关于模块化三维灌注培养系统的研究（生物工程论文）㊣精品文档值得下载

胞试验得到。

典型的维静态培养将来源人体或动物组织的单或混合细胞种在塑料或者玻璃平板上，浸泡在营养丰富的培养基中，通过定期更换培养基移除细胞代谢产物提供新的营养成分。

维静态细胞培养技术经过多年的发展已经十分成熟，是生物学最重要的实验方法之。

但是组织器官中的细胞是维结构的，而且由血液循环系统不断灌注。

而在平板培养中，组织的立体结构细胞与细胞之间的连射灭菌。

使用方法使用之前对生物反应器模块氧合模块及换液模块使用环氧乙烷灭菌。

在生物反应器中加入普通或含有携氧成分如氟碳化合物的培养基，将该系统按照图所示连接。

摘要目的研制种模块化维灌注培养系统，解决目前培养系统结构复杂难消毒易污染的问题。

方法该系统主要由生物反应器模块氧合模块动力模块以及换液模块构成，各模块壳体通过打印制作。

其中生物反应器模块主体为蓝口瓶，装载培养基及细胞支架复合物。

氧合模块装载膜肺空关于模块化三维灌注培养系统的研究生物工程论文发布的关于善待实验动物的指导性意见。

关于模块化三维灌注培养系统的研究生物工程论文。

氧合模块设计氧合模块壳体通过打印制作而成，内部安装有小动物膜肺西安西京医疗用品有限公司，大鼠型膜肺空气过滤器广州桑连电子材料有限公司，过滤器以及气泡过滤器湖南省绿洲惠康发展有限公司各组件之间通过硅胶软管连接。

氧合模块留有空气过滤器观察窗，可监测氧合模块液位变化，预防气泡进入培养系统。

动力模块设计动力模块由蠕动泵西京医疗用品有限公司，大鼠型膜肺空气过滤器广州桑连电子材料有限公司，过滤器以及气泡过滤器湖南省绿洲惠康发展有限公司各组件之间通过硅胶软管连接。

氧合模块留有空气过滤器观察窗，可监测氧合模块液位变化，预防气泡进入培养系统。

动力模块设计动力模块由蠕动泵兰格恒流泵有限公司，和空气泵桑连电子材料，组成，放臵在培养箱旁，安装在高铁架台上，通过直流电源供电。

蠕动泵灌注速度调节范围为在营养丰富的培养基中，通过定期更换培养基移除细胞代谢产物提供新的营养成分。

维静态细胞培养技术经过多年的发展已经十分成熟，是生物学最重要的实验方法之。

但是组织器官中的细胞是维结构的，而且由血液循环系统不断灌注。

而在平板培养中，组织的立体结构细胞与细胞之间的连接以及细胞与细胞外基质的连接彻底失去，许多细胞实验结果很难在动物体内重现，而即使费时费力在动物体内证实，由于种属差异，相关结果在人体内也时常出现偏差，。

换液模块摘要目的研制种模块化维灌注培养系统，解决目前培养系统结构复杂难消毒易污染的问题。

方法该系统主要由生物反应器模块氧合模块动力模块以及换液模块构成，各模块壳体通过打印制作。

其中生物反应器模块主体为蓝口瓶，装载培养基及细胞支架复合物。

氧合模块装载膜肺空气过滤器气泡过滤器等，为培养系统的核心组件。

动力模块由蠕动泵和空气泵组成，为培养基及气体提供动力。

换液模块中装有深紫外灯，可进行消毒和更换培养基。

结果通过该系液及废液模块。

可增加储液及废液装臵，并实现远程控制换液过程，尽可能减少换液环节引入污染的机会。

动力模块产热过多。

可通过蠕动泵改装水冷装臵，增加散热效率，将动力模块臵入培养箱中，进步减少污染的机会。

圆形生物反应器模块不利于观察。

下步可改为定制的方形玻璃瓶，以利于观察细胞支架复合物状态。

图模块化维灌注培养系统细胞培养实验结果参考文献王雷，周鹏成，朱沙俊，等大鼠肝细胞在肝脏脱细胞支架内的体外维循环灌注培养中华医学杂志培养基扩增细胞至个，消化离心后使用培养基重悬。

采用脾动脉间断注射的方法进行再细胞化脾脏脱细胞支架。

将再细胞化脾脏脱细胞支架连接于维灌注培养系统，整体臵于的恒温培养箱中。

使用小牛血清及青链霉素的培养基循环灌注，培养基灌注速度设臵为，空气泵速度设臵为，间隔更换培养基。

对培养的再细胞化支架进行扫描电子显微镜染色以及免疫荧光染色观察。

实验结果本系统细胞培养实验结果如，可以很方便地进行基于脱细胞支架的维灌注培养。

设计针对目前的维灌注培养系统的缺点，本系统采用集成化模块化设计，将系统分为生物反应器模块氧合模块动力模块和换液模块，如图所示。

各模块可以独立包装，并使用环氧乙烷灭菌，进行细胞培养时将各模块简单连接即可，减少了操作步骤及可能的污染环节。

关于模块化三维灌注培养系统的研究生物工程论文。

实验方法大鼠脾脏脱细胞支架制备方法参照本课题组前期研究，经脾动脉插管获取大鼠脾脏，脾脏水冷装臵，增加散热效率，将动力模块臵入培养箱中，进步减少污染的机会。

圆形生物反应器模块不利于观察。

下步可改为定制的方形玻璃瓶，以利于观察细胞支架复合物状态。

图模块化维灌注培养系统细胞培养实验结果参考文献王雷，周鹏成，朱沙俊，等大鼠肝细胞在肝脏脱细胞支架内的体外维循环灌注培养中华医学杂志，初殿伟，王玮，景士忠，等骨髓间充质干细胞的维培养医疗卫生装备，孙圣凯，陈旭义，汤锋武，等种新型神经干细胞脉冲加载生物反应器的关于模块化三维灌注培养系统的研究生物工程论文初殿伟，王玮，景士忠，等骨髓间充质干细胞的维培养医疗卫生装备，孙圣凯，陈旭义，汤锋武，等种新型神经干细胞脉冲加载生物反应器的研制医疗卫生装备，王春晨，陈锋，徐新喜，等细胞培养供气装臵及相关技术的研究进展医疗卫生装备，刘鹏，向俊西，郑幸龙，等基于脾脏脱细胞支架构建组织工程肝脏的体内植入策略南方医科大学学报，刘鹏，向俊西，杨丽斐，史爱华，刘爽，吕毅种模块化维灌注培养系统的研制医疗卫生装备，基金国家自然科学基种能够直接模拟体内真实环境的新技术，是种理想的细胞培养方式。

但是维灌注培养技术不成熟，既往培养系统结构复杂易污染，限制了维灌注培养的发展应用。

本研究设计的维灌注培养系统采用模块化设计，结构合理易消毒污染少制作成本低稳定性高易于扩展并且操作简单，值得推广应用。

但本设计也存在些不足之处需进行改进控制及监测模块未集成。

可对动力模块的控制系统进行集成及智能化，实现远程控制气体及培养基流量，并能远程监测系统运行状况。

缺少储黏附紧密，细胞在支架内按照脾脏支架内部管腔及血窦结构分布。

染色结果可见细胞呈现典型的肝细胞形态细胞核蓝紫色圆形或椭圆形大而明显，细胞质丰富，提示细胞活性良好。

免疫荧光染色可见阳性率为，提示支架中细胞增殖活跃。

且利用本系统进行的维灌注培养均未发生污染。

结语维灌注培养作为种能够直接模拟体内真实环境的新技术，是种理想的细胞培养方式。

但是维灌注培养技术不成熟，既往培养系统结构复杂易污染，限制了维灌注图所示。

大体观可见细胞在脾脏脱细胞支架内呈团块状生长，细胞团块体积逐渐增大。

培养周后的再细胞化脾脏支架结果显示细胞与支架黏附紧密，细胞在支架内按照脾脏支架内部管腔及血窦结构分布。

染色结果可见细胞呈现典型的肝细胞形态细胞核蓝紫色圆形或椭圆形大而明显，细胞质丰富，提示细胞活性良好。

免疫荧光染色可见阳性率为，提示支架中细胞增殖活跃。

且利用本系统进行的维灌注培养均未发生污染。

结语维灌注培养作体后继续去离子水灌注，随后浸入磷酸盐缓冲液，中冻存于冰箱备用。

反复冻融脾脏次后臵入烧杯中，连接蠕动泵，设臵灌注速度为，先后应用十烷基硫酸钠，溶液经由脾动脉持续灌注，直至脱去脾脏实质细胞，应用冲洗后使用过氧乙酸进行支架消毒，保存在含青链霉素的中。

细胞培养采用小牛血清及青链霉素的制医疗卫生装备，王春晨，陈锋，徐新喜，等细胞培养供气装臵及相关技术的研究进展医疗卫生装备，刘鹏，向俊西，郑幸龙，等基于脾脏脱细胞支架构建组织工程肝脏的体内植入策略南方医科大学学报，刘鹏，向俊西，杨丽斐，史爱华，刘爽，吕毅种模块化维灌注培养系统的研制医疗卫生装备，基金国家自然科学基金。

因此，本研究设计了种基于打印技术的模块化维灌注培养系统，具有结构合理易消毒污染少制作成本低稳定性高易于扩展且操作简单的优点养的发展应用。