高产菌株，编号为。培养基配方种子培养基豆粉设计与中心复合试验设计培养基按照试验设计进行配制。试验中培养条件按照试验设计进行，中心复合实验设计培养条件根据设计得到的试验结果调整。培养温度均为，转速，湿度保持在，培养。仪器电热恒温培养箱，上海鸿都电子科技有限公司型恒温振荡器，美国精骐有限公司生物安全柜，上海力申科学仪器有限公司高效液相色谱仪座式自动电热压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械厂沃特浦实验室专用超纯水机，四川沃特尔水处理设备有限公司万用电炉，北京科伟永兴仪器有限公司移液器，大龙手动移液器，德国移液器孔微孔板小平皿。产量分析方法采用高效液相色谱对发酵液中截短侧耳素含量进行测定。吸取发酵液用甲醇定容于容量瓶，超声提取，过滤，取滤液进行高效液相色谱测定。硕士学位论文结果与分析主要影响因素的确定利用设计对发酵培养基成分与培养条件进行筛选，以确定截短侧耳素发酵过程中影响产量的主要因素。因素与水平设计如表所示，试验共考察培养基成分与培养条件中的个因素，分别用大写字母标记，每个因素设置高水平和低水平两个水平，分别用和表示。表因素与水平设计因素水平代码参数低高初始装量葡萄糖酵母粉大豆油玉米浆表显示共进行次实验点的设计与相对应的截短侧耳素的产量。试验试剂方案是在系统中根据实验设计的选择自动设计，本研究中选用的是设计。操作过程中根据表中各因素的具体水平进行发酵试验，每次试验设个重复，完成发酵后，采用高效液相色谱测定发酵产量，计算平均产量，见表中个产量结果。截短侧耳素高产菌株重离子诱变及高通量筛选表设计试验点与实验结果实验点产量表设计结果分析代码参数重要性排序初始装量葡萄糖酵母粉大豆油玉米浆将表中次试验的产量输入软件内置的试验设计表中进行分析，结果如表所示。从表中可以看出，葡萄糖和大豆油是影响截短侧耳素产量最重要的两个因素，特别是葡萄糖，达到了显著水平。其它因素在所选择的范围内变化硕士学位论文对产量的影响不大，。所以在优化培养基成分和培养条件时，除了最重要的两个条件之外的其它条件可以根据实际情况进行选择。例如，培养基成分选择低水平，初始调整在的范围内即可，装量可选择低水平，。由表中数据可知，葡萄糖在试验考察的范围内，随着葡萄糖的增加产量提高，大豆油含量比例在范围内，随着大豆油的增加产量却出现降低的趋势。最佳发酵培养基的确定以葡萄糖和大豆油含量为变量，设计中心复合实验，两因素水平中心点的确定是根据中所得结果，产量与葡萄糖和大豆油含量之间变化趋势，将最高产量点确定为中心点，如表所示。利用软件进行试验设计，试验点具体设置两个变量各有个水平，共进行次实验，实验点设计与相应结果如表所示。将实验结果用软件进行响应面分析，结果如表所示。得到二次回归方程截短侧耳素产量。决定系数，模型的拟合性较好。根据中心复合设计结果得到的三维响应面，如图。通过解方程得到，，即当葡萄糖含量为，大豆油含量为时，模型达到最大值。综雪虎老师陆锡宏老师周翔博士后在辐照过程中给予的大力帮助，感谢尚若锋老师郭志廷老师郭文柱老师辛志君老师和其他畜牧与兽药研究所的老师提供的各种帮助。还要感谢蒲秀瑛老师在学校给予我的帮助。感谢在同实验室学习和工作过的各位师兄弟姐妹们，与你们共同度过的时光愉快而难忘。感谢李兆周博士在科研思路上给予的帮助，感谢石广亮博士在实验操作中给予的指导，感谢薄永恒博士在重离子束辐照方面提供的帮助和资料，感谢胡小艳博士在实验操作中给予的帮助。感谢郭凯师兄在仪器操作中给予的指导，感谢李贵玉王虹霞毛晓芳同学在高效液相色谱测定时给予的帮助，还要感谢杨贤鹏师弟陈慧师妹的帮助。所有帮助过我的人，在这里并感谢,最后感谢我的父母及家人，感谢他们三年来的支持和理解。谢谢,硕士学位论文附录硕士期间发表论文申请专利截短侧耳素产生菌的微量培养方法和其高产菌的高通量筛选方法，专利申请号赵晓彬，陶蕾，王学红，梁剑平利用响应面方法优化截短侧耳素产生菌发酵条件中国食品工业,变率注入辐照诱变高产菌株的筛选将经过辐照的菌悬液稀释涂布平板，分离单菌落，并进行摇瓶发酵，每个菌株重复次，发酵结束后采用高效液相色谱方法测定发酵液中的截短侧耳素效价。根据截短侧耳素效价的高低筛选高产菌株。试验在剂量下共分离出株存活菌株，产量提高的菌株共有株，从中筛选出株高产菌株效价达到，较出发菌株的效价，提高了。筛选得到的高产菌编号为，其菌落形态如图所示，菌落较小，表面不光滑。图高产菌株菌落形态硕士学位论文讨论贯穿辐照后致死率曲线呈现马鞍形，致死率未达到，不能确定致死剂量，而在注入辐照中，相对低的剂量却呈现了很高的致死率，致死剂量在之间，这与重离子贯穿辐照和注入辐照的辐照方法有关。重离子束剂量效应曲线有布拉格峰，贯穿辐照重离子束贯穿整个样品，菌体受到的辐照是处在辐照通路的前段坪区的，在这段的传能线密度比布拉格峰低注入辐照时，菌悬液位于重离子束的布拉格峰，此平面上传能线密度很高。因此即使在相同的剂量下，注入辐照的致死率要明显大于贯穿辐照。贯穿辐照为截短侧耳素产生菌第次进行重离子辐照，所选择的辐照剂量范围较大，是为了考察截短侧耳素产生菌适合的诱变计量范围。贯穿辐照后发现，虽然无法确定截短侧耳素产生菌致死剂量，但在低剂量范围内致死率是逐步升高的。并且微生物辐照诱变正突变率较高的剂量多在致死剂量左右，并且正突变率随着剂量的增大在最适剂量之后开始下降。所以在第二次注入辐照时直接选择低剂量范围，由于注入辐照菌悬液布拉格峰，整体的致死率较贯穿辐照高，时致死率达到，致死剂量在之间，初步确定适合截短侧耳素的诱变剂量为的注入碳离子辐照。通过对正突变率的考察发现，注入碳离子辐照的正突变率在处最高，进步验证了致死剂量与最适诱变剂量之间的关系。截短侧耳素高产菌株重离子诱变及高通量筛选第章截短侧耳素产生菌发酵条件的响应面法优化材料与方法菌种由碳离子注入辐照后的存活菌株中筛选得到的株上，得到的最优培养基为葡萄糖大豆油酵母粉玉米浆初始装量。表中心复合设计实验因素水平表因素水平葡萄糖大豆油截短侧耳素高产菌株重离子诱变及高通量筛选表中心复合设计实验结果实动稳定校验校验计算结果与所选断路器列表比较见表。表校验计算结果与所选断路器参数比较表计算结果由以上可知，所选断路器校验全部合格。毕业设计论文隔离开关的选择及校验侧隔离开关额定电压的选择额定电流的选择极限通过电流选择根据以及安装条件，查设备手册，可选户外型高压隔离开关。根据热稳定要求对选定隔离开关进行热稳定校验取继电保护后备保护动作时间为最不利时间，计算时间为所以可忽略非周期分量热效应，只需取周期分量热效应，即。校验计算结果与所选隔离开关列表比较见表。表校验计算结果与所选隔离开关列表比较表计算结果由以上可知，所选隔离开关校验全部合格。毕业设计论文侧隔离开关额定电压的选择额定电流的选择极限通过电流选择根据以及安装条件，查设备手册，户内型高压隔离开关。根据热稳定要求对选定隔离开关进行热稳定校验取继电保护后备保护动作时间为最不利时间，计算时间为所以可忽略非周期分量热效应，只需取周期分量热效应，即。校验计算结果与所选隔离开关列表比较见表。表校验计算结果与所选隔离开关列表比较表计算结果由以上可知，所选隔离开关校验全部合格。电流互感器的选择及校验侧次回路额定电压的选择毕业设计论文电流互感器次回路额定电压，即次回路额定电流的选择电流互感器次回路额定电流，电流互感器所在回路在各种合理运行方式下的最大持续工作电流，则因为进线持续工作电流为所以二次回路额定电流选择弱电系统的。准确级选择根据所供测量的仪表的准确级，确定电流互感器的准确级如下主变高压侧所属电流互感器的准确级选择为出线所属电流互感器的准确级选择为根据以及安装条件，查设备手册，可选型号电流互感器。主要技术参数见表。表电流互感器主要技术参数型号额定电压设备最高电压额定电流比额定次电流额定二次电流级次组合热稳定电流动稳定电流峰值根据热稳定要求对选定电流互感器进行热稳定校验由参数表知则毕业设计论文根据动稳定要求校验因此，所选择的电流互感器能满足校验要求。侧主变进线次回路额定电压的选择次回路额定电流的选择因为主变进线最大持续工作电流为电抗器所以二次回路额定电流选择弱电系统的。④准确级选择根据保护需要确定电流互感器的准确级如下根据以及安装条件，查设备手册，可选户内型支柱式环氧树脂浇注绝缘电流互感器。主要技术参数见表。表电流互感器主要技术参数型号额定电压设备最高电压额定比流比额定次电流额定二次电流级次组合热稳定电流动稳定电流峰值根据热稳定要求对选定电流互感器进行热稳定校验由参数表知，。毕业设计论文高产菌株，编号为。培养基配方种子培养基豆粉设计与中心复合试验设计培养基按照试验设计进行配制。试验中培养条件按照试验设计进行，中心复合实验设计培养条件根据设计得到的试验结果调整。培养温度均为，转速，湿度保持在，培养。仪器电热恒温培养箱，上海鸿都电子科技有限公司型恒温振荡器，美国精骐有限公司生物安全柜，上海力申科学仪器有限公司高效液相色谱仪座式自动电热压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械厂沃特浦实验室专用超纯水机，四川沃特尔水处理设备有限公司万用电炉，北京科伟永兴仪器有限公司移液器，大龙手动移液器，德国移液器孔微孔板小平皿。产量分析方法采用高效液相色谱对发酵液中截短侧耳素含量进行测定。吸取发酵液用甲醇定容于容量瓶，超声提取，过滤，取滤液进行高效液相色谱测定。硕士学位论文结果与分析主要影响因素的确定利用设计对发酵培养基成分与培养条件进行筛选，以确定截短侧耳素发酵过程中影响产量的主要因素。因素与水平设计如表所示，试验共考察培养基成分与培养条件中的个因素，分别用大写字母标记，每个因素设置高水平和低水平两个水平，分别用和表示。表因素与水平设计因素水平代码参数低高初始装量葡萄糖酵母粉大豆油玉米浆表显示共进行次实验点的设计与相对应的截短侧耳素的产量。试验试剂方案是在系统中根据实验设计的选择自动设计，本研究中选用的是设计。操作过程中根据表中各因素的具体水平进行发酵试验，每次试验设个重复，完成发酵后，采用高效液相色谱测定发酵产量，计算平均产量，见表中个产量结果。截短侧耳素高产菌株重离子诱变及高通量筛选表设计试验点与实验结果实验点产量表设计结果分析代码参数重要性排序初始装量葡萄糖酵母粉大豆油玉米浆将表中次试验的产量输入软件内置的试验设计表中进行分析，结果如表所示。从表中可以看出，葡萄糖和大豆油是影响截短侧耳素产量最重要的两个因素，特别是葡萄糖，达到了显著水平。其它因素在所选择的范围内变化硕士学位论文对产量的影响不大，。所以在优化培养基成分和培养条件时，除了最重要的两个条件之外的其它条件可以根据实际情况进行选择。例如，培养基成分选择低水平，初始调整在的范围内即可，装量可选择低水平，。由表中数据可知，葡萄糖在试验考察的范围内，随着葡萄糖的增加产量提高，大豆油含量比例在范围内，随着大豆油的增加产量却出现降低的趋势。最佳发酵培养基的确定以葡萄糖和大豆油含量为变量，设计中心复合实验，两因素水平中心点的确定是根据中所得结果，产量与葡萄糖和大豆油含量之间变化趋势，将最高产量点确定为中心点，如表所示。利用软件进行试验设计，试验点具体设置两个变量各有个水平，共进行次实验，实验点设计与相应结果如表所示。将实验结果用软件进行响应面分析，结果如表所示。得到二次回归方程截短侧耳素产量。决定系数，模型的拟合性较好。根据中心复合设计结果得到的三维响应面，如图。通过解方程得到，，即当葡萄糖含量为，大豆油含量为时，模型达到最大值。综