的生物膜相关研究报道认为生物膜的形成能力与细菌分离的标本来源有定的相关性，本研究中也发现肺炎克雷伯菌痰液来源的标本形成生物膜的能力远远高于其他标本来源。进步查阅相关临床资料发现我院近的都分离自痰液，同时痰液标本形成生物膜的能力又是最强的，提示我们可能在形成生物膜机制上存在些特殊性，并且我们猜测其生物膜的形成与其耐药性有定的相关性。接下来的研究将从多个方面详细分析其体外形成生物膜的特点及相关机制，以期为临床上存在的些药物体外敏感而体内治疗失败的问题提供理论依据，进而指导临床更有效的使用抗菌药物。第二部分耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌生物膜形成能力相关特性研究通常同时对头孢菌素类喹诺酮类以及氨基糖苷类药物表现出耐药，具有多重耐药甚至是范耐药的表型，而目前国内外关于其的研究主要针对分子耐药机制，包括碳青霉烯酶外膜蛋白的突变会缺失外排泵表达量的增加等。我们知道细菌耐药性的产生往往是复杂的多种机制共同导致的，关于多重耐药的铜绿假单胞菌鲍曼不动杆菌以及金黄色葡萄球菌的研究均已涉及到生物膜形成能力的研究，肺炎克雷伯菌生物膜相关数据的缺乏促使我们进行本部分的研究。材料与方法材料实验菌株温州医科大学硕士学位论文研究菌株为第部分分析筛选的株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌，药敏试验质控菌大肠埃希菌购自卫生部临检中心实验阳性对照为本实验室扩增阳性并测序确认后的保存菌株。抗菌药物亚胺培南厄他培南美罗培南，等抗菌药物标准品购自中国药品生物制品检定所。主要材料和试剂细菌提取试剂盒杭州昊天生物科技有限公司反应原料和大连有限公司引物合成及产物测序委托华大基因普通电泳琼脂糖干粉法国有限公司，琼脂英国有限公司核酸染料温州长风生物科技有限公司刚果红美国公司冰醋酸国药集团化学试剂有限公司。生物膜形成试验相关的试剂同第部分。主要仪器和设备聚合酶链反应仪仪凝胶电泳成像分析仪型电热恒温水槽上海森信实验仪器有限公司型离心机，分光光度计美国有限公司全功能微孔板检测酶标仪美国公司径迹蚀刻膜美国公司。主要培养基和溶液的配制生理盐水甘油肉汤羊血琼脂培养基液体培养基的配制同第部分。表主要培养基和试剂的配方及配制方法培养基或试剂成分配方配制方法琼脂琼脂琼脂，蒸馏水定容至混匀后，调节值在范围内，高压蒸汽灭菌，保存备用。电泳缓冲液冰醋酸冰醋酸蒸馏水定容至混匀后，调节值在范围内，高压蒸汽灭菌，保存备用。温州医科大学硕士学位论文琼脂糖凝胶琼脂糖干粉琼脂糖干粉缓冲液琼脂糖干粉和缓冲液混匀后，微波炉高热加热至沸腾，取出摇晃，中低热再次加热至完全溶解，冷却至左右，加入左右的，混匀后缓慢倒入电泳模具中，自然凝固后使用。刚果红平板刚果红，胰蛋白胨，酵母浸出液刚果红胰蛋白胨酵母，蒸馏水定容至刚果红溶解至蒸馏水中，经径迹蚀刻膜过滤达到无菌状态，加入到高压并冷却至的无盐琼脂培养基中混匀，倾注至无菌平皿中，无菌试验检测合格后，保存备用。方法琼脂稀释法检测碳青霉烯类药物对具体的最低抑菌浓度细菌的培养将保存的株和药敏质控菌用接种环接种至哥伦比亚血平板上，置孵箱外科，共占药物敏感性结果显示我院肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率接近，对呋喃妥因的耐药率已高达，对包括头孢曲松头孢他啶在内的三代头孢菌素类甚至是酶抑制剂复合药物氨苄西林舒巴坦的耐药率也都在以上，仅对四代头孢菌素的头孢吡肟的敏感性较好对喹诺酮来药物和氨基糖苷类药物的总体耐药水平较接近，处于之间仅对碳青霉烯类药物亚胺培南的敏感性最好，总体耐药率仅为。体外生物膜形成能力的初步分析发现痰液标本来源的菌株形成生物膜的能力高于其他标本来源。株试验菌株对碳青霉烯类药物亚胺培南美罗培南厄他培南中的种甚至是三种药物表现出不同程度的敏感性下降或者耐药。同时发现在近几年中呈现明显的上升趋势，且主要集中在痰液标本。而总体的生物膜形成能力与第部分试验中各类标本的总体水平无差异，中痰液标本生物膜形成能力与第部分试验获得的痰液标本之间也无差异具有超粘特性的菌株产纤维素的菌株形成生物膜的能力并不比表型试验阴性的菌株强，编码菌毛的毒力基因缺失的菌株形成生物膜的能力并没有降低型别菌株生成生物膜的能力与其他型别相比无明显差异。对试验菌株的值范围为，都表现为敏感，而值的范围为，都表现为耐药。但对细菌的值的大小与细菌形成生物膜的能力并没有相关性，即并不是生物膜的值越高，就越高。含亚抑菌浓度的培养基下培养的生物膜的值比不含培养基培养的生物膜值都有不同幅度的提高，即亚抑菌浓度的对每株菌生物膜的形成能力都表现出不同程度的促进作用。另外，外排泵缺失的试验菌株比外排泵基因完整的试验菌株形成生物膜的值的水平低。细菌试验状态生物膜状态含浮游状态含生物膜状态下外排泵基因的表达量都比校准状态不含培养基的细菌浮游态温州医科大学硕士学位论文下高。结论本院临床分离的肺炎克雷伯菌标本来源主要来自于痰液，主要分离的科室是，对多种药物耐药情况严重，仅对碳青霉烯类药物保持较好的敏感性。痰液标本分离的肺炎克雷伯菌体外形成生物膜的能力最强，同时我院大部分分离自痰液，且此类耐药菌株逐年增多。菌株形成生物膜的能力与碳青霉烯类耐药程度无相关性，不能认为单的生物膜屏障作用就能造成耐药性的增强。本研究还证明生物膜形成能力与多种毒力表型和基因型无关，且不具有特定的流行分布特点。对试验菌株的生物膜的值相较于对应菌株的升高了倍，在定程度上解释了临床上发生的药物体外敏感而体内治疗无效的现象。的值的高低与细菌形成生物膜的值的高低之间没有相关性，进步证明生物膜细菌对抗菌药物的高水平耐药不是通过生物膜的物理屏障作用阻止其渗透入细菌内部来产生的。外排泵基因是菌株体外生物膜形成的种机制。关键词肺炎克雷伯菌生物膜外排泵温州医科大学硕士学位论文用提高细菌营养物质摄取率。有研究还认为胞外基质之间复杂的吸附和应答作用可以减弱多种药物通过生物膜的渗透性，从而降低生物膜细菌对抗菌药物的暴露率和敏感性，可见生物膜在细菌耐药机制中也发挥重要作用。而目前关于生物膜的研究主要局限在鲍曼不动杆菌铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌等，与肺炎克雷伯菌生物膜特性的相关研究资料较少。关于其他菌属中培量的专门送货车，统集中分片送货，减少客户的取货开支，让客户真正把钱花在印品本身上，减小数码印刷品的总成本。有了以上两种措施客户就不会觉得数码印刷产品贵了而是变成了种经常的需要，人人加强了数码印码印刷品的应用市场。李荣在文章中指出数码印刷对人才的培养对策。在各类院校中开设数码印刷专业目前在各层次学历教育的各类印刷专业院校中很少有开设数码印刷专业的，可从不同层次的院校中选些地域需求旺盛办学草础较好约学佼试点开设数码印刷专业以满足社会的需求。校企合作工学结合的人才培养模式由学校与数码印刷刷企业就数码印刷人才的涪养达成共识。采用工学结合的人才培养模式。国外的研究现状秦建铭在数码印刷文章中提出。在欧美,数码印刷业十分发达,份以下的订单基本都被数码印刷所占有。很多大印刷厂拥有几台数码印刷机。其中有数码印刷机为网络个性生印品服务。网络个性印品主要以照片书和个性台历为主。他们很热衷于这种个性印品。如威廉王子大婚就有不少个性印品,其中的啤酒标签就是数码印刷完成的。目前美国数码印刷零售额目前的年增长率为,欧洲的年增长率为,而在世界其他地区平均年增长率为,而国内数码印刷增长率不足,市场发展潜力巨大。发展趋势经过最近几年的发展，未来商业印刷也必定是朝网络化发展，网络印刷已经不是个概念或是种神秘的商业模式，它会越来越普遍地被中小企业所接受，并且产生依赖。老牌的传统印刷企业肯定是比较吃亏，方面没有像数码快印企业有很多的实体店面可以接触到终端用户，另方面遭受新代网络印刷公司从网络上抢单，哈尔滨商业大学毕业设计论文拦路打劫。而小型传统企业在夹缝中生存，日子会越来越难，或许转型合版是缓兵之计，但也不是未来的方向，随着数码印刷机的质量越来越好，价格越来越便宜，合版存在的价值也越来越小。随着社会的进步和经济的发展，人们进入多元化个性化高效化的信息时代，对印刷品的需求逐渐也有所不同，传统印刷行业已经无法满足现在人们生活工作的需求，而数码印刷企业正顺应信息时代的需求。与传统印刷相比,数码印刷的主要优势在于实现张起印的超级短版印刷,适应个性化需求的按需印刷。为了更透彻的研究，本文将对数码印刷企业的投资和运营进行分析研究数码印刷企业研究的目的和意义近年来,数码印刷是随着电脑网络的普及而逐渐兴起的这新兴印刷方式,它的出现使印刷市场出现了更多的精彩与繁荣。数码印刷以之前没有的灵活性高效性和总体拥有成本等方面的诸多优势,赢得了人们越来越多的关注和喜爱,填补了传统印刷技术特点而造成的市场空白。通过以上对国内外数码印刷企业的现状和发展分析，本文将对根据这些结论来对数码印刷企业的投资和管理进步总结归纳，并从模拟建设工厂的角度在细节上得出结论。哈尔滨商业大学毕业设计论文数码印刷企业简介企业选址我团队计划开创的数码印刷企业，根据市场调查报告以及本策划书第节中所述情况，综合各方因素考虑后将厂址选定在哈尔滨市利民镇朱家屯，主要原因如下市场广阔该地区以医药食品文教信息服务外包为主要产业这些产业直以来都与印刷行业有定的的生物膜相关研究报道认为生物膜的形成能力与细菌分离的标本来源有定的相关性，本研究中也发现肺炎克雷伯菌痰液来源的标本形成生物膜的能力远远高于其他标本来源。进步查阅相关临床资料发现我院近的都分离自痰液，同时痰液标本形成生物膜的能力又是最强的，提示我们可能在形成生物膜机制上存在些特殊性，并且我们猜测其生物膜的形成与其耐药性有定的相关性。接下来的研究将从多个方面详细分析其体外形成生物膜的特点及相关机制，以期为临床上存在的些药物体外敏感而体内治疗失败的问题提供理论依据，进而指导临床更有效的使用抗菌药物。第二部分耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌生物膜形成能力相关特性研究通常同时对头孢菌素类喹诺酮类以及氨基糖苷类药物表现出耐药，具有多重耐药甚至是范耐药的表型，而目前国内外关于其的研究主要针对分子耐药机制，包括碳青霉烯酶外膜蛋白的突变会缺失外排泵表达量的增加等。我们知道细菌耐药性的产生往往是复杂的多种机制共同导致的，关于多重耐药的铜绿假单胞菌鲍曼不动杆菌以及金黄色葡萄球菌的研究均已涉及到生物膜形成能力的研究，肺炎克雷伯菌生物膜相关数据的缺乏促使我们进行本部分的研究。材料与方法材料实验菌株温州医科大学硕士学位论文研究菌株为第部分分析筛选的株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌，药敏试验质控菌大肠埃希菌购自卫生部临检中心实验阳性对照为本实验室扩增阳性并测序确认后的保存菌株。抗菌药物亚胺培南厄他培南美罗培南，等抗菌药物标准品购自中国药品生物制品检定所。主要材料和试剂细菌提取试剂盒杭州昊天生物科技有限公司反应原料和大连有限公司引物合成及产物测序委托华大基因普通电泳琼脂糖干粉法国有限公司，琼脂英国有限公司核酸染料温州长风生物科技有限公司刚果红美国公司冰醋酸国药集团化学试剂有限公司。生物膜形成试验相关的试剂同第部分。主要仪器和设备聚合酶链反应仪仪凝胶电泳成像分析仪型电热恒温水槽上海森信实验仪器有限公司型离心机，分光光度计美国有限公司全功能微孔板检测酶标仪美国公司径迹蚀刻膜美国公司。主要培养基和溶液的配制生理盐水甘油肉汤羊血琼脂培养基液体培养基的配制同第部分。表主要培养基和试剂的配方及配制方法培养基或试剂成分配方配制方法琼脂琼脂琼脂，蒸馏水定容至混匀后，调节值在范围内，高压蒸汽灭菌，保存备用。电泳缓冲液冰醋酸冰醋酸蒸馏水定容至混匀后，调节值在范围内，高压蒸汽灭菌，保存备用。温州医科大学硕士学位论文琼脂糖凝胶琼脂糖干粉琼脂糖干粉缓冲液琼脂糖干粉和缓冲液混匀后，微波炉高热加热至沸腾，取出摇晃，中低热再次加热至完全溶解，冷却至左右，加入左右的，混匀后缓慢倒入电泳模具中，自然凝固后使用。刚果红平板刚果红，胰蛋白胨，酵母浸出液刚果红胰蛋白胨酵母，蒸馏水定容至刚果红溶解至蒸馏水中，经径迹蚀刻膜过滤达到无菌状态，加入到高压并冷却至的无盐琼脂培养基中混匀，倾注至无菌平皿中，无菌试验检测合格后，保存备用。方法琼脂稀释法检测碳青霉烯类药物对具体的最低抑菌浓度细菌的培养将保存的株和药敏质控菌用接种环接种至哥伦比亚血平板上，置孵箱