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定及其对宿主根腐病的防效研究中药炮制论文。


分子鉴定测序得到内生细菌的扩增序列长度为,在数据库上进行比对,发现与贝莱斯芽孢杆菌死谷芽孢杆菌业学报,朱磊,刘凡,黄云,等白术镰刀根腐病菌生物学特性研究安徽农学通报,巴晓林,左卫军白术栽培管理及常见病害综合防治技术乡村科技,林星辰,田义新,王泽,等内生细菌定殖能力及其对人参根腐病防效研究江苏农业科学,荆卓琼,郭致杰,徐生军,等解淀粉芽孢杆菌的筛选鉴定及其防治番茄灰霉病效果的评价草业学报,叶晓婉,朱润琪,倪新程,等明党参内生菌的分离鉴定及其对金黄色葡萄球菌的抑制作用微生物学杂志,詹艺舒,李婕,褚秀丹,等株真菌拮抗细菌的筛选与鉴定及其发酵条件优化微生物学通报,张健,姜素平,蒋白术内生细菌的分离鉴定及其对宿主根腐病的防效研究中药炮制论文许多学者从药用植物中分离得到了能提高宿主抗病性的内生细菌,其中以芽孢杆菌最为常见。


芽孢杆菌是种好氧型,能够产芽孢的革兰阳性菌,呈杆状,其在自然界中分布广泛,易分离培养。


芽孢杆菌可以通过诱导植物系统抗性与病原菌进行生态位竞争或分泌抗菌的代谢产物直接抑制病原菌生长等方法提高植物抗病性。


苏博发现杜仲内生细菌枯草芽孢杆菌能上调诱导性系统抗性的水杨酸信号传导途径的关键基因类枯草菌素蛋白酶,茉莉酸信号传导途径关键基因茶树脂肪氧合酶的表达,从而增强玉米对小斑病的抗性。


本实验分离得到的内生细菌和解淀粉芽孢杆菌的同源性均达到。


用软件构建系统发育树和分析显示图,与株芽孢杆菌属参考菌株聚为支且与和亲缘关系最近。


综合以上信息将菌株鉴定为芽孢杆菌属细菌。


表内生细菌的理化特征图基于序列构建的白术内生细菌的菌株系统发育树讨论本实验首先对不同产地白术的内生细菌进行分离纯化,得到内生细菌株,其中抗根腐内生细菌株,进步通过抑菌率定量测定与盆栽防效试验,筛选得到株对白术根腐病具有较好防治效果的内生细菌,茄病镰刀菌和半裸镰刀菌为指示菌,采用平板划线法和滤纸片法筛选拮抗细菌制备拮抗菌菌悬液,采用灌根法进行盆栽白术根腐病防效试验通过细菌形态特征生理生化检测及技术对拮抗细菌进行菌种鉴定。


结果从白术组织中共分离得到株内生细菌,平板对峙筛选得到抗根腐内生细菌株,其中对种病原菌生长均具有显著抑制作用,平均抑菌率达盆栽试验进步表明对白术根腐病具有较好的防治效果,防治效果达经鉴定为芽孢杆菌属细菌。


结论内生细菌具有良好的白术根腐病生防潜力。


关键词内生细菌半裸镰刀菌尖孢镰刀菌根腐病白术茄病镰刀菌挑选的白术幼苗,采用灌根法对白术幼苗进行处理,设臵组,分别为对照组无菌水白术根腐病模型组病原菌混合液无菌水和拮抗细菌处理组病原菌混合液拮抗菌液。


设臵每区组株,每个处理个区组。


在接种第天观察白术幼苗的发病情况,计算病情指数和防治效果。


白术根腐病病情分级标准级,无病级,仅有少许根系受伤,枯死面积小于级,根系受伤明显,枯死面积为级,根系受伤明显,枯死面积为级,地上部开始萎蔫,根系严重受伤,枯死面积为级,地上部严重萎蔫,根系严重受伤,枯死面积以上或整株死亡。


内生细菌的鉴定形态特征与理化特征观察内生好,抑菌率分别为和,抑菌带分别为效果次之,抑菌率分别为和,抑菌带分别为图和表。


白术内生细菌的分离鉴定及其对宿主根腐病的防效研究中药炮制论文。


抗根腐内生细菌筛选用打孔器在病原菌菌落边缘打取直径为的菌饼,接种在马铃薯葡萄糖琼培养基中央,用接种针挑取细菌在距离中心点处划线,以只接种病原菌的平板为对照组,臵于的霉菌培养箱中暗环境培养,将有抑菌作用的细菌标记为,无抑菌作用的标记为,试验平行次。


挑取对种病原菌均有抑菌作用的内生细菌到液体培养基中扩大培养,调整菌液浓度至。


将病原菌菌饼放臵于培根腐内生细菌筛选用打孔器在病原菌菌落边缘打取直径为的菌饼,接种在马铃薯葡萄糖琼培养基中央,用接种针挑取细菌在距离中心点处划线,以只接种病原菌的平板为对照组,臵于的霉菌培养箱中暗环境培养,将有抑菌作用的细菌标记为,无抑菌作用的标记为,试验平行次。


挑取对种病原菌均有抑菌作用的内生细菌到液体培养基中扩大培养,调整菌液浓度至。


将病原菌菌饼放臵于培养基中心,将直径为的张圆形无菌滤纸放臵于距中心处。


滴加菌液浓度为拮抗细菌于滤纸中。


以只接种病原菌的平板为对照组,臵于的霉菌培养箱中暗环境培胎等功效。


白术为常用补益类中药,俗有北参南术十方术之说,黄帝内经将其列为上品。


白术在我国安徽浙江河南湖南川等大部分地区都有栽培,其质量以浙江於潜白术为最佳,又称於术。


现代化学与药理学研究表明,白术富含多糖倍半萜甾醇有机酸等活性成分,具有抗炎抗肿瘤降血糖调节免疫等药理作用。


挑选的白术幼苗,采用灌根法对白术幼苗进行处理,设臵组,分别为对照组无菌水白术根腐病模型组病原菌混合液无菌水和拮抗细菌处理组病原菌混合液拮抗菌液。


设臵每区组株,每个处理个区组。


在接种第天观察白术幼苗的发病情况,计算病情指数和防治效果。


白术根腐病泡桐内生真菌的分离拮抗细菌菌株的筛选和鉴定微生物学杂志,卯婷婷,陶刚,赵兴丽,等种微生物菌剂对辣椒主要病害的生物防治作用中国生物防治学报,东秀珠,蔡妙英常见细菌系统鉴定手册北京科学出版社,郑洁,孟佑婷,方瑶瑶,等株锰氧化细菌的分离鉴定及其锰氧化特性微生物学报,。


摘要目的筛选得到能够防治白术根腐病的内生细菌。


方法采用传统分离法从白术健康组织中分离内生细菌,以白术根腐病菌尖孢镰刀菌,茄病镰刀菌和半裸镰刀菌为指示菌,采用平板划线法和滤纸片法筛选拮抗白术内生细菌的分离鉴定及其对宿主根腐病的防效研究中药炮制论文养基中心,将直径为的张圆形无菌滤纸放臵于距中心处。


滴加菌液浓度为拮抗细菌于滤纸中。


以只接种病原菌的平板为对照组,臵于的霉菌培养箱中暗环境培养,试验重复次,计算抑菌率。


内生细菌对盆栽白术根腐病的防治效果将活化好的尖孢镰刀菌茄病镰刀菌和半裸镰刀菌用的打孔器制成菌饼,挑取个病原菌菌饼加到含有的液体培养基中,暗环境培养,调整菌液浓度至,取等量种病原菌液混合过滤得到病原菌混合液。


挑取适量拮抗细菌,接种到液体培养基,暗环境培养过夜,调整菌液浓度至,即得拮抗菌部位中的分布存在差异,根中分离得到内生细菌株,其中拮抗细菌株,占总菌株数的。


茎中分离得到内生细菌株,拮抗细菌株,占。


叶中共分离内生细菌株,拮抗细菌株,占。


根茎共有内生细菌株,拮抗细菌株,占。


根茎中分离得到的内生细菌与拮抗细菌最多。


产地方面,浙江於潜中分离内生细菌最多,为株,其中拮抗细菌株,湖南平江内生细菌株,其中拮抗细菌数最多为株表。


表白术根腐病内生拮抗细菌的初步筛选表不同产地白术内生细菌与拮抗细菌的分布情况抑菌率与抑菌带测定内生细菌与对尖孢镰刀菌,茄病镰刀菌和半裸镰刀菌均具有显著的抑菌效果,其中对种病原菌的抑菌效果最杆菌属细菌,对白术根腐病表现出较好的防治效果,为白术根腐病的生物防治提供了候选菌种。


本实验只完成了属水平的鉴定,下步将对进行多位点测序,将其鉴定到种水平,并将制备成生物菌肥进行大田试验,进步优化其对白术根腐病的生物防治效果。


利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突参考文献中国药典部姜东京,徐志伟,吴瑶,等浙江道地药材於术与白术的质量对比研究中华中医药学刊,顾思浩,孔维崧,张彤,等白术的化学成分与药理作用及复方临床应用进展中华中医药学刊,杨成前,吴中宝,余中莲,等重庆市白术根腐病发生危害及其病原菌生物学特性南方农业学报,养,试验重复次,计算抑菌率。


内生细菌对盆栽白术根腐病的防治效果将活化好的尖孢镰刀菌茄病镰刀菌和半裸镰刀菌用的打孔器制成菌饼,挑取个病原菌菌饼加到含有的液体培养基中,暗环境培养,调整菌液浓度至,取等量种病原菌液混合过滤得到病原菌混合液。


挑取适量拮抗细菌,接种到液体培养基,暗环境培养过夜,调整菌液浓度至,即得拮抗菌液。


结果与分析内生细菌的分离纯化和拮抗细菌的筛选共分离得到白术内生细菌株,其中抗根腐内生细菌株,与对种根腐病菌均有拮抗作用表。


拮抗细菌在不同产地和组病情分级标准级,无病级,仅有少许根系受伤,枯死面积小于级,根系受伤明显,枯死面积为级,根系受伤明显,枯死面积为级,地上部开始萎蔫,根系严重受伤,枯死面积为级,地上部严重萎蔫,根系严重受伤,枯死面积以上或整株死亡。


内生细菌的鉴定形态特征与理化特征观察内生细菌菌落颜色,透明度,边缘整齐度,光泽度和流动性,根据常见细菌系统鉴定手册对内生细菌进行革兰染色试验吲哚试验硫化氢试验淀粉水解活性尿素酶活性葡萄糖试验甘露醇试验木糖试验阿拉伯糖试验动力试验丙酸盐利用枸橼酸盐利用氧化酶试验明胶液化试验硝酸盐还原试验和尿素利用试验。


抗细菌制备拮抗菌菌悬液,采用灌根法进行盆栽白术根腐病防效试验通过细菌形态特征生理生化检测及技术对拮抗细菌进行菌种鉴定。


结果从白术组织中共分离得到株内生细菌,平板对峙筛选得到抗根腐内生细菌株,其中对种病原菌生长均具有显著抑制作用,平均抑菌率达盆栽试验进步表明对白术根腐病具有较好的防治效果,防治效果达经鉴定为芽孢杆菌属细菌。


结论内生细菌具有良好的白术根腐病生防潜力。


关键词内生细菌半裸

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