1、系统鉴定手册，北京科学出版社沈关心，微生物学与免疫学，第六版，人民卫生出版社诸葛健，王正祥等，工业微生物实验技术手册，中国轻工业出版社尹光琳发酵工业全书，中国医药科技出版社齐新英农村利用有机废弃物的生态工程资源开发与市场李月海，刘冬玲，抗生素菌渣的综合利用山东畜牧兽医陈守文，应用微生物学基础原理，北京科学出版社美格拉泽，微生物生物技术，北京科学出版社高孔荣发酵设备，中国轻工业出版社致谢本课题自年月以来，得到了教授和老师的悉心指导，使论文得以顺利完成，两位老师严谨的治学态度，敏锐的学术思想和平易近人的博大胸怀，使我深受启迪和教诲，在此我谨向两位老师表示我衷心的感谢。在实验设计实施过程中还得到了本试验室的师兄的支持，鼓励及大力帮助，他勤俭。
2、染色后，菌体呈粉红色，故其应为嗜酸性菌。图降解菌经染色后，菌体呈紫色，故其应为嗜碱性菌。图降解菌经染色后，年，我国至少有多人因为抗生素无法控制感染的细菌性疾病而死亡。研究表明动物长期饲喂未经处理的泰乐菌素药渣泰乐菌素残留量所产肉蛋奶中泰乐菌素残留高达左右，而国家规定肉蛋奶中泰乐菌素残留不得高于，畜禽产品中抗生素的残留通过动物食品链进入人体进而影响人类健康。本课题组针对泰乐菌素降解菌株的生理生化特性展开的研究可优化残留抗生素的处理工艺。通常生理生化特性的研究可以从以下方面展开能量代谢根据细菌获得能量及其细胞所需碳素的方式可以将它们分为个大的生理群。即化能有机营养型化能无机营养型光能有机营养型和光能无机营养型。在试验中可以根据培养方式和培。
3、和经济损失。残留抗生素的抗性问题日益严重是可破坏动物体内原有的微生态平衡。因为残留的抗生素在杀灭和抑制病原微生物的同时也杀灭和抑制了些有益菌的生长与繁殖这将导致动物消化功能紊乱引起各种消化道疾病二是促使产生耐药菌。因为抗生素经长期使用后细菌会产生耐药性这使抗生素在临床上的治疗效果降低甚至全无。若不能很好的控制使用量在动物体中蓄积的药物残留还会直接威胁到人类的健康。在早期大多工厂都采用晾晒掩埋的方法处理药渣但随着生产规模的不断扩大这种办法显现的弊端越来越多工厂不可能有那么多空闲地来晾晒晾晒期间菌渣散发出种特殊异味而且菌渣有机物含量高可引起二次发酵颜色变黑产生恶臭味引来大量苍蝇环境十分恶劣。随着人们环保意识的提高和国家环保整治力度的加大众。
4、析。随着分析仪器的发展和分子遗传学分子免疫学等新兴学科的建立与发展微生物的快速鉴定技术也迅速发展起来。在细菌分类中分类方法已经发展到分子水平，如杂交测序和蛋白质电泳等都是在高分子水平上揭示细菌分类单元之间的差异。在细菌快速鉴定中也采用了许多分子生物学的方法。目前主要有核酸探针杂交技术和聚合酶链反应。核酸探针是指带有标记的特异片段当采用已知基因作探针时也叫做基因探针。经过变性处理后在适当的条件下该片段可以与待检样品中与其互补的杂交。由于探针具有特异性如果能杂交就表明该样品中存在目标菌。技术是种模拟生物体内天然复制的过程在体外通过聚合酶将特定的不失真的大量扩增的技术。年由美国的等成功研制后被迅速广泛地运用到各有关领域。细菌是单细胞原核微生。
5、水小心地冲洗。媒染滴加卢哥氏碘液媒染。水洗用水洗去碘液。脱色将玻片倾斜连续滴加乙醇脱色至流出液无色立即水洗。复染滴加蕃红复染。水洗用水洗去涂片上的蕃红染色液。晾干将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。镜检镜检时先用低倍再用高倍最后用油镜观察并判断菌体的革兰氏染色反应性。镜检结果图降解菌由图可知，降解菌菌体呈球状经染色后呈现紫色。为革兰氏阳性菌。图降解菌由图可知降解菌菌体呈球状经染色后呈现紫色。为革兰氏阳性菌。综上所述三种降解菌均为革兰氏阳性菌且细菌的体积由大到小为。对氧的需求鉴定及菌落形态供试菌种本课题组筛选获得菌种编号为。培养基蛋白胨酵母浸膏琼脂条葡萄糖配制灭菌待用器材培养皿个包好灭菌镊子涂布棒酒精灯移液枪枪头灭菌废液缸锥形瓶压。
6、基的成分来确定细菌的能量代谢方式。氧的需求根据细菌生长与氧的关系可以将细菌分为类。即好氧微好氧兼性厌氧和厌氧种类型。营养各种细菌的生长都要求有定的碳源氮源和矿质元素有些还需要维生素及其它特殊营养物质。这些特点对于各种细菌都有定的分类价值。有些菌利用特殊化合物的能力是其分类与鉴定的重要指标，如利用甲烷作为唯碳源和能源生长是甲烷氧化菌的特征。代谢产物在厌氧菌分类中代谢产物中的有机组分非常重要，常用气相色谱仪进行分析。其它方法还有与实验色氨酸分解半胱氨酸分解等。这些在细菌分类中都很有价值。酶反应常用的有氧化酶和接触酶用于种属的区分与描述。目前在细菌分类研究中已经初步形成了套现代分类技术体系。这体系包括了表型分析数值分类化学分析杂交和同源性分。
7、约的作风，严谨细致丝不苟的研究态度是我工作学习中的榜样，谨此对师兄张作义表示衷心的感谢。在课题的实验过程中，还得到了跟我在同实验室做实验的同学的支持与帮助，使本课题顺利完成，在这里向他们表示最诚挚的感谢,同时对化学系各位老师四年来对我的教诲，表示深深的谢意,最后感谢我的家人对我学业的支持和无私的奉献。培养基凝固后涂布与平面上进行有氧条件下的培养。取上述稀释菌液涂布于另组培养基上涂布完后在倒入培养基将其覆盖进行无氧条件下的培养。观察两种涂布方法中菌落的生长情况作出判断。选择合适的培养条件对降解菌进行培养观察菌落形态。实验结果对氧的需求鉴定图降解菌在厌氧条件下降解菌在密闭的培养基夹层中形成了分布均匀的菌落。因此为厌氧菌。图降解菌在厌氧条件。
8、下降解菌在密闭的培养基夹层中形成了分布均匀的菌落。因此为厌氧菌。图降解菌在厌氧条件下降解菌在密闭的培养基夹层中形成了分布均匀的菌落。因此为厌氧菌。综上所述三种降解菌均为厌氧菌。菌落形态鉴定图降解菌菌落呈白色球状菌群个数在左右平均直径约为。图降解菌菌落呈淡黄色球状菌群个数在左右菌落平均直径为。图降解菌菌落呈黄色球状菌群个数在左右平均直径为。瑞氏染色法对降解菌嗜酸碱性的鉴定供试菌种本课题组筛选获得菌种编号为。染色液和试剂瑞氏染液瑞氏染料加甲醇。将瑞氏染料放在清洁干燥乳钵中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解将已完全溶解的部分倒入棕色试剂瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解于甲醇为止。生理盐水蒸馏水器材废液缸洗瓶玻璃棒滴管载玻片接。
9、器材废液缸洗瓶玻璃棒滴管载玻片接种环酒精灯擦镜纸显微镜离心机试验步骤染色取三种降解菌溶液各自于离心管中设定转速离心分钟。弃去上清液。涂片取干净载玻片块在载玻片的左中右各加滴蒸馏水按无菌操作法依次涂上三种降解菌做成浓菌液。再取干净载玻片块将刚制成的浓菌液挑环涂在左边，制成薄的涂面，将的浓菌液取环涂在右边中间制成薄涂面将的浓菌液，将的浓菌液取环涂在右边制成薄涂面。注意取菌不要太多。图降解菌由图可知降解菌菌体呈球状经染色后呈现紫色。为革兰氏阳性菌。晾干让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。固定手执玻片端让菌膜朝上通过火焰次固定以不烫手为宜结晶紫色染色将玻片置于废液缸玻片搁架上加适量以盖满细菌涂面的结晶紫染色液染色分钟。水洗倾去染色液用。
10、力式蒸汽灭菌锅实验步骤将培养皿枪头包好与培养基起放入压力式蒸汽灭菌锅灭菌。将液体培养基混匀待到温度适宜时倒平板。稀释菌液至待菌体呈紫色，故其应为嗜碱性菌。综上所述，降解菌为嗜酸性菌，降解菌，为嗜碱性菌。第三章小结本实验采用革兰氏染色法对三种降解菌进行染色然后在显微镜下进行观察三种菌均呈紫色。在厌氧条件下对三种菌进行培养，观察到三种菌均能正常生长。且为球状。采用瑞氏染色法对三种降解菌进行染色然后在显微镜下进行观察，呈粉红色呈紫色。结果表明降解菌均为革兰氏阳性菌。且都为厌氧球菌。降解菌为嗜酸性菌，降解菌，为嗜碱性菌。参考文献陈礼仁，陈惠勤泰乐菌素研究进展微生物学通报黄秀梨，辛明秀，微生物学实验指导，高等教育出版社东秀珠，蔡妙英等，常见细菌。
11、物基本形态为球状杆状螺旋状。球状的细菌称为球菌杆状的细菌称为杆菌细胞略呈弯曲或弓形的称为弧菌弯曲在圈以上的称为螺旋菌。有些细菌除具共蛋白质与酸性染料伊红结合染粉红色称为酸性物质，细胞核蛋白和淋巴细胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色或紫色称为嗜碱性物质，中性颗粒成等电状态与伊红和美蓝均可结合，染紫红色称中性物质。本课题组综合运用以上方法鉴定出了降解菌株的基本生理生化特性。研究目的及意义我国是抗生素生产大国我国医药工业近年来呈高速发展，特别是化学原料增幅较大，据中国医药公司统计年我国有化学药厂家生产品种种个剂型余个产品实现工业总产值亿元化学原料药产量万。药渣年产生量达万若将其直接作为废物堆放或直接掩埋或焚烧势必造成严重的环境污染。
12、种环酒精灯擦镜纸显微镜离心机试验步骤染色取三种降解菌溶液各自于离心管中设定转速离心分钟。弃去上清液。涂片取干净载玻片块在载玻片的左中右各加滴蒸馏水按无菌操作法依次涂上三种降解菌做成浓菌液。再取干净载玻片块将刚制成的浓菌液挑环涂在左边，制成薄的涂面，将的浓菌液取环涂在右边中间制成薄涂面将的浓菌液，将的浓菌液取环涂在右边制成薄涂面。注意取菌不要太多。晾干让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。固定手执玻片端让菌膜朝上通过火焰次固定以不烫手为宜将涂片平放在染色架上加瑞氏染液滴,使覆盖整个涂片,固定分钟滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水,与染料混匀染色分钟用清水冲去染液,待自然干燥后或用吸水纸吸干,即可置涂片于显微镜下进行镜检。镜检结果图降解菌经。
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泰乐菌素降解菌株的生理生化特性研究