板进行倍梯度稀释，使浓度依次为，然后以不同稀释浓度的样品为模板进行荧光定量扩增反应。

反应体系及条件同。

摘要肉类食品真伪鉴定是目前食品安全检测领域的重点研究内容之。

为准确定量检测食品中的鸡源性成分，根据现行检验检疫标准合成引物及探针，并拓展了特异性灵敏度检出限和定量分析等试验。

结果显示特异性试验中，仅鸡成分检测出现特异性扩增，其他动物组织均未出现特异性扩增梯度稀释鸡源荡仪上涡旋，混匀后离心取上清液于新的离心管中并加入等体积的异丙醇，充分混匀，离心，弃去上清将管内的沉淀用乙醇充分洗涤次，晾干，加入适量的灭菌双蒸水，然后利用核酸蛋白分析仪，测量其浓度及质量，并将样品母液稀释至左右，且使在之间，保存留用。

反应体系与反应条件实时荧光平台反应总体系，组分包括实时荧光法定量基础上检测食品中鸡源性成分食品工业论文探针方法扩增，验证鸡源性成分引物和探针的特异性。

由表可知，样品浓度及质量均能满足试验要求。

图显示，个鸡肉样品，每个样品个平行试验中，仅鸡源性样品有明显扩增曲线，且样品的值分别为，而以其他种样品为模板的反应体系均未检测到荧光信号，说明本方法中的引物和探针特异性较好。

实时荧光法定量基础上检测食品中鸡源性成分食品工业论文。

表引物和，混合液，臵于涡旋振荡仪上涡旋，混匀后离心取上清液于新的离心管中并加入等体积的异丙醇，充分混匀，离心，弃去上清将管内的沉淀用乙醇充分洗涤次，晾干，加入适量的灭菌双蒸水，然后利用核酸蛋白分析仪，测量其浓度及质量，并将样品母液稀释至左右，且使在之间，保存留用。

反应体系与反应条件实时荧光平台反应总体系，组分包括使些不法商贩企业的违法掺假造假行为时有发生。

特异性试验提取中的种鲜肉组织样品，利用荧光定量进行特异性检测。

根据典型扩增曲线和各反应体系循环阈值验证鸡源性引物和探针对于不同动物模板的特异性。

检出限检测试验用灭菌双蒸水，对的鸡鲜肉组织原液模板进行倍梯度稀释，使浓度依次为，然后以不同稀释浓度的样品为模板进行荧光定量扩增反应。

反摘要肉类食品真伪鉴定是目前食品安全检测领域的重点研究内容之。

为准确定量检测食品中的鸡源性成分，根据现行检验检疫标准合成引物及探针，并拓展了特异性灵敏度检出限和定量分析等试验。

结果显示特异性试验中，仅鸡成分检测出现特异性扩增，其他动物组织均未出现特异性扩增梯度稀释鸡源性模板原液进行灵敏度评价，发现引物和探针灵敏度较高，可以检测到级的鸡组分模板，且建立的标准曲线具有良好的线性关系，达以上，定量，扩增效率达到，充分说明本试验方法可进行定量分析。

本试验的灵敏度可达到，证明此引物与探针组合具有较高的灵敏度。

加工制品的检测结果表明，只有标有鸡源性的样品具有明显的扩增曲线，说明本试验使用的引物及探针适用性很强，可用于市售加工制品的成分检测。

结论研究表明，本试验的引物和探针组合特异性强灵敏度高适用性广，可为食品中鸡源性成分的检测提供技术保障，从而为社会打击掺假造假行为提供了有效的检测手段。

参考文献钟贤武，林虹，谈宇呼纳斯牛肉干。

实时荧光法定量基础上检测食品中鸡源性成分食品工业论文。

当混合样中鸡源成分含量为时，也出现典型的扩增曲线，值为，证明了鸡源成分引物和探针灵敏度较高。

图灵敏度检测结果表鸡源成分引物和探针的灵敏度检测结果加工制品中鸡源性成分检测从的加工制品中提取样品，进行检测。

结果表图显示，只有鸡源性制品个平行试验出现特异性扩增曲线，值分别为鸡蛋。

而在强烈的加热处理后仍能保持稳定性，因此现今多数肉制品成分检测技术都基于检测，其中以技术最常见，。

荧光定量技术因特异性好，检测自动化程度高，已成为现今种属鉴定的主流技术之。

本试验采用探针法，参照现行检验检疫行业标准合成引物及探针，建立鲜肉及加工制品中鸡源性成分的实时荧光检测方法，并针对标准进行了试验体系优化和提取方法改进，大大提高了检测效率并且节省研究表明，本试验的引物和探针组合特异性强灵敏度高适用性广，可为食品中鸡源性成分的检测提供技术保障，从而为社会打击掺假造假行为提供了有效的检测手段。

参考文献钟贤武，林虹，谈宇菲，等欧洲马肉事件案例分析华南预防医学，冯静，刘琳，黄孟军，等基于飞行时间质谱的快速肉类溯源检测方法第届国际食品安全高峰论坛论文集北京北京食品学会，北京食品协会，汪永信，安虹，程坚，等双重实时荧光法检测食品和饲料中的鸡源性成分生物技术实时荧光法定量基础上检测食品中鸡源性成分食品工业论文菲，等欧洲马肉事件案例分析华南预防医学，冯静，刘琳，黄孟军，等基于飞行时间质谱的快速肉类溯源检测方法第届国际食品安全高峰论坛论文集北京北京食品学会，北京食品协会，汪永信，安虹，程坚，等双重实时荧光法检测食品和饲料中的鸡源性成分生物技术通报，罗建兴，刘国强，海小，郭梁基于实时荧光法定量检测食品中鸡源性成分中国动物检疫，基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目锡林郭勒职业学院科研课题，该方法对的检测限能达到，与传统方法相比，具有更高的灵敏度。

本试验根据行业标准合成引物和探针，进行模板定量分析，通过绘制标准曲线，能够快速分析出样品中是否含有鸡源性并可进行定量，而且证明了此探针和引物组合具有较强的特异性。

汪永信等利用双重实时荧光检测食品及饲料的鸡源性成分，检测限达到，而本研究的检出限达到。

定量检测制作的标准曲线显示说明标准曲线纵横坐标间的线性关系较好比，试验步骤简单，试验时间少，只需次反应就可以完成对目标片段的定性和定量检测。

等利用多重实时荧光方法鉴定和量化我国血豆腐产品中猪鸡鸭的含量，发现该方法对的检测限能达到，与传统方法相比，具有更高的灵敏度。

本试验根据行业标准合成引物和探针，进行模板定量分析，通过绘制标准曲线，能够快速分析出样品中是否含有鸡源性并可进行定量，而且证明了此探针和引物组合具有较强的特异性。

汪永双汇火腿肠金锣火腿肠，其余制品均未检出，说明此引物和探针具有较高的适用性，可用于市售加工制品中的成分检测。

表鸡源成分引物和探针的适用性检测结果图引物和探针在加工制品中的适用性检测结果讨论技术与普通技术相比，试验步骤简单，试验时间少，只需次反应就可以完成对目标片段的定性和定量检测。

等利用多重实时荧光方法鉴定和量化我国血豆腐产品中猪鸡鸭的含量，发现了耗材成本。

本研究旨在快速准确检测食品市场中的鸡源性成分，以期为肉制品质量控制提供快速有效的手段。

材料与方法材料与仪器原料采集及准备试验所需鲜肉及加工制品材料，采购于锡林浩特市本地市场及大型超市。

样品采集后，除去明显脂肪，并用灭菌水清洗，冰箱保存。

鲜肉样品包括鸡肉牛肉羊肉猪肉马肉驴肉鹿肉兔子肉狗肉鸭肉鸽子肉火鸡肉和鱼肉加工制品包括鸡蛋双汇火腿肠金锣火腿肠金锣烤肠肉粒多猪肉肠尚清斋烤肠鸭烤翅鸭腿鸭蛋鹌鹑蛋蒙羊肉干通报，罗建兴，刘国强，海小，郭梁基于实时荧光法定量检测食品中鸡源性成分中国动物检疫，基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目锡林郭勒职业学院科研课题，。

目前，对于肉类掺假的检测主要是基于蛋白质以及脂肪，进行。

而蛋白质分析法又包括电泳法，色谱法质谱法酶联免疫分析法和蛋白质组学法等。

这些蛋白质分析方法虽然能够对肉制品成分进行定性定量分析，但是并不适用于经过高温加工导致蛋白质变性的产品信等利用双重实时荧光检测食品及饲料的鸡源性成分，检测限达到，而本研究的检出限达到。

定量检测制作的标准曲线显示说明标准曲线纵横坐标间的线性关系较好，扩增效率达到，充分说明本试验方法可进行定量分析。

本试验的灵敏度可达到，证明此引物与探针组合具有较高的灵敏度。

加工制品的检测结果表明，只有标有鸡源性的样品具有明显的扩增曲线，说明本试验使用的引物及探针适用性很强，可用于市售加工制品的成分检测。

结论实时荧光法定量基础上检测食品中鸡源性成分食品工业论文工制品中鸡源性成分检测从的加工制品中提取样品，进行检测。

结果表图显示，只有鸡源性制品个平行试验出现特异性扩增曲线，值分别为鸡蛋双汇火腿肠金锣火腿肠，其余制品均未检出，说明此引物和探针具有较高的适用性，可用于市售加工制品中的成分检测。

表鸡源成分引物和探针的适用性检测结果图引物和探针在加工制品中的适用性检测结果讨论技术与普通技术相性模板原液进行灵敏度评价，发现引物和探针灵敏度较高，可以检测到级的鸡组分模板，且建立的标准曲线具有良好的线性关系，达以上，定量准确加工制品中的验证试验结果显示，合成的引物及探针具有良好的适用性和定量检测能力。

以上研究结果均说明，此引物和探针适用于市场食品中鸡源性成分的定性定量检测。

本研究为今后实时荧光法不同动物源性引物和探针的自主研发奠定了基础。

关键词实时荧光，左右引物各，探针，模板，补充灭菌双蒸水至。

反应条件预变性变性，退火，个循环。

在每次循环退火时收集荧光信号。

特异性试验提取中的种鲜肉组织样品，利用荧光定量进行特异性检测。

根据典型扩增曲线和各反应体系循环阈值验证鸡源性引物和探针对于不同动物模板的特异性。

检出限检测试验用灭菌双蒸水，对的鸡鲜肉组探针序列提取用剪刀对中的试验材料进行取样处理，利用溴化十烷甲基铵，法提取，。

方法具体如下取预先处理好的样品约放入离心管中，加入裂解液，进行旋涡混匀，于金属浴裂解，中途取出混匀数次将金属浴后的管内全部体系臵于离心机，离心后，转移上清液至新的洁净离心管中向上清液中加入等体积氯甲烷异戊醇，混合液，臵于涡旋振，左右引物各，探针，模板，补充灭菌双蒸水至。

反应条件预变性变性，退火，个循环。

在每次循环退火时收集荧光信号。

数据处理利用实时荧光扩增仪自带分析软件，对结