鼻咽癌发生发展中的分子机制及与微环境的相互作用的分子机制，建立正常鼻咽组织和鼻咽癌的蛋白表达谱，筛选差异表达蛋白运用三维细胞培养模型研究差异蛋白及其相互作用蛋白在引起的鼻咽癌发生和发展过程中的作用及与微环境相互作用的分子机制，进而确定出批具有靶点意义的蛋白质。

相关基因调控自噬促进鼻咽癌发生发展及其分子机制早期基因的病毒性同源基因潜伏膜蛋白基因等对细胞自噬的影响及分子机制。

相关基因抑制自噬对自体免疫影响，促进其潜伏感染，阻断其自噬抑制作用能促进对的清除研究。

相关基因抑制自噬，促进基因组不稳定性和非整倍体的形成，从而促进肿瘤的发生发展及其分子机制。

型型变异体诱导细胞转化功能的研究利用细胞转染技术，鉴定型亚洲变异体突变的对细胞增殖及转化作用。

利用已成熟的细胞内及体外转录翻译方法，鉴定突变的型对抑癌蛋白的降解作用及对活性的抑制作用。

利用细胞转染技术，鉴定型的对细胞增殖及转化的作用。

试建立食管上皮细胞系或原代培养模型，鉴定型病毒对食管上皮的转化作用。

用已成熟的细胞内及体外转录翻译方法，鉴定型对宿主抑癌蛋白对抑癌蛋白功能的阻断作用。

通过定量以及测序分析食管癌中型的病毒载量整合状态与食管癌变的相关性。

研究目标利用建立好的高效感染正常上皮细胞模型，阐明感染鼻咽上皮细胞的时机和机制阐明鼠疱疹病毒在从头感染过程中由细胞质膜转运到细胞核膜的分子机制，为研究感染上皮细胞的详细途径打下坚实基础。

解析与微环境相互作用的分子机制及发展潜在的靶点蛋白，为鼻咽癌的早期干预和治疗方式提供新线索。

阐明相关基因通过对自噬调控影响其潜伏感染及基因组稳定性，从而促进鼻咽癌发生发展的分子机制，为鼻咽癌的预防和治疗提供理论依据和实验基础。

探讨型型变异体致癌机制经费比例承担单位中山大学广西医科大学北京市肿瘤防治研究所课题负责人曾木圣学术骨干朱孝峰陶然张哲陈克能课题五致瘤病毒及细胞内信号通路靶向治疗的基础研究研究内容感染和信号通路及干预研究致瘤主要通过编码的致瘤蛋白异常激活宿主细胞内信号网络参与细胞癌变的发生发展。

感染与表观遗传学改变在鼻咽癌变早期就发挥关键作用，的概念，为基于肿瘤表观遗传的干预与治疗指明了方向。

因此从信号通路与表观遗传的角度研究靶向病毒及肿瘤信号通路和网络干预的机制研究，将为肿瘤靶向治疗和预防提供新思路。

本课题利用课题组在肿瘤信号转导研究领域的优势，以编码的致瘤蛋白激活的信号网络中关键蛋白激酶导致激活为切入点，从转录调控的角度，阐明天然产物化学小分子靶向干预激活的蛋白激酶的分子机制，并选用三种在鼻咽癌中呈高频甲基化失活的基因为代表，逆转因高活性造成的，恢复相关基因表达及功能，这将为在鼻咽癌变中提供靶向干预策略的可行性及应用前景的实验依据。

激活与细胞裂解的分子机制研究表明，诱导裂解感染是种治疗鼻咽癌等阳性肿瘤的有效方法。

本课题拟应用传统化疗药物和药用植物提取物或免疫疗法等方法诱导裂解感染，同时应用活细胞检测不同处理是否能够特异性诱导含的细胞死亡增加通过检测立即早期蛋白和的启动子的激活及参与筛选感染上皮细胞的潜在受体确定相关基因参与的信号途径以及诱导裂解性复制的信号途径发表论文篇，申请专利个。

研究内容进行致病性亚型分布的研究，筛选高风险人群研究在感染转化上皮细胞以及体内激活等方面，环境危险因素宿主遗传背景间存在相互作用及机制致瘤病毒感染转化上皮细胞途径与机制涉及的信号途径包括相关基因的信号网络和裂解性复制等的研究预期目标明确亚型其人群分布特征及高风险人群揭示环境危险因素微量元素吸烟以及其它致癌因素个体的遗传变异与在体内的频繁激活相关性及机制阐明环境因素遗传因素促进感染上皮细胞的机制以及诱导正常上皮细胞恶性转化的机制明确重要的功能基因等及其信号通路网络在定宿主遗传背景下起作用的分子机制鉴定感染鼻咽上皮细胞的受体，阐明进入细胞的途径建立感染食管上皮的三维培养模型，阐明诱导细胞恶性转化机制阐明影响涉及信号途径的分子机制发表论文篇，申请专利个。

研究内容研究相关基因调控自噬机制研究表达对信号途径的影响疫苗研发新策略的研究靶点的发现及干预的基础研究调查数据的总结与分析。

预期目标揭示相关基因调控自噬促进鼻咽癌发生发展及其分子机制阐明亚型和变异体对信号途径的影响及机制利用创新的减毒活疫苗策略建构得到疫苗株为鼻咽癌食管癌的干预和公共卫生学政策的制定提供系列基因环境病毒交互作用的相关重要参数筛选鉴定个潜在靶点发表论文篇，申请专利个。

研究内容本项目拟解决的关键科学问题是选择我国特色恶性肿瘤鼻咽癌和食管癌为研究模型，以致瘤性病毒感染为主线，研究在定遗传和环境背景下致瘤病毒在鼻咽癌以及食管癌发生发展中的作用机制。

我国鼻咽癌患者占世界鼻咽癌总患病人数的以上，而食管癌死亡病例占全球每年该病死亡总数的半左右，因而鼻咽癌和食管癌都是我国特色恶性肿瘤，它们引起的死亡率分别占我国恶性肿瘤死亡率的第八和第四位，是危害我国人民健康的重大疾病。

经过多年的研究表明，鼻咽癌食管癌的发生发展与致瘤性病毒感染遗传环境因素密切相关，其中感染是病因网络的关键节点。

因此，阐明在定遗传和环境背景下的感染和致瘤机制，有望使鼻咽癌食管癌成为继宫颈癌后可预防恶性肿瘤新典范。

围绕上述科学问题，本项目拟以具有我国特色的常见恶性肿瘤鼻咽癌和食管癌为疾病模型，研究致瘤性病毒与环境危险因素宿主易感遗传背景间的相互作用，及其在肿瘤的发生发展中的作用机制。

主要研究内容包括结合高通量测序技术，研究的序列变异特征，鉴定致瘤性病毒亚型和变异体以鼻咽癌高发区流行病学研究为基础，研究吸烟等环境危险因素以及致癌物代谢修复细胞周期和凋亡控制肿瘤免疫等以及基于全基因组的基因遗传变异在肿瘤发生发展中的交互作用机制结合食管癌高发区流行病学研究，探索吸烟和酗酒等环境危险因素以及致癌物代谢修复细胞周期和凋亡控制肿瘤免疫等以及基于全基因组的基因遗传变异协同致癌机制在致瘤病毒高效感染上皮细胞体外模型的基础上，研究致瘤病毒感染上皮细胞机制，探讨其诱导上皮细胞转化的机制以及探索致瘤病毒感染与微环境相互作用机制系统地研究病毒在细胞内信号通路调控网络，探讨致瘤病毒激活导致肿瘤细胞裂解的分子机制，发现新靶点并针对靶点利用小分子药物进行干预的基础研究以及疫苗研发新策略研究。

信号通路，阐明诱导产生裂解的分子机理利用小鼠模型在体内研究诱导裂解感染能否减缓或抑制鼻咽癌的生长。

这将从病毒自身机理角度为致瘤病毒的靶向治疗提供重要的实验依据。

疫苗研发新策略研究本课题拟首先利用细菌人工染色体从基因组上删除个免疫逃逸基因，和，构建重组病毒。

通过检测在不同器官或组织内的病毒滴度和基因拷贝数来测试病毒作为疫苗的保护效果，并利用小动物活体成像技术来监测和实时跟踪病毒在小鼠体内不同时间点的感染。

之后利用酶联免疫吸附和中和实验来测定病毒特异性抗体的滴度，利用活体成像技术来检测这些病毒特异性的抗体或细胞是否可以提供保护，评估病毒作为疫苗的效果。

感染和信号通路及干预食管鳞癌的发生与的感染密切相关。

本课题研究在食管癌癌变过程中编码的早期病毒癌基因激活的细胞信号通路，进步阐明其生物学作用和分子机制。

以信号通路为核心，主要研究对其上游蛋白，等相关信号途径中的调节分子的作用及与，等信号通路的交叉作用。

这将从信号转导的角度阐明病毒蛋白在食管癌中的致癌机制，为食管癌的化学小分子阻断和干预提供重要的实验依据。

研究目标确定病毒致瘤蛋白异常激活的信号通路，筛选出关键的信号靶分子及阐明干预的作用机制。

阐明病毒自身复制导致肿瘤细胞裂解的分子机制及靶向治疗。

开发出创新的疫苗策略，为的免疫治疗引领新方向。

为致瘤病毒及宿主细胞内信号通路靶向治疗提供重要的实验依据。

经费比例承担单位中南大学中国农业大学上海交通大学中山大学浙江大学课题负责人曹亚学术骨干封文海吴婷婷邓炯刘强孙雪青四年度计划研究内容进行全基因组序列分析，以鉴定致瘤病毒亚型在食管癌高发人群河南安阳地区建立以感染与病理检测为主的前瞻性队列，研究食管各亚型自然感染率传播途径感染消长规律感染型别特点以及与食管癌发生发展间关联型全基因组序列测定，鉴定变异体及其核苷酸多态性食管癌的全基因组关联研究，筛选食管癌致病基因或位点进行和感染和致癌机制的研究。

预期目标完成全基因组序列分析的前期准备，收集多株来源于不同地区东南亚北非等不同人群中国南方人爱斯基摩人等的以及收集不同地区不同人群的来源的鼻咽癌患者和健康对照的鼻咽拭子患者包括组织唾液等标本，提取样品初步建立全基因组测序平台在食管癌高发人群河南安阳地区建立以感染与病理检测为主的前瞻性队列，并获得初步的数据完成多个地区型全基因组序列测定，确定中国变异体和全基因组核苷酸多态特征完成食管癌全基因关联研究前期标本的收集，来自高发区有确切感染情况的癌症病人和正常对照外周血淋巴细胞鉴定介导感染鼻咽上皮细胞的糖蛋白优化鼻咽癌三维培养模型与建立并获得不同表达状态食管癌细胞系，比较细胞系发表论文篇，申请专利个。

研究内容全基因组序列分析，鉴定致瘤病毒亚型型变异体与食管癌相关性研究食管癌的全基因组关联研究，筛选食管癌致病基因或位点进行和感染和致癌机制的研究。

预期目标鉴定与鼻咽癌相关的亚型及其序列的变异特征测定食管癌组织中感染及的变异体核苷酸多态性，初