1、性只。造模后第天颈椎脱臼处死小鼠，可见正常对照组肝组织完整，呈红色模型组色泽暗红，表面有大面积白色块状。模型组只腹水小鼠出现肝内皮下腹膜后及肠系膜等广泛腹腔转移。肝组织染色，镜下可见正常对照组肝细胞排列整齐，模型组染色观察发现，在肝脏组织与肿瘤坏死区域出现明显的分界，在分界处可看到肝脏组织排列不整齐，肝细胞变形，大小不，细胞核增大，染色加深癌组织周围肝细胞排列紊乱，细胞包质呈空泡状，肝血窦内有较多炎症细胞浸润图。万方数据三峡大学硕士学位论文肝原位癌移植瘤对小鼠脾胸腺指数的影响表肝原位移植瘤模型小鼠脾指数和胸腺指数组别脾指数胸腺指数∆∆∆∆注与正常组比较，∆，∆∆模型组，正常组模型小鼠与正常小鼠相比，免疫器官明显萎缩，即脾。
2、模型组，顺铂组，组，联合顺铂组万方数据三峡大学硕士学位论文接种后第天，即给药第二天起，正常组小鼠的体重呈线性增加的趋势，模型小鼠体重先增加，接种第天即给药第天开始连续天变化不明显，后有下降的趋势，组小鼠体重变化不明显，有增加的趋势，联合顺铂组和顺铂单用组小鼠体重均明显下降，顺铂组小鼠体重下降更明显。肝原位移植瘤模型小鼠脾指数和胸腺指数表肝原位移植瘤模型小鼠脾指数及胸腺指数组别脾指数胸腺指数∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆注与组比较，∆，∆∆与组比较正常组，模型组，顺铂组，组，联合顺铂组模型小鼠与正常小鼠相比，免疫器官明显萎缩，即脾指数和胸腺指数下降，与正常对照组比较，组脾指数和胸腺指数比正常组高，中药复方联合顺铂用药后。
3、组织形态检测小鼠血清中谷丙转氨酶谷草转氨酶甲胎蛋白的含量技术检测肿瘤及周肝组织中蛋白的表达。结果组顺铂组和联合用药组的瘤体质量均较模型对照组明显降低﹤。抑瘤率分别为，和。与模型组相比，组顺铂组联合用药组小鼠血清中谷丙转氨酶谷草转氨酶甲胎蛋白的表达含量明显降低﹤组顺铂组联合用药组小鼠肝原位移植瘤组织中的的表达含量较模型对照组低﹤。与顺铂组相比，联合用药组能缓解化疗药物顺铂对小鼠机体引起的体重减轻免疫器官抑制等副作用。结论中药复方能够抑制小鼠肝原位癌移植瘤模型的肿瘤生长缓解化疗药物顺铂对模型小鼠产生的体重减轻免疫器官抑制等副作用抑制肝癌的生长可能是通过抑制信号通路，从而抑制而发挥作用。关键词复方肝原位移植瘤万方数据三峡大学硕士学位论。
4、师陈涛教授二四年五月万方数据，万方数据三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名日期三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及。
5、压电泳至溴酚蓝跑完浓缩胶层，大约需，将电压调至，当溴酚蓝迁移至分离胶下缘时，停止电泳，关掉电源，时间约左右。分离胶浓缩胶的配置各组分名称分离胶浓缩胶转膜预先将转移缓冲液置于预冷，电泳结束后，取出凝胶，切除浓缩胶，将胶和滤纸浸泡于转移缓冲液中，膜于甲醇中浸泡后移置于转移缓冲液中。按照阴极滤纸硝酸纤维膜凝胶滤纸阳极的顺序固定好，放入电转移槽中，放入冰块，下，转膜。免疫反应万方数据三峡大学硕士学位论文膜置入含脱脂牛奶的溶液在室温下封闭，脱色摇床上振荡。洗膜次，每次，均在摇床上进行。将抗用抗稀释液按稀释，加入盛有转入蛋白的膜的皿中摇床振荡，过夜。洗膜次，每次。加入辣根过氧化物酶标记的二抗用按稀释室温，摇床振荡，洗膜次，每次。化学发光，显。
6、，免疫器官均出现明显抑制，单用顺铂组免疫器官萎缩现象最严重。小鼠肝功能和甲胎蛋白的表达表小鼠血清中的检测组别∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆∆注与组比较，∆，∆∆与组比较正常组，模型组，顺铂组，组，联合顺铂组模型小鼠血清中含量明显高于正常对照组小鼠，有统计学差异，用药组与模型组相比，含量低于模型组，有统计学差异，用药组之间比较没有统计学差异。另外，对小鼠血清中的检测发现，与正常组比较，模型组活力明显增高，差异有统计学意义，说明，模型小鼠肝功能出现异常，顺铂组血清中的活力明显低于模型组，差异有统计学意义万方数据分类号密级公开硕士学位论文基于信号通路探讨复方联合顺铂干预小鼠肝原位癌的作用机制研究学位申请人王晶学科专业药理学指导教。
7、指数和胸腺指数明显降低。小鼠肝功能及的检测表小鼠血清中的表达组别∆∆∆∆∆∆注与正常组比较，∆，∆∆模型组，正常组模型小鼠血清中甲胎蛋白含量明显高于正常对照组小鼠，有统计学差异另外，对小鼠血清中谷丙转氨酶谷草转氨酶的检测发现，与正常组比较，模型组活力明显增高，差异有统计学意义。第二部分中药复方联合顺铂对肝原位移植瘤模型小鼠的干预作用肝脏肿瘤及形态学观察肉眼可见正常组肝脏色泽鲜红，模型组肝脏呈暗红色，肝叶边缘有肿瘤，模型组不仅在接种肿瘤细胞的左中叶有肿瘤，而且在其他肝叶表面也出现了肿瘤，且覆盖面积大，组联合顺铂组顺铂组肝脏表面肿瘤覆盖面积比模型组明显缩小，多数仅在接种肿瘤细胞的左中叶出现肿瘤，其他肝叶上面积较小或无肿瘤。染色观。
8、察发现，正常组小鼠的肝脏组织肝细胞排列整齐，模型组肝脏被肿瘤侵润的部位排列紊乱，细胞形态不完整，细胞核染色加深，有大量坏死区域。中药复方组联合顺铂组及顺铂组与模型组相比较，肝细胞紊乱，能看到肝细胞形态，肿瘤侵润部位细胞核染色加深，坏死范围较模型组小。万方数据三峡大学硕士学位论文图小鼠肝脏肿瘤形态学观察注正常组，模型组，顺铂组，组，联合顺铂组万方数据三峡大学硕士学位论文药物对小鼠肝脏肿瘤生长情况的影响表肝原位移植瘤模型小鼠瘤体质量及抑瘤率组别瘤体质量抑瘤率∆∆∆∆∆∆注与组比较，∆，∆∆与组比较正常组，模型组，顺铂组，组，联合顺铂组接种内，正常组及模型组小鼠外观没有明显变化，开腹可以看到注射肿瘤细胞的肝叶边缘出现直径约大小的肿瘤，。
9、结参考文献综述后记附录万方数据三峡大学硕士学位论文英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称肝细胞癌肝细胞生长因子肝细胞生长因子前体肝细胞生长因子受体促分裂原活化蛋白激酶细胞外信号调节激酶氨基末端激酶血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体间质金属蛋白酶金属蛋白酶组织抑制剂磷脂酰肌醇激酶受体辅助因子，甲胎蛋白在波长下测定其值，根据标准曲线计算得出样品蛋白的浓度。聚丙酰凝胶电泳配的分离胶，并注入玻璃夹层中，用的乙醇封胶，待分离胶凝固后，倒掉乙醇，用滤纸吸去玻璃板上多余的乙醇，灌入浓缩胶，插入干净的梳子。待浓缩胶凝固后，将玻璃板放入电泳槽中，加入电泳缓冲液，拔去梳子，加样。根据蛋白定量得到的蛋白浓度，计算蛋白的溶液体积即为上样量。接通电源，稳。
10、影，定影在暗室中，将荧光检测试剂液等体积混合，滴在膜，将光片放于膜上，曝光段时间根据发光强度调整曝光时间后，取出光片在显影液中洗，自来水冲洗底片，放入定影液中，条带清晰后取出，自来水冲洗后，晾干保存。数据处理结果用软件分析，以目的蛋白条带的值蛋白条带的值表示相对蛋白含量。统计学处理数据资料用均数标准差表示，采用软件进行统计学处理，各组均数之间比较进行单因素方差分析检验，以检验比较两组间均数的差异为有统计学意义。万方数据三峡大学硕士学位论文结果第部分小鼠肝癌原位移植模型构建小鼠肝脏肿瘤及形态学观察图接种后第天肝脏及肿瘤组织注模型组，正常组采用直接注射法构建肝原位移植瘤模型肝组织成瘤率可达到，造模天后，模型组中例出现腹水，雌性只，雄。
11、成果，无论是以何种形式刊发学术论文进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的切法津和经济后果。学位论文作者签名日期万方数据三峡大学硕士学位论文内容摘要目的评价中药复方及顺铂对小鼠肝原位癌的疗效，探索该复方抗肝癌的作用机制。方法只小鼠，雌性各半，随机分成模型对照组只，正常对照组只，复方组只，组只，组只，模型组采用直接注射法构建小鼠肝原位癌模型，正常对照组采用同样的方法注射等量的生理盐水，以抑瘤率为指标，观察各组药物对肝原位癌模型小鼠肿瘤生长的抑制作用以小鼠的体重生长状况及胸腺脾指数为指标，观察各组药物对肝原位癌模型小鼠的生存状况的影响光镜下观察肿瘤。
12、种后第开腹观察发现，模型组注射肿瘤细胞的肝叶上的肿瘤直径可达，其他肝叶上也散存肿瘤区域，出现肝内转移腹腔转移，未见肺转移。肿瘤状态呈边缘型，或嵌在肝脏组织中。接种后第，解剖取出肝脏，观察发现模型组肿瘤较用药组直径大，有腹腔转移，组有腹腔转移，联合组及顺铂组无腹腔转移，剥离肝脏上的肿瘤组织，称重并计算抑瘤率，各组小鼠的瘤体质量及抑瘤率见表，组联合顺铂组及顺铂组的抑瘤率分别为。各用药组的瘤质量均明显低于模型对照组，差异有统计学意义。用药组两两比较显示联合顺铂组的瘤体质量明显低于组，与顺铂组相比，差异无统计学意义，联合顺铂组与顺铂组相比，瘤体质量无统计学差异。小鼠给药前后体重的变化体重时间注与组相比。图小鼠给药前后体重的变化注正常组，。
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