作阳性对照,按公式计算清除率粗多糖和清除实验原理是种稳定的自由基，在有机溶剂中呈紫色，在处有较大吸收，当加入具有抗氧化能力的物质后，部分自由基就会被清除掉，使该波长下吸收强度减弱，由此来判断该物质的抗氧化活性。取样品溶液于具塞试管中，加入溶液，水浴加热后，在测定样品吸光度。向蒸馏水代替测得样品本底吸光度。用蒸馏水替代样品测参比吸光度。其中每个样品浓度做个平行试验取平均值。以作阳性对照，按公式计算清除率清除超氧离子采用邻苯三酚自氧化法。原理在定条件下，邻苯三酚能够自氧化产生超氧离子，波长下有较大吸收，加入定量的抗氧化剂可对超氧离子产生不同的抑制作用，进而导致吸光度的改变。取缓冲液于具塞试管中，预热，分别加入样品溶液和的邻苯三酚溶液，振荡混匀后，于水浴，加入的终止反应，立即在波长处测定吸光度，每个浓度做个平行实验。样品本底组用同体积的蒸馏水代替邻苯三酚。参比对照组用同体积蒸馏水替代样品溶液。以为阳性对照，按以下公式计算清除率。统计学处理采用统计分析软件，进行回归分析，选取可信度为，计算。结果与分析仙茅多糖对羟自由基的清除作用仙茅粗多糖对羟基自由基的清除结果见图由图可知，仙茅粗多糖对羟基自由基有定的清除作用，其清除作用随浓度升高而增强，浓度达到后清除作用趋于平缓，其达，置信范围为。仙茅多糖对羟基自由基的清除作用弱于。的清除作用强，较低于的浓度下清除率达以上，为，置信范围为。图清除羟基自由基仙茅多糖的清除作用仙茅粗多糖对的清除结果见图。由图可知，粗多糖在范围内随着浓度的增加，清除的能力逐渐增强，浓度大于之后，多糖对自由基的清除率有上升趋势减缓，计算得粗多糖对的半清除率为。置信区间。随着的浓度增加，清除的能力里明显增强，在的浓度条件下，清除率达到以上，通过统计软件计算得对的半清除率为,置信区间。图清除仙茅多超氧阴离子自由基的清除作用仙茅粗多糖对超氧离子的清除结果见图，由图可知随着抗坏血酸的浓度增加，清除的能力里明显增强，通过统计软件计算得抗坏血酸对自由基的半清除率为。的置信度范围。在定浓度范围内随着粗多糖的浓度增加，清除的能力逐渐增强，但随着浓度继续增加时，清除率不再增加，对超氧阴离子自由基的清除率有下降趋势，通过统计软件计算得粗多糖对的半清除率为。的置信度范围。图学工业出版社，方允中，李文杰自由基与酶基础理论机其在生物学和医学中的应用北京科学出版社，致谢首先，感谢学校这四年来对我的培养，让我学到新的知识理念。能在进入社会后有个新的起点台。其次，我要感谢我的老师对我本次毕业论文实验和写作的指导及帮助，老师对我在整个过程中不知不解的点都悉心解释，在实验方案优化论文写作修改中也都尽心尽责。也谢谢同学们对我的帮助，让我能顺利完成论文的。谨以本论文献给关心和帮助我的所有老师同学，祝大家身体健康，万事如意,最后，向各位参加答辩评审的老师表示衷心的感谢。附录附录缩略词表英文缩写英文全称汉语全称，二苯基三硝基苯肼,二叔丁基甲基苯酚三羟甲基氨基甲烷吸光度统计产品与服务解决方案软件前列腺素相对标准偏差半数清除率丁基羟基茴香醚附录实验试剂试剂名称规格生产厂家无水乙醇分析纯级上海有机化工试剂研究所乙醇分析纯级上海有机化工试剂研究所抗坏血酸分析纯级成都科龙化工试剂厂联苯三酚分析纯级成都科龙化工试剂厂浓硫酸分析纯级成都科龙化工试剂厂水杨酸分析纯级成都科龙化工试剂厂分析纯级成都科龙化工试剂厂分析纯级成都科龙化工试剂厂正丁醇分析纯级西陇化工有限公司丙酮分析纯级北京益利精细化学品有限公司氯仿分析纯级四川西陇化工有限公司乙醚分析纯级成都联合化工试剂研究所分析纯级浓分析纯级成都科龙化工试剂厂分析纯级日本和光纯药工业株式会社公司葡糖糖分析纯级天津博迪化工股份公司附录实验仪器仪器名称仪器型号生产厂家数控恒温水浴锅型金坛市正基仪器有限公司循环水式多用真空泵Ⅲ郑州长城科工贸有限公司多功能粉碎机文岭市百乐粉碎设备厂电磁炉富士宝精密电子天平上海舜宇恒平电热恒温鼓风干燥箱上海齐欣科学仪器有限公司紫外可见分光光度计北京普析通用仪器有限责任公司减压旋转蒸发仪郑州南北仪器设备有限公司离心机型德国艾本德股份公司冰箱海尔真空冷冻干燥机上海市离心机机械研究所有限公司清除超氧自由基讨论由以上结果可知，在定浓度范围内随着粗多糖浓度的增加，清除三种自由基的能力逐渐增强。当粗多糖的浓度增大到定浓度时，清除能力增长趋势相对变缓，难以达到高的清除率，可能是由于提取的粗多糖含有杂质杂质吸收波长与自由基形成的有色物吸收波长相近的影响，也可能是由于在自由基引发剂存在的条件下，多糖与单糖类似也可以自动氧化产生新的有机自由基之故。本实验采用双波长分光光度法对两个吸收峰的组分进行测定，避免了多糖颜色造成背景深或溶液浑浊对试验结果的干扰，抵消了试验条件变化对测定结果的影响，从而提高了准确度。结论本实验使用水提醇沉法提取仙茅中的多糖类化合物，采用双波长法测定多糖的含量。分别采用自由基法，邻苯三酚法和法测定提取的多糖类化合物的抗自由基能力。结果表明仙茅经过水提醇沉真空冷冻干燥后粗多糖含量偏低，多糖对自由基超氧阴离子自由基羟自由基有定的清除作用。且在定浓度范围内清除率随浓度的增大而增大，当粗多糖的浓度增大到定浓度时，清除能力增长缓慢。当仙茅多糖浓度为时，对的清除率分别达到，表明仙茅多糖具有定的清除率。仙茅中的多糖类化合物作为种潜在的具有抗自由基活性的物质，有待进步的研究。参考文献李隆云,陈大霞,秦松云等仙茅属植物个国产种的遗传关系研究中国中药杂志中国科学院中国植物志编辑委员会中国植物志第卷第分册北京科学出版社仙茅老年人的良药农训学中医中药黄有霖仙茅的研究进展中药材四川植物志编委会四川植物志第卷成都四川人民出版社,周文化,唐冰,钟秋平短梗霉多糖的微生物发酵及其在食品工业中的应用食品与机械杂志吴东儒糖类的生物化学北京高等教育出版社,陈泉生，陈万群，杨士琰仙茅的药理研究中国中药杂志，年熊皓平,杨伟丽,张友胜等天然植物抗氧化剂的研究进展天然产物研究与开发周勇,张丽,赵离原等仙茅多糖对小鼠免疫功能调节作用实验研究北京中医药大学免疫研究室,北京,程忠泉,刘贤贤,义祥辉等仙茅属植物化学成分研究进展云南植物研究,张振东,吴兰芳,景永帅,杨娟仙茅提取物体外抗氧化活性研究中国老年学杂志,曹剑锋,侯国鹏,李嘉宏等五种抗氧化剂抗氧化活性的比较研究食品科学魏苑,张盛贵蒽酮硫酸法测定枸杞多糖含量的研究食品工业科技,,王锐,何嵋,袁晓春等桑葚多糖体外清除自由基活性研究安徽农业科学薛长辉,端允双波长测定山丹中总黄酮含量技术食品工程张志军,李淑芳,魏雪生灵芝多糖清除自由基活性的研究食品研究与开发,柳钟勋,左增艳,林赴田,等作为乙型肝炎基因工程疫苗新型复合佐剂的效果及安全性病毒学报张倩,江萍,秦礼康等多糖功能的研究进展贵州农业科学赵保路氧自由基和天然抗氧化剂北京科学出版社,黄瑞松中草药多糖含量测定方法概述中国药师齐惠玲,魏绍云,王继伦等