主要以黄酮甙类的形式存在，与第二章通过萃取效果推断出甜茶黄酮中含有黄酮甙是致的。同时也证明了乙酸乙酯相具有的抗氧化性确实又其中所含有的黄酮类物质引起证明了第二章中关于甜茶中的黄酮类物质具有抗氧化性的推断。通过级二级质谱，可以判定出甜茶黄酮甙元可能包含鞣花酸槲皮素及山奈酚。对照陈全斌等人在甜茶中黄酮甙元的分离提纯及其表征中的研究结果甜茶叶中含有黄酮甙，其甙元分别为槲皮素和山奈酚，与本实验所得出的结论基本致。与陈全斌等人的研究相比较，其在试验中主要采用分析法与红外光谱法，并没有采用技术对甜茶中的黄酮甙进行结构分析，而本实验在的基础上采用质谱技术从分子结构层次鉴定了甜茶黄酮甙的种类及其分子结构，不但从分子结构进步证明了甜茶黄酮甙元为槲皮素和山奈酚，并且测定出其中的黄酮甙元中可能包含鞣花酸，拓展了陈全斌等人的研究，同时也填补了技术在甜茶黄酮鉴定中应用的空白。本章小结本章以相萃取相乙酸乙酯相为实验原料，利用技术对甜茶中黄酮类物质的种类进行了鉴别，得出甜茶中黄酮类物质主要以黄酮甙类的形式存在，证明了在第二章中关于甜茶中黄酮类物质的推断。同时根据与级二级质谱确定了甜茶中黄酮类物质主要以黄酮甙类的形式存在，并且确定了其中甙元可能包含鞣花酸槲皮素及山奈酚。拓展了陈全斌等人的研究，同时也填补了技术在鉴定甜茶中黄酮类化合物的空白。第四章总结与展望总结本文以广西甜茶为原料，主要研究了甜茶黄酮的萃取纯化工艺，对三种不同的萃取系统做了对比研究，通过萃取效果的不同初步判断出甜茶中黄酮类物质以黄酮甙为主，同时研究了萃取相乙酸乙酯相与相的抗氧化活性，最后利用技术对甜茶黄酮进行初步鉴定，主要实验结果如下利用三种萃取系统对相进行萃取，得出三种萃取系统的萃取效果依次为乙酸乙酯水乙酸乙酸乙酯水正丁醇水。乙酸乙酯水乙酸系统的萃取效果最好，提取到黄酮含量达的萃取液。根据乙酸乙酯与正丁醇萃取效果的对比与黄酮类化合物溶解性规律，初步判定出甜茶中黄酮类化合物种含有大量的黄酮甙。以萃取相乙酸乙酯相与相为实验原料通过自由基清除实验与羟自由基实验，比较了乙酸乙酯相和相与参比样儿茶素的清除自由基能力即抗氧化能力，得出乙酸乙酯相和相具与儿茶素相似的自由基清除能力，且其自由基清除能力大小依次为乙酸乙酯相儿茶素相。通过乙酸乙酯相和相抗氧化能力的对比，得出明随着提取物中总黄酮含量的提高，其抗氧化能力也随之提高。从而推断出甜茶中的黄酮类物质具有很好的抗氧化能力。以萃取相乙酸乙酯相为实验原料，利用技术，对甜茶中黄酮类物质的种类进行了鉴别，确定甜茶中黄酮类物质主要以黄酮甙类的形式存在，证明了上述的推断。同时根据级二级质谱确定了其中甙元可能包含鞣花酸槲皮素及山奈酚。展望对萃取后的甜茶黄酮提取液能够进行二次纯化，以期得到黄酮含量更高的提取液。对甜茶黄酮运用体内测定评价方法，评价其抗氧化性，做到体内体外评价相结合。利用得出结论进步分析其抗氧化活性的构效关系。研究甜茶中的酚类物质等其他具有生物活性的物质，进步发掘甜茶的营养保健价值。参考文献黄汉强甜茶应用研究时珍国药研究邓绍林广西甜茶叶片的营养成分及开发利用价值研究中国林副特产俞灵莺,李向荣植物黄酮类抗糖尿病及其并发症的研究进展国外医学卫生学分册黄佩芳,蒋世琼甜茶的综合开发广西化工,钟映富,胡翔,等甜茶及其开发利用西南园艺,陈春刚,韩芬霞生物类黄酮的研究与应用综述安徽农业科学裴月湖天然药物化学实验北京人民卫生出版社张岩,曹国杰,张燕,等黄酮类化合物的提取以及检测方法的研究进展食品研究与开发,郭雪峰,岳永德黄酮类化合物的提取分离纯化和含量测定方法的研究进展安徽农业科学李巧玲黄酮类化合物提取分离工艺的研究进展山西食品工业,聂丽,罗万芳,王兴文大孔树脂分离纯化三七黄酮类成分研究云南中医学院学报,李嵘,金美芳微波法提取银杏黄酮甙的新工艺食品科学宋秋华,张磊,梁飞,等黄酮化合物研究进展山西化工张水华主编食品分析中国轻工业出版社,赵红芳,杨亚玲,等云南甜茶中总黄酮的提取及其抗过敏活性研究河北化工杜晖,陈晓青,黄冰大孔吸附树脂分离纯化夏枯草总黄酮的工艺研究中成药,杨武英,上官新晨,徐明生等聚酰胺树脂精制青钱柳黄酮的研究天然产物研究与开发,张艳霞菠萝蛋白酶的分离纯化及稳定性研究山东大学硕士学位论文杜晖,陈晓青,黄冰大孔吸附树脂分离纯化夏枯草总黄酮的工艺研究中成药,文镜,贺索华,杨育颖,等保健食品清除自由基作用的体外测定方法和原理食品科学文镜,贺素华,张博成,等红景天提取物清除和的体外实验研究食品科学彭长连用清除有机自由基法评价抗氧化能力生物化学与生物物理进展邓胜国,邓泽元,黄丽荷叶黄酮体外抗氧化活性的研究食品科技,,宁永成有机化合物结构鉴定与有机波谱学第二版北京科学出版社杨亚玲,赵红芳,苏毅,赵榆林,周强固相萃取和高效液相色谱法测定甜茶中的黄酮类物质食品科学唐竞高效液相色谱法测定柿叶中槲皮素和山奈酚的研究山西医药杂志,陈全斌,沈钟苏,张巧云,阮敏,黄绍军甜茶中黄酮甙元的分离提纯及其表征林使邻二氮菲在处的最大吸收峰消失。根据处光密度变化判断受试物清除的能力。需要注意的是，测定时加样方法对结果有重要影响。需先将邻二氮菲及水混匀，并且每管加入后立即混匀，否则会使局部颜色过浓，影响重复性。清除自由基法清除,二苯基苦肼基自由基法是近年来国内外普遍使用的种研究抗氧化剂的方法，具有快速简便灵敏易检测和直接可行的优点被广泛用于抗氧化剂的研究。是种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对自由基的清除效果。抗氧化能力越强，吸光度值下降越大，溶液的颜色越淡。还原能力还原力的测定是检验样品是否是良好的电子供体的方法。还原能力是从提供电子能力的角度来检测物质的抗氧化性，抗氧化剂通过自身的还原作用给出电子。在反应中，抗氧化剂提供的电子，能够中断自动氧化成氢过氧化物的链锁反应，这样就可以表现出该物质的还原能力。测定还原能力实验中常以作为氧化剂，将还原为，颜色由黄色变为蓝绿色，在紫外光谱中处有强吸收。吸光值越大，表明还原能力越强，抗氧化性越强。抗油脂过氧化力测定脂类包括的范围很广，是构成生物膜的主要成分，脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化，脂类过氧化过程中会产生等自由基以及，这些产物会损伤生物细胞。因此，能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。硫氰酸铁盐比色法是基于在酸性