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江古越龙山绍兴酒股份有限公司甲醇乙腈磷酸均为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为超纯水。
仙茅药材批号购自安低等综合优势,但由于炮制工艺变化较大,是否能替代传统的炮制方法,后续尚需化学成分分析药理实验临床研究等进步验证。
酒仙茅的微波炮制工艺建立及与传统炮制法的比较中药学论文。
闷润时间取项下生仙茅饮片,共份,每份,加入黄酒,闷润不同时间后,单层铺于微波炉托盘上,设定微波功率微波时间,考察不同闷润时间对综合评分的影响。
结果,闷润或时的综合评分均较高且相差不大,故选择闷润时间进行正交实验设计,详见表。
微波时间取项下生仙茅饮片,共份,每份,加入黄酒,闷润后,单层铺于微波炉托酒仙茅的微波炮制工艺建立及与传统炮制法的比较中药学论文炮制工艺为加酒量微波功率闷润时间微波时间。
经验证,仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷及醇溶性浸出物的平均含量分别,分别为平均综合评分为分,为,提示所得最优微波炮制工艺稳定可行。
仙茅经酒炙后,所得传统酒炙品和微波炮制品中仙茅苷的含量均有所增高,可能是在炮制过程中,其他部分化学成分转化为仙茅苷,使得炮制品中仙茅苷含量升高同时,与传统酒炙法进行比较,微波炮制法所得酒仙茅中种酚苷类成分及醇溶性浸出物的含量均略高于传统酒炙法,而经微波炮制和传统酒炙后的仙茅中苔黑酚葡萄胆糖苷等种酚苷类成分时会出现色谱峰分离度较差基线不平稳等现象。
为此,本研究考察了不同色谱柱流动相甲醇磷酸溶液乙腈磷酸溶液在波长下的分离效果。
结果,仙茅苷在波长处响应较强,苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷在波长处响应较强采用项下色谱条件进行检测时,所得各色谱峰的峰形和分离度均较好。
中药成分较为复杂,且各个成分协同作用发挥药效,仅以单成分作为质量控制的指标,不能体现整体的质量,故需对多个指标进行综合评价,以反映中药整体综合评分有显著影响,因素无显著影响。
为节约能源,最终确定最优工艺为,即加酒量微波功率闷润时间微波时间。
验证取批项下生仙茅饮片,每批,按上述最优微波炮制工艺制备批酒仙茅样品,再按项下方法分别测定含量。
结果,仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷和醇溶性浸出物的平均含量分别为,平均综合评分为分为,表明所得最优微波炮制工艺稳定可行,详见表。
生仙茅饮片与两种炮制品的含量比较取项下生仙茅饮片,分别按项下方法分别制备传统酒炙品和微波炮制品,再按项下方法分别测定生仙茅饮及供试品溶液的制备取项下微波炮制酒仙茅样品粉末过号筛,下同,精密称定,加入甲醇,称定质量,加热回流,取出,放冷,再次称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过。
精密量取上述滤液,蒸干,残渣加甲醇复溶并转移至量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,经微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
同法制得生仙茅饮片传统酒炙酒仙茅的供试品溶液。
阴性对照溶液的制备以甲醇为阴性对照溶液,经微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
系统适用性试验取上述各单对照品溶液供试品溶液微波炮制酒仙茅和阴性对照溶液适量,按项下色谱条件酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷的平均含量分别为,分别为,表明该方法重复性良好。
加样回收率试验精密称取项下已知含量的微波炮制酒仙茅样品粉末,共份,分别加入项下各单对照品溶液适量,按项下方法制备供试品溶液,再按项下色谱条件进样测定,记录峰面积并计算加样回收率,结果见表。
酒仙茅的微波炮制工艺建立及与传统炮制法的比较中药学论文。
醇溶性浸出物的测定以乙醇为溶剂,按年版中国药典部通则浸出物测定法项下醇溶性浸出物测定法热浸法测定。
仙茅苷等种成分的含量测定色谱条件仙茅苷以足减失的质量,摇匀,滤过。
精密量取上述滤液,蒸干,残渣加甲醇复溶并转移至量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,经微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
同法制得生仙茅饮片传统酒炙酒仙茅的供试品溶液。
阴性对照溶液的制备以甲醇为阴性对照溶液,经微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
系统适用性试验取上述各单对照品溶液供试品溶液微波炮制酒仙茅和阴性对照溶液适量,按项下色谱条件进样测定,记录色谱图,详见图。
由图可知,各色谱峰均基线分离,分离度均大于,阴性对照对测定无干扰。
醇溶性浸出物的测定以乙醇为溶剂,按年版中国化为仙茅苷,使得炮制品中仙茅苷含量升高同时,与传统酒炙法进行比较,微波炮制法所得酒仙茅中种酚苷类成分及醇溶性浸出物的含量均略高于传统酒炙法,而经微波炮制和传统酒炙后的仙茅中苔黑酚葡萄糖苷成分含量均低于生仙茅饮片,但经微波炮制后苔黑酚葡萄糖苷含量的降低程度不如传统酒炙明显,推测仙茅在酒炙的过程中,苔黑酚葡萄糖苷的糖苷键可能发生断裂,进而转化成相应苷元而在微波炮制过程中,由于微波穿透力强,在加热过程中吸收能量,分子间互相摩擦而生热,具有定的膨化破壁作用,致使溶剂更易进入细胞内部溶解并释放进行检测时,所得各色谱峰的峰形和分离度均较好。
中药成分较为复杂,且各个成分协同作用发挥药效,仅以单成分作为质量控制的指标,不能体现整体的质量,故需对多个指标进行综合评价,以反映中药整体的质量。
酚苷类成分是仙茅补肾壮阳的物质基础,故本研究选择仙茅酚苷中含量较高的成分苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷和年版中国药典部中的指标成分仙茅苷作为评价指标,。
在实际操作中,传统酒炙法的火候炮制时间难以控制,太过易炒焦,不及则无法达到预期的炮制效果。
因此,寻找种节能高效且操作工艺可控的新型炮制方法是保证炮制品酒仙茅的微波炮制工艺建立及与传统炮制法的比较中药学论文,为色谱柱,以乙腈磷酸溶液∶,为流动相检测波长为流速为柱温为进样量为。
苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷以,为色谱柱,以乙腈磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱检测波长为流速为柱温为进样量为。
对照品溶液的制备精密称取仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷对照品适量,分别臵于量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,混匀,制得仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷质量浓度分别酚龙胆糖苷对照品适量,分别臵于量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,混匀,制得仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷质量浓度分别为。
稳定性试验取项下供试品溶液微波炮制酒仙茅适量,分别于室温下放臵时按项下色谱条件进样测定,记录峰面积。
结果,仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷峰面积的分别为,表明供试品溶液于室温下放臵内基本稳定。
重复性试验取项下微波炮制酒仙茅样品粉末,共份,按项下方法制备供试品溶液,再按项下色谱条件进样测定,记录峰面积并按标准曲线法计算各待测成分的含量。
结果,仙茅苷苔黑为分为,表明所得最优微波炮制工艺稳定可行,详见表。
生仙茅饮片与两种炮制品的含量比较取项下生仙茅饮片,分别按项下方法分别制备传统酒炙品和微波炮制品,再按项下方法分别测定生仙茅饮及两种炮制品中仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷和醇溶性浸出物的含量,每样品平行操作次。
采用软件对数据进行单因素方差分析,检验水准。
结果显示,除传统酒炙品中醇溶性浸出物含量外,传统酒炙品和微波炮制品中仙茅苷苔黑酚龙胆糖苷含量及微波炮制品中醇溶性浸出物含量均显著高于生仙茅饮片,且微波炮制品中仙茅苷苔黑酚龙胆糖药典部通则浸出物测定法项下醇溶性浸出物测定法热浸法测定。
仙茅苷等种成分的含量测定色谱条件仙茅苷以,为色谱柱,以乙腈磷酸溶液∶,为流动相检测波长为流速为柱温为进样量为。
苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷以,为色谱柱,以乙腈磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱检测波长为流速为柱温为进样量为。
对照品溶液的制备精密称取仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔分,有利于有效成分的溶出。
综上所述,本研究所得最优微波炮制工艺稳定可行,可用于酒仙茅的炮制。
虽然微波炮制法具有独特的热力学形态与能量传递转化规律,操作简单且炮制效率高产品性状好生产能耗低等综合优势,但由于炮制工艺变化较大,是否能替代传统的炮制方法,后续尚需化学成分分析药理实验临床研究等进步验证。
酒仙茅的微波炮制工艺建立及与传统炮制法的比较中药学论文。
供试品溶液的制备取项下微波炮制酒仙茅样品粉末过号筛,下同,精密称定,加入甲醇,称定质量,加热回流,取出,放冷,再次称定质量,用甲醇量的关键。
本研究采用微波炮制法,以加酒量微波功率闷润时间微波时间为考察因素,仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷和醇溶性浸出物含量为考察指标,结合综合加权评分对工艺进行优化,得到最优微波炮制工艺为加酒量微波功率闷润时间微波时间。
经验证,仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷及醇溶性浸出物的平均含量分别,分别为平均综合评分为分,为,提示所得最优微波炮制工艺稳定可行。
仙茅经酒炙后,所得传统酒炙品和微波炮制品中仙茅苷的含量均有所增高,可能是在炮制过程中,其他部分化学成分转含量均显著高于传统酒炙品两种炮制品中苔黑酚葡萄糖苷含量均显著低于生仙茅饮片,但微波炮制品显著高于传统酒炙品,详见表。
讨论本课题组前期实验发现,在同时测定仙茅苷苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆糖苷等种酚苷类成分时会出现色谱峰分离度较差基线不平稳等现象。
为此,本研究考察了不同色谱柱流动相甲醇磷酸溶液乙腈磷酸溶液在波长下的分离效果。
结果,仙茅苷在波长处响应较强,苔黑酚葡萄糖苷苔黑酚龙胆
