，目的基因会被破坏也不能用限制酶Ⅰ，它在目的基因上有两个酶切位点，如果用其切割，质粒上的标记基因会被破坏，就没有办法进行重组质粒的检测，故应选用限制酶Ⅰ。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四对应训练下图所示为部分双链片段，下列有关基因工程中工具酶功能的叙述，错误的是切断处的酶为限制酶连接处的酶为连接酶切断处的酶为解旋酶连接处的酶为聚合酶答案解析解析关闭处为磷酸二酯键，限制性核酸内切酶能切断该处，连接酶能连接形成该键。

处为氢键，切断该处的酶为解旋酶。

答案解析关闭考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四对应训练若要利用目的基因见图甲和噬菌体载体见图乙构建重组见图丙，限制性核酸内切酶的酶切位点分别是ⅡⅠ和Ⅰ。

下列分析合理的是用Ⅰ切割目的基因和噬菌体载体用Ⅱ和Ⅰ切割目的基因和噬菌体载体用Ⅱ和Ⅰ切割目的基因和噬菌体载体用Ⅰ和Ⅰ切割目的基因和噬菌体载体答案解析解析关闭解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用Ⅰ和Ⅰ切割目的基因和噬菌体载体，构建的重组中聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才定与图丙相同。

答案解析关闭考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四考点二基因工程的基本操作程序与应用获取目的基因目的基因主要指编码蛋白质的基因。

获取方法通过基因文库中获取目的基因，通过技术扩增目的基因，通过化学方法直接人工合成。

构建基因表达载体目的不仅使目的基因进入受体细胞并有效表达，而且要能稳定存在且遗传给后代。

基因表达载体的组成目的基因启动子终止子和标记基因等。

考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四导入目的基因连连考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四检测和鉴定目的基因检测分子水平检测是否导入目的基因分子杂交技术探针与转基因生物杂交。

检测是否转录分子杂交技术探针与转基因生物杂交。

检测是否翻译抗原抗体杂交。

鉴定个体水平生物性状的表达与否目的基因是否表达。

考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四基因工程的应用植物基因工程培育抗病转基因植物抗虫转基因植物和抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。

动物基因工程改善畜产品品质，提高动物生长速度，生产药物，用转基因动物作器官移植的供体。

基因治疗指利用正常基因置换或弥补缺陷基因的治疗方法。

考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四判判基因表达载体由目的基因启动子终止子标记基因等组成。

构建基因表达载体的主要目的是方便将目的基因导入受体细胞。

可利用分子杂交技术检测目的基因是否转录出。

可利用抗原抗体杂交法检测目的基因是否成功翻译。

可利用显微注射法将目的基因导入植物细胞中。

提示构建基因表达载体的主要目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下代，使目的基因能够表达和发挥作用。

提示将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法花粉管通道法基因枪法。

考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四目的基因的获取从基因文库中获取基因文库包括基因组文库或文库等。

人工合成目的基因的常用方法化学合成法已知核苷酸序列的较小基因，直接利用合成仪用化学方法合成，不需要模板。

反转录法以为模板，在逆转录酶作用下人工合成。

考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四通过技术扩增目的基因目的通过指数式扩增获取大量目的基因。

技术与复制的比较技术复制相同点原理复制碱基互补配对原料四种游离的脱氧核苷酸条件模板酶原料引物不同点解旋方式在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制扩增仪主要在细胞核内酶热稳定的聚合酶酶细胞内含有的聚合酶结果在短时间内形成大量的片段形成整个分子考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四基因表达载体的构建基因表达载体的构建过程考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四基因表达载体的组成启动子终止子是基因转录的起点和终点，在转录过程中起调控作用。

标记基因作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，如抗生素抗性基因。

目的基因能控制特定性状的用基因工程培育抗虫植物的示意图。

以下相关叙述，正确的是的构建需要限制性核酸内切酶和聚合酶参与侵染植物细胞后，重组质粒整合到的染色体上的染色体上若含抗虫基因，则就表现出抗虫性状只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异答案解析解析关闭本题考查基因工程的原理和操作。

构建基因表达载体时，需要限制性核酸内切酶和连接酶参与，项错误携带外源片段的质粒进入受体细胞后，整合到染色体上，随染色体进行同步复制，项错误抗虫基因在转基因植株中正常表达才能使其表现出抗虫性状，项错误植株抗虫性状的出现是由于获得了外源基因，属于基因重组导致的可遗传变异，项正确。

答案解析关闭考点考点二考点三自主梳理典题试做核心突破考点四对应训练为达到相应目的，必须通过分子检测的是携带链霉素抗性基因受体菌的筛选产生抗人白细胞介素抗体的杂交瘤细胞的筛选转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定三体综合征的诊断答案解析解析关闭解答此题可结合基因工程的第四步目的基因的检测和鉴定。

鉴定水平分为分子水平细胞水平以及个体水平。

受体菌的筛选属于个体水平，不需要分子检测，故错误。

杂交瘤细胞的筛选需用抗原抗体杂交的方法，属于分子水平，故正确。

对抗虫棉植株抗虫效果的鉴定属于个体水平，故错误。

三体综合征检测需进行细胞培养，并分析其染色体组成，属于细胞水平，故项错误。

答案解析关闭考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四考点三蛋白质工程崛起缘由天然蛋白质不定完全符合人类生产和生活的需要。

目标根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行分子设计。

概念理解基础通过物理化学或生物化学等技术了解蛋白质的结构与功能。

操作借助计算机辅助设计基因定点诱变和重组技术改造基因。

结果定向改造天然蛋白质或制造出自然界不存在的蛋白质。

目的满足人类的生产和生活的需求。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四设计流程预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列基因。

判判蛋白质工程是直接对蛋白质结构进行的改造。

蛋白质工程能生产出自然界不存在的蛋白质。

提示蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，从而对蛋白质结构进行的改造。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四蛋白质工程的流程考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四蛋白质工程与基因工程的比较蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质的功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品结果生产自然界没有的蛋白质般是生产自然界已有的蛋白质考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四蛋白质工程基因工程联系蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。

对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四例题全国Ⅱ卷已知生物体内有种蛋白质，该蛋白质是种转运蛋白，由个氨基酸组成。

如果将分子中位的丝氨酸变成亮氨酸，位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质不但保留的功能，而且具有了酶的催化活性。

回答下列问题。

从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的进行改造。

以基因序列为基础，获得基因的途径有修饰基因或合成基因。

所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括的复制以及遗传信息在不同分子之间的流动，即。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过和，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四答案氨基酸序列或结构其他合理答案也可和或遗传物质蛋白质或转录逆转录翻译设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能解析由题干信息可知，改造蛋白质的功能可通过改变蛋白质的结构实现。

依据蛋白质工程的定义及题中信息可知，获得基因的途径有修饰现有基因或合成新基因。

中心法则的全部内容包括的复制的复制转录逆转录和翻译。

蛋白质工程的基本途径从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相应的脱氧核苷酸序列。

通过蛋白质工程合成的蛋白质还需要进行生物活性的鉴定即功能鉴定，看是否达到人们的需求。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四对应训练现代生物技术并不是各自的，而是相互联系相互渗透的。

下图表示利用乳腺生物反应器生产种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四该生产流程中应用到的现代生物技术有。

图中分别表示。

为提高培育成功率，进行过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行检测，对受体动物的处理是用进行同期发情处理。

考点考点二考点三自主梳理核心突破典题试做考点四答案蛋白质工程基因工程胚胎移植技术推测应有的氨基酸序列基因表达载体核酸分子杂交促性腺激素解析由图分析知该生产流程中应用到的现代生物技术有蛋白质工程基因工程胚胎移植技术等。

图中分别表示推测应有的氨基酸序列基因表达载体。

为提高培育成功率，进行过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行分子杂交，对受体动物的处理是用促性腺激素进行同期发情处理。

考点考点二自主梳理核心突破考点三典题试做考点四考点四生物技术的安全性转基因生物的安全性问题在转基因植物的安全性方面，除了要考虑转基因植物的食用安全问题外，还需要考虑其对生态系统的影响。

转基因动物也存在着定的安全性问题，如转基因动物对人体健康的影响对生态系统的影响等。

考点考点二自主梳理核心突破考点三考点四生物武器的危害性许多细菌如霍乱弧菌和炭疽杆菌，病毒如埃博拉病毒和天花病毒等微生物具有强大的感染性和致病力。

当这些致病微生物被用作生物武器时，具有极大的危险性。

利用转基因技术，在些不致病的微生物体内插入致病基因，或在些致病的细菌或病毒中插入能对抗普通疫苗或药物的基因，就会培育出新的致病微生物或新的抗药性增强的致病微生物。

这些微生物可能被制造成容易储存便于携带毒性更强的生物武器。

人类基因组计划的完成也为生物武器的研制创造了条件。

典题试做考点考点二自主梳理核心突破考点三考点四判判要理性看待转基因技术，趋利避害，不能因噎废食。

我国政府对待生化武器的态度是任何情况下不发展不生产不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。

典题试做选修现代生物科技专题第单元现代生物科技专题第讲基因工程考点自主梳理核心突破典题试做考点四考点二考点三考点基因工程的概念及基本工具概念操作环境体外操作水平分子水平，又叫重组技术原理基因重组优点定向改造生物性状考点自主梳理核心突破典题试做考点四考点二考点三基因工程的基本工具限制性核酸内切酶限制酶来