放入水浴锅中加热，立即转移至冰水混合物中冰浴，重复上述过程次，最后离心后备用扩增体系大连宝生物公司引物培养基培养基组成如下蛋白胨，酵母提取物琼脂，调整为，并加入去离子水定容至降尘细菌培养分离与计数将城区工业园区和清水江畔采集到的降尘样品各称取，臵于无菌玻璃瓶中，然后加入的无菌水放入摇床均匀振荡后再静臵，经适度梯度稀释后，后，取稀释液涂布平板，然后臵于恒温培养箱中试析凯里市大气降尘颗粒物中微生物组成及多样性环境生物学论文的玻璃瓶中，由于受到实验条件和经费的限制，将该地区采集的样品进行混合鉴定对城区工业园区和清水江畔区域选取采样点信息如下所述凯里市城区各街道均有人流量大交通密集大型建筑多的特点根据其交通人群植物食品建筑绿化等情况，随机选择个采样点，分别是西门中学凯运司苹果山控制措施及各种相关政策落实，颗粒物现已成为城区的首要污染物本研究主要通过收集典型的城区凯里市中心工业区炉山工业园清水江边降尘颗粒物样品，分析凯里市大气降尘颗粒物中的微生物组成浓度及分布特征，在此基础上，通过比对致病菌株数据库分析大气降尘颗粒物中的病原微生物组分，为该地区环境治理及环境质量评价提供数据支撑材料与方法降尘颗粒物的采集大气降尘来源复杂，可分为人为来源和自然来源，例如，工厂加工过程中产生的工业粉尘煤尘地面扬尘建筑灰尘以及生物界中的花粉土壤颗粒物及在自然环境中新生成的矿物等大气降尘对生态环境质量和人体健康具有重要影响，而且它与人体健康效应各终点的流行病学有着密切联系，大气降尘在降水和重力作用下，沉降到土壤地表水等介质中改变土壤的性质，加大水源污染城摘要为了探究空气质量指数较好区域大气沉降中微生物组成及多样性，以凯里市为代表，通过采集凯里城区炉山工业区清水江畔个典型区域大气降尘颗粒物，采用细菌可培养法梯度稀释计数法及基因分子鉴定方法对凯里市大气降尘颗粒物中可培养细菌进行群落结构多样性与丰度分析结果分离得到株，经分类学鉴定为属，优势类群为芽孢杆菌节杆菌及考克氏菌属城我国城市大气降尘的研究现状综述科教文汇下旬刊，曲浩丽，赵娟，肖永良，等南京市春季不同功能区大气微生物群落结构及多样性分析中国农学通报，曲浩丽，肖永良，李立峰，等南京市大气降尘固碳微生物群落多样性研究环境科技，范念斯，齐嵘，杨敏未培养微生物的培养方法进展应用与环境生物学报，杨恩东，崔丹曦，汪维云马赛菌属细菌研究进展微生物学测出的菌属中与其他两个区域的菌种完全不同，并且种类少，发生这种原因很有可能是实验过程中挑取菌株的随机性不够或其他菌落不适合在培养基中生长培养马赛菌属在工业园区中占绝对优势，这可能与该属菌株广泛分布于土壤水体空气中且环境耐受性较强，能够稳定吸附在空气颗粒物中并以气溶胶形式悬浮于大气等因素有关目前人类可培养的微生物种类不到微生物总同区域沉降中可培养微生物种类存在差异，与城区和工业园区相比较，清水江畔沉降细菌种类属数量最高个区域细菌群体丰度和种类差异可能是由不同区域的地理气候等环境差异所致城区人口密集，机动车辆流动大，因而可能携带更多微生物，最终进入大气沉降中清水江沿岸植被覆盖率和水含量较高，并且受人类活动影响相对较小，合适的气候水分和温度等环境更加适应于株细菌基因序列分析结果览表注为城区样品，为工业园区样品，为清水江畔样品图凯里市个典型区域沉降中微生物种类及丰度注柱状图中数字表示不同菌属丰度百分比致病微生物种类经比对人类致病微生物数据库，沉降中包括有芽孢杆菌棒状杆菌假单胞菌和葡萄球菌等潜在致病菌属，特别是最后两类细菌可能会引起气管炎肺炎和败血症等试析凯里市大气降尘颗粒物中微生物组成及多样性环境生物学论文通报，李向阳，王楠，朱小章，杨蒙凯里市大气降尘中可培养微生物群落结构分析研究凯里学院学报，基金国家自然科学基金中国博士后科学基金贵州省科学技术基金计划项目黔科合基础号贵州省科技厅联合基金黔科合字凯里学院博士专项基金凯里学院校级教学改革与研究项目试析凯里市大气降尘颗粒物中微生物组成及多样性环境生物学论文，李晋昌，董治宝大气降尘研究进展及展望干旱区资源与环境，姜毅，季相星大气污染的环境监测及治理分析环境与发展，阚海东，陈秉衡我国大气颗粒物暴露与人群健康效应的关系环境与健康杂志，王明仕，李晗，王明娅，等中国大气降尘地域性分布特征研究生态环境学报，倪刘建南京市不同功能区大气降尘性质及其对土壤影响的研究南京南京农业大学，赵剑波性产物其中城区样品个工业园区样品个清水江畔个进行测序以比对结果最高得分和最大相似度来确定该细菌的属名，结果如表所示从凯里市区沉降中鉴定到的细菌包括芽孢杆菌属节杆菌属考克氏菌属和两面神菌属等种菌属，其中芽孢杆菌属和节杆菌属为主要优势菌属图从炉数的，并且不同微生物对营养组分和生长环境需求差异大，因此本研究采用培养基进行可培养法，并不能完整反映该地区的微生物群落结构总体情况后续将采用基因高通量测序方法来进步解析黔东南州地区大气沉降微生物群落，为深入认识空气质量较好区域大气颗粒物微生物组分提供有用信息参考文献刘创脱，崔邢涛大气降尘在环境质量评价中的应用绿色科种类型细菌生长繁殖，因此微生物种类相对较多炉山工业园区大多是工厂，人流量小，这些因素可能导致微生物种类偏少凯里城区和清水江畔含有芽孢杆菌属微杆菌属节杆菌属且含量占比都较高，这与曲浩丽等人，在研究南京市大气降尘固碳微生物群落多样性和南京市春季不同功能区大气微生物群落结构分析中相致，测出的芽孢杆菌属微球菌属等为优势菌属炉山工业园区检这些潜在致病菌主要分布在城区和清水江畔讨论本研究采用可培养方法并结合基因分子鉴定方法，对凯里市城区工业园区和清水江畔个典型区域大气沉降中微生物进行培养纯化分离及种属鉴定，来深入了解凯里市大气沉降颗粒物中可培养微生物群落结构特征结果显示不同区域的微生物群落存在定差异，凯里城区的微生物浓度含量最高，炉山工业园区最低此外，不山工业园区分离到马赛菌属弗里戈里氏菌属冰冻小杆菌属和副球菌属‐等个属，其中马赛菌属为优势菌占，比例高达图从清水江畔区域降尘颗粒物中鉴定到微杆菌属芽孢杆菌和考克氏菌属等个属菌株，其中微杆菌属占，为主要优势菌属图试析凯里市大气降尘颗粒物中微生物组成及多样性环境生物学论文行菌落计数，然后对多次计算结果平均值随机计数菌落数量得出个区域样品中可培养微生物浓度从高到低分别为城区，清水江畔，工业区，人口相对于后两者密集，交通流量大，初步推断，该区域的降尘颗粒物浓度受人类活动影响较大沉降微生物种类随机挑取个菌株其中城区样品个工业园区样品个清水江畔个进行基因分析，并将获得的个阳引物，模版，补足扩增程序预变性个循环变性，退火，延伸降温保存扩增检测及测序产物使用琼脂糖凝胶电泳进行分析，然后送至赛默飞世尔科技中国有限公司广州进行纯化及基因测序序列分析将测序结果批量提交至美国国立生物倒臵培养，观察培养皿中不同浓度微生物的生长情况，选取菌落数量在个的平板进行菌落计数，并根据公式菌落个数稀释梯度计算样品中细菌浓度所有实验设臵重复，尽量减少随机误差造成的影响基因测序进行微生物分类鉴定菌落扩增基因模板制备用牙签从培养后的平板上随机挑取菌落加入到装有无菌水的离州医院和体育馆采样点工业园区的道路旁重工业区和广场个区域清水江畔下司至镰刀湾段有下司镰刀湾气降尘微生物群落组成并不稳定，很容易受到周围各种环境因素和其他因素的影响，导致其微生物群落发生改变，特别是气候因素，基于上述考虑，本研究选择在月初，微风时期进行样品采集根据降尘颗粒物的不同来源进行分区采集样品，采样高度距地面，采集的位臵主要包括公路边的电线杆公交站台建筑楼以及窗台用毛笔刷将不同位臵采集到的降尘通过滤纸扫到灭菌好市与工业区生产排放出的污染物还能以扬尘或降尘的形势释放到大气环境中，降低空气质量大气沉降携带的细菌还可以通过呼吸饮食等方式进入人体，给人体健康带来危害，当前对大气降尘的研究主要集中在大气降尘的理化性质传输机制时空分布环境效应等方面，对其生物组分特性了解较少凯里作为全国优秀旅游城市，环境空气质量优良天数常年名列前茅随着系列大气污染城区样品中微生物浓度最高，但是清水江畔样品中微生物种类数量最多研究结果对认识凯里市大气颗粒物中微生物组分及其多样性具有定参考价值关键词基因凯里市可培养细菌大气沉降大气降尘环境生物学大气降尘是大气颗粒物的重要组分之，粒径多在到之间，主要通过降水的方式并在重力作用下自然沉降于地面或沉积在地球表层大