杆菌转化法获得了转基因轮状病毒苜蓿植株,苜蓿中蛋白表达量占总可溶性蛋白的,强饲小鼠后,小鼠的腹泻症状明显减轻。
轮状病毒是引起婴儿及幼龄动物胃肠炎和腹泻的主要病因,从研究结果上看,蛋白可能具有更好的免疫效果且具有更广泛的应用前景。
其他人类致病病毒人类免疫缺陷病毒,是于年首次在美国发现的造成人类免疫系统缺陷的种病毒。
它是种感染人类免疫系统细胞的慢病毒,属逆转录病毒。
年等报道了将人鼠的腹泻症状明显减轻。
轮状病毒是引起婴儿及幼龄动物胃肠炎和腹泻的主要病因,从研究结果上看,蛋白可能具有更好的免疫效果且具有更广泛的应用前景。
其他人类致病病毒人类免疫缺陷病毒,是于年首次在美国发现的造成人类免疫系统缺陷的种病毒。
它是种感染人类免疫系统细胞的慢病毒,属逆转录病毒。
年等报道了将人类免疫缺陷病毒蛋白导入烟草。
随后等运用基因枪法获得转蛋白基因菠菜,对小鼠进行时隔周的次口服免疫,发现小鼠体内抗体滴度升高,并在接种周后达到峰值。
截至目前,的及在番茄中得到表达,等于年在转基因莴苣中获得较高的重组蛋白,表达量高达。
美国最先批准等将转入的马铃薯进行了临床试验名志愿者中,名食用转基因马铃薯,名食用非转基因马铃薯,其中名志愿者中有名检测到血液中含有抗体。
随后,等也进行了含乙肝病毒表面抗原莴苣的临床试验,结果显示,名志愿者在个月内进行,李霞,刘荣堂,杨慧,赵丽,李鹏轮状病毒基因在胡萝卜中表达的免疫原性分析草业科学,余云舟,金宁,王罡,季静,王萍,李昌基因和基因转化番茄及转基因植株再生中国生物工程杂志,颜斌,武丹阳,李慧玉白桦基因的遗传转化及抗逆性分析植物研究,王敏,李疆,代培红,罗淑萍,李鹏,陈婷婷,郭淑朋扁桃基因的克隆及植物表达载体构建分子植物育种,付亚娟,侯荟玲,乔洁,耿晓进,王聪艳,侯晓强大花杓兰钙依赖蛋白激酶基因克隆及植物表达载体构建植物遗传资源学报,王静,彭双,胡圣,卓维,陈倩,李立芹烟草质膜基因的克隆表达载体构建及表达分析浙江农业学报,卢昊,杨奕琦,秦玉芝,熊兴耀,周倩马铃薯晚疫病菌应答基因的结构功能预测与植物表达载体构建分子植物育种,白蓓蓓,荆永琳,蔡秉宇,蓝丽,王佳,赵志常芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建热带作物学报,刘晓柱,李银凤荠菜生长素极性运输基因的克隆与表达分析华北农综述转基因植物疫苗的创制及研究生物工程论文洋,孙杰,薛柯,戴佳锟,关正君,尉亚辉转基因樱桃番茄组培苗叶片总蛋白双向电泳体系的建立核农学报,姜云水,方平楚,付亚萍,朱诚幽门螺杆菌蛋白与融合基因的克隆及其植物表达载体的构建科技通报,王凌建,倪迪安,陈永宁,李忠明利用转基因胡萝卜表达肺结核疫苗植物学报,赵秀英,张晓东,张霆,黄德庄,阎惠平,罗朝霞,杨凤平乙肝病毒表面抗原基因在胡萝卜中的克隆及表达微生物学免疫学进展,陈红岩,张军,高毅,杜海莲,马英,郑文竹,夏宁邵乙肝病毒表面抗原基因在花生中的遗传转化及免疫原性检测生物技术通讯,高正伦,盛军,刘丹,刘晓宇,李娟,郝淑美,吉海滨,刘建华乙型肝炎病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达中国生物制品学杂志付薇,陈磊,熊毅,潘琼,王常伟,陈进喜,胡晓静,刘棋型口蹄疫病毒结构蛋白基因的克隆与原核表达安徽农业科学,金奇,曾力宇,组轮状病毒型毒株基因及基因高变区的分析中华实验和临床病毒学杂因植物的抗生筛选可能对应用机体产生不可预测的危害,另方面若进行大规模的种植也可能会对周围环境中其他生物造成定影响。
免疫效果差转基因植物作为种口服疫苗使用时,其外源蛋白会经消化系统被不同程度地降解,从而降低抗原性。
耐受性机体的免疫耐受性是免疫剂量免疫程序抗原特异性等多因素综合作用的结果,当机体对该疫苗产生免疫耐受性,会导致免疫效果变差。
针对上述问题,目前对于转基因植物疫苗的优化可采取以下措施不同的启动子在不同的转基因植物中表达效率差异大,且不同植物对目标抗原的表达量也不同,因此,采取优化启动子或优选受体植物的方法提高目标蛋白的表达量。
此外,将抗原整合至叶绿体基因组或核基因组也有利于提高表达效率。
利用叶绿体的母系遗传使外源蛋白靶向于叶绿体也可以解决基因渗入的不良影响。
此外,也可在种子特异性或花粉特异性启动子的控制下,使用可逆抑制基因以产生不育植物或利用基因工程技术对转基因植物的抗性基因进行敲除。
尝试使用沙门氏菌和弧状霍乱杆菌作为载体菌株或利用包衣对口服疫苗进行要保护性抗原基因日本血吸虫铁蛋白基因转入到番茄紫花苜蓿和油菜植株中,并成功获得了表达抗原的转化植株。
避孕疫苗哺乳动物卵透明带是由卵母细胞及颗粒细胞分泌并覆盖于卵母细胞及着床前受精卵外的层基质,蛋白在精卵结合及精子穿透卵透明带中起着非常重要的作用,影响受精过程的成败。
等将小鼠蛋白的抗原决定簇插入的衣壳蛋白中,转染植物并获得高水平的融合蛋白,用这些提取病毒样颗粒作为抗原进行肠胃外免疫,使得小鼠血清抗体识别了体内的表位,且发现透明带聚集有抗抗体,从而达到了避孕的效果。
截至目前,转基因避孕疫苗的报道相对较少,若转基因避孕疫苗开发成功,则将极大地便利相关人群。
糖尿病疫苗人类型糖尿病是种器官特异性自身免疫疾病,目前主要通过注射胰岛素来控制高血糖。
陈丽将胰岛素原和胰岛素链,导入马铃薯,获得转基因植株而侯宇清利用基因枪法,将多型糖尿病发生的种自身抗原肽与融合基因转入小麦,获得转基因糖尿病疫人乳头瘤病毒是种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒,是球形病毒,可引起人类良性的肿瘤和疣。
现已成功将转入马铃薯烟草和番茄,。
此类疫苗还有诺沃克病毒疫苗结肠直肠癌疫苗非霍奇金淋巴瘤,疫苗麻疹病毒疫苗扎伊尔埃博拉病毒疫苗,登革热病毒,疫苗人巨细胞病毒疫苗花粉过敏疫苗狂犬病病毒,等。
这些致病病毒主要集中于瞬时表达,未来在上述病毒的稳定遗传表达方面的发展,将推动各病毒类疾病在临床上的预防和治疗。
其他动物致病病毒动物致病病毒通常会对牲畜家禽类动物的饲养过程带来巨大损失,为有效防止病害带来的灾难性后果,现已成功获得批转基因植物疫苗。
等将猪流行性腹泻病毒抗原通过叶绿体转化法导入烟草,植株可溶性蛋白单独表达量约为总量的,融合蛋白表达水平达到等获得了表达猪生殖和呼吸综合征病毒和蛋白的拟南测流免疫测定磁免疫电化学传感器维凝胶电泳质谱法蛋白芯片等。
除此之外,还应进行系列生物试验,包括环境抗性试验生物饲喂试验生物注射试验及临床试验等。
基因植物疫苗的研究现状转基因植物疫苗的研究按受体植物可分为烟草拟南芥番茄苜蓿苹果马铃薯等,按功能大致可分为类,分别为细菌疫苗病毒疫苗避孕疫苗糖尿病疫苗和寄生虫疫苗。
目前,数十种转基因植物疫苗已进入动物试验,并检测出良好的免疫原性。
些转化编码基因的植物疫苗,如诺沃克病毒等,也已进入临床试验,用于预防和治疗乙型肝炎及细菌性腹泻,并在人体中产生免疫应答,显示出良好的免疫效果。
载体的表达与转化稳定性表达系统稳定表达系统是将外源抗原基因序列连接至载体上,并通过系列方法将免疫原基因导入植物细胞中,使其在植物基因组中稳定地整合,在定条件下将含有外源基因的植物细胞诱导长成新的植株,并在生长过程中表达目标抗原基因,将此性状传给子代,成为表达疫苗的品系。
目前广泛运用的基因整合方式有两种是整合到核基因组是整合到叶肝炎病毒表面抗原基因在人参细胞中的高效表达中国生物制品学杂志付薇,陈磊,熊毅,潘琼,王常伟,陈进喜,胡晓静,刘棋型口蹄疫病毒结构蛋白基因的克隆与原核表达安徽农业科学,金奇,曾力宇,组轮状病毒型毒株基因及基因高变区的分析中华实验和临床病毒学杂志,李司,钟云平,张海花,应慧慧,于威,张耀洲组轮状病毒结构蛋白在家蚕杆状病毒表达系统中的表达蚕业科学,李霞,陈杭,李晓东,钟辉,曹诚,马清钧疟疾多抗原表位基因表达载体的构建及其在烟草中的表达生物工程进展,周晓红,陈晓光,卢丽琴,李林,吴优,咸鹏,言慧,吴琨弓形虫基因截短片段植物表达载体的构建中国人兽共患病杂志,袁鑫日本血吸虫铁蛋白基因的克隆及其在油菜中的表达和活性检测长沙湖南农业大学,陈丽和融合基因构建及其在大肠杆菌和植物中的表达银川宁夏大学,侯宇清转和基因小麦的研究武汉华中农业大学,包慧芳,陈创夫,陈福核基因组也有利于提高表达效率。
利用叶绿体的母系遗传使外源蛋白靶向于叶绿体也可以解决基因渗入的不良影响。
此外,也可在种子特异性或花粉特异性启动子的控制下,使用可逆抑制基因以产生不育植物或利用基因工程技术对转基因植物的抗性基因进行敲除。
尝试使用沙门氏菌和弧状霍乱杆菌作为载体菌株或利用包衣对口服疫苗进行保护性包被从而提高其在消化道内的稳定性,提高免疫效果。
可减少服用或使用次数,加大单次摄入量等方式以避免耐受性问题。
综上所述,因植物疫苗能提供相对廉价的蛋白质源,故利用转基因植物开发新型疫苗是种较经济有效的途径,且具有广阔的发展前景。
相信随着植物学免疫学分子生物学等各个学科领域的迅速发展,对转基因植物的编码基因表达产物植株的免疫原性和临床评价的深入研究,转基因植物疫苗能够不断优化,得到广泛应用并造福人类。
附表目标抗原与受体植物表达系统对照表附表近年常用植物表达载体与受体植物览表参考文献李杨,李志勇,柳纪省转基因植物疫苗研究进展生物技术通报,董伟,易自力,蒋建雄,钟军转基大地便利相关人群。
糖尿病疫苗人类型糖尿病是种器官特异性自身免疫疾病,目前主要通过注射胰岛素来控制高血糖。
陈丽将胰岛素原和胰岛素链,导入马铃薯,获得转基因植株而侯宇清利用基因枪法,将多型糖尿病发生的种自身抗原肽与融合基因转入小麦,获得转基因糖尿病疫苗。
等通过叶绿体转化法将与人胰




























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