探究AuNPs在收缩丝内的运动和外排过程（无机化学论文）㊣精品文档值得下载

外源性纳米颗粒是否会在细胞迁移时被排出胞外，还缺乏相应的研究。

将细胞与进行孵育后，利用暗场显微镜进行观察发现，在细胞出细胞。

本研究提供了细胞迁移介导的纳米材料外排过程的成像证据，并发现此途径与外泌体介导的胞吐作用具有不同的选择性。

本研究结果对于设计更加高效的纳米药物和肿瘤诊疗探针具有重要意义。

参考文献韩亚琛，冯流星，李红梅，熊金平分析化学，刘磊郝亚亚，邓素辉，王坤，李江，王丽华，樊春海，李嘉隽，柳华杰物理化学学报，鲁爽，方维娜，王丽华，柳华杰高分子学报，谢晓冬，殷敏，李茜，陈楠细胞迁移介导的金纳米颗粒外排作用成像研究分析化学，基金国家自然科学基金项目，资助。

本研究采用作为暗场成像探针，借助单颗粒示踪方法研究了细胞迁移过程中的外排情况。

结果表明，细胞在迁移过程中形成了收缩丝和迁移体结构，以单颗粒或聚集体的形式存在于收缩丝中，并随着胞质起朝胞体方向运动。

∶非常接近，说明细胞迁移介导的的外排并未表现出尺寸选择性。

这结果表明细胞可通过这种途径排出不同尺寸的纳米材料。

上述结果提供了外源性纳米颗粒在细胞迁移过程中发生外排的可视化证据，并提示了这外排途径与经典的外泌体外排途径具有不同的调控和选择方式。

图细胞迁移过程中收缩丝内的暗场成像视野图中距离胞体近中远部分区域的放大图像和在此区域内所有沿收缩丝运动的的轨迹图粒子运动轨迹按追踪持续时间采用伪彩，起点标记为紫色而终点标记为黄色不同区域内的平均运动速率，近中远区域内被追踪的粒子数目分别为和，箱图中横线表示中位数，显著性差异采用检验图细胞迁移完成后残留的收缩丝结构的暗场图像图的原位标记，收缩丝为蓝色线条，迁移探究在收缩丝内的运动和外排过程无机化学论文着胞质回收又重新回到胞体中，或是通过细胞迁移介导的胞吐作用被外排。

因此，利用暗场显微镜对探针在活细胞迁移过程中的运动进行了实时观察。

如图所示，收缩丝可按照其距离胞体的远近分为近中和远个区域分别用红色绿色和蓝色线框标注，对个区域中收缩丝上所有在持续观察窗口每帧时间间隔为内的运动情况分别进行了追踪。

如图中的粒子运动轨迹图所示，在胞体近区，沿着收缩丝朝向胞体方向运动在收缩丝的中部和远端区域，部分的运动轨迹较短。

对于个区域中的的运动速度进行统计，结果表明，近中远区域的运动的平均速度分别为和，随着其与胞体的距离增加而显著下降图。

上述结果表明，胞质在收缩丝中的运动，与胞体距离呈反比，聚集体图和。

此结果提示会在细胞迁移的过程中进入到收缩丝结构内。

然而，与迁移体并未表现出明显的共定位关系。

采用荧光显微镜观察了荧光标记的在细胞迁移过程中的分布。

迁移体结构的形成与跨膜蛋白超家族有关。

此类蛋白家族有个成员，且在各类细胞中均有表达，其中和等蛋白的表达水平与迁移体的数量显著相关。

因此，融合有绿色荧光蛋白的被选择作为标记迁移结构的分子。

在细胞中转染表达了质粒，荧光共聚焦显微成像的结果表明，分散于细胞膜上，清晰地标记了细胞膜和收缩丝等结构图。

与标记的进行孵育后，发现荧光修饰的信号红色伪彩与收缩丝被遗留在胞外。

研究结果表明，外源性的纳米材料可以在细胞迁移过程中被外排。

此研究结果有助于设计更安全高效的纳米材料，并应用于诊断和治疗。

关键词外排作用无机化学暗场成像细胞迁移金纳米颗粒引言纳米材料被广泛应用于人类疾病如癌症和糖尿病的诊断和治疗中，但是，纳米材料进入人体后，会经过肝肾以及免疫系统等途径被清除，降低了靶向诊疗的效率，。

等详细研究了纳米材料的肝胆清除路径，指出肝脏细胞与材料的相互作用是肝脏清除过程的关键。

图和包膜复合结构的电镜图像以及修饰的包膜结构的水合粒径分布平均粒径和表面电势探针孵育细胞的暗场图像细胞内单颗粒以∶的比例混合，下摇床孵育。

然后，加入至终浓度为，后，分次加入溶液，每次间隔，至终浓度为。

孵育后，再以转速离心，移去上清液，用缓冲液重悬清洗，然后将样品转移至中，浓度为，取新溶解的与样品混合∶并于避光孵育，以完成荧光链的杂交。

最后，样品通过离心去除上清液中游离的链，并重悬于缓冲液中，备用。

材料包膜组装纯化和表征采用挤出法制备细胞膜包裹的。

将提取的细胞膜材料冰水浴超声，取膜溶液与合，采用孔径的多聚碳酸酯膜将混合液反复挤出次，收集液体，以离心，取沉淀，并用溶液重悬，再后收集上清液，再次离心后收集上清液，以超速离心后收集细胞膜沉淀，最后以含有的溶液重悬。

修饰荧光链采用加盐老化法在表面修饰巯基链，并与互补的荧光链杂交。

细胞成像与光谱采集对于荧光成像，将摄入材料的质粒转染细胞固定后臵于共聚焦显微镜下观察。

标记的采用氦氖激光器激发，检测通道设臵为，使用红色伪彩，采用激光激发，检测通道为，采用绿色伪彩，的油镜成像。

对于暗场成像，将摄入材料的活细胞样品臵于暗场显微镜下观察。

采用倍油镜数值孔径，高速真彩进行图像采集，其中曝光时间为，成像尺寸为，图像采用径对于其在临床医疗方面的应用转化至关重要。

然而，对于纳米材料是否会在细胞迁移的过程中被清除，还缺乏直接的证据和结论。

本研究以金纳米颗粒作为成像探针，利用暗场显微镜实时地观察和分析了细胞迁移过程中，在收缩丝内的运动和外排过程。

结果表明，部分被细胞摄取的存在于收缩丝内，且颗粒的运动速率随着其与胞体距离的增大而减小，当收缩丝与胞体断开联系后，被遗留在胞外。

研究结果表明，外源性的纳米材料可以在细胞迁移过程中被外排。

此研究结果有助于设计更安全高效的纳米材料，并应用于诊断和治疗。

关键词外排作用无机化学暗场成像细胞迁移金纳米颗粒引言纳米材料被广泛应用于人类疾病如癌症和糖尿病的诊断和治疗中，但是，纳米材料进入人体后，会经过肝肾以及免疫系统等途径的平均运动速率，近中远区域内被追踪的粒子数目分别为和，箱图中横线表示中位数，显著性差异采用检验图细胞迁移完成后残留的收缩丝结构的暗场图像图的原位标记，收缩丝为蓝色线条，迁移体为橙色圆圈，单颗粒为绿点，聚集体为橙色点残留于收缩丝结构中的单颗粒和聚集体的数字和比例结论与纳米颗粒的细胞摄取机制相比，外排的途径和机制研究较为有限，在定程度上阻碍了纳米生物试剂的应用拓展。

最近的研究揭示了迁移性外排这新的外排途径，并证明了此途径在细胞间通讯和胚胎发育等生理过程中发挥重要作用。

然而，尚无证据表明外源性纳米颗粒是否存在细胞迁移介导的外排。

本研究采用探针，结合暗场成像和单颗粒示踪等研究手段，探索了细胞迁移过程中外源性纳较短。

对于个区域中的的运动速度进行统计，结果表明，近中远区域的运动的平均速度分别为和，随着其与胞体的距离增加而显著下降图。

上述结果表明，胞质在收缩丝中的运动，与胞体距离呈反比，即离细胞体越远，运动能力越弱。

细胞迁移介导的外排对于迁移性外排的研究表明，随着细胞的进步迁移，当胞体与收缩丝断开联系后，存在于收缩丝和迁移体中的物质被遗留在细胞外。

利用暗场显微成像对细胞迁移后残留的收缩丝结构进行分析，结果表明，被留在了断开的收缩丝结构内，实现了细胞迁移介导的外排图和。

研究发现，外泌体介导的胞吐作用会随着纳米材料尺寸的增加而减弱，如等发现粒径为和的在的外排百分比分别为和。

为了验证迁移性外排是否也受到纳探究在收缩丝内的运动和外排过程无机化学论文软件进行处理和分析。

光谱采集的曝光时间为。

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细胞膜材料的提取细胞膜提取采用低渗裂解和差速离心法。