【医学PPT课件】第04章紫外-可见分光光度计临床检验仪器学教学课件㊣精品文档值得下载

的吸收光谱，因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的构含量和纯度，这就是吸收光谱分析法的理论基础。

光的吸收定律朗伯比尔定律当用束单色光照射吸收溶液时，其吸光度与液层厚度及溶液浓度的乘积成正比。

紫外可见分光光度计的工作原理朗伯比尔定律入射光强度液层厚度透光度吸光系数溶液浓度透射光强度吸光度紫外可见分光光度计的工作原理朗伯比尔定律适用的条件是入射光为单色光。

波长范围越大，单色光纯度越低，对朗伯比耳定律的偏离就越大。

溶液浓度不能过大。

在定浓度范围内的溶液中，邻近分子的存在并不改变每给定分子的特性，即分子间互不干扰。

当溶液浓度很大时，由于溶液分子的相互干扰，该定律不再成立。

二紫外可见分光光度计的基本结构光源单色器吸收池检测器显示系统二紫外可见分光光度计的基本结构光源提供入射光的装置。

不同类型的分光光度计根据需要配有不同的光源，但对光源有两个基本要求在所需波长范围的光谱区域内发射连续光谱有足够的辐射强度并能长时间稳定。

二紫外可见分光光度计的液，只用个待测溶液，能较好的解决由于非特征吸收信号影响而带来的误差，大大提高检测的准确度。

双波长分光光度计结构示意图第三节紫外可见分光光度计的性能指标及准确性影响因素性能指标波长准确度和波长重复性二光度准确度三光度线性范围四分辨率五光谱带宽六杂散光七基线稳定度八基线平直度波长准确度和波长重复性波长准确度也叫波长精度，是指仪器波长指示器上所指示的波长值与仪器实际输出的波长值之间的符合程度。

波长重复性是指在对同个吸收带或发射线进行多次测量时，峰值波长测量结果的致程度。

紫外可见分光光度计的性能指标二光度准确度是指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。

该偏差越小，光度准确度越高。

三光度线性范围是指仪器光度测量系统对于照射到接收器上的辐射功率与系统的测定值之间符合线性关系的功率范围，即仪器的最佳工作范围。

紫外可见分光光度计的性能指标四分辨率分光光度计的分辨率是指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔，反映仪器分辨吸收光谱微细结构的能力，是衡量仪器性能的综合指标。

五光谱带宽是指从单色器射出的单色光最大强度的处的谱带宽度。

紫外可见分光光度计的性能指标六杂散光除所需波长单色光以外其余所有的光都是杂散光，杂散光是测量过程中的主要误差来源，会严重影响检测准确度。

七基线稳定度基线稳定度是指在不放置样品的情况下，扫描或时读数偏离的程度。

八基线平直度是指在不放置样品的情况下，扫描或时基线倾斜或弯曲的程度。

紫外可见分光光度计的性能指标二影响因素单色光不纯的影响二杂散光的影响三吸收池的影响四电压检测器负高压波动的影响五仪器狭缝宽度的影响六背景吸收的影响七其它因素的影响二影响紫外可见分光光度计准确性的因素第四节紫外可见分光光度计的常见故障及排除方法故障现象故障原因排除方法接通电源后，指示灯不亮，仪器不工作电源线接触不良，保险丝坏，电路故障接好电源线，检查保险丝，更换新的保险丝不能调零即光门不能完全关闭微电流放大器损坏检修光门盖，更换放大器不能置光能量不够，光源损坏比色器架没安装到位，光门未完全打开变换灵敏度开关，调整光源更换新的光源检查比色器架子，摆正位置检修光门测光精度不准波长移位，吸收池受污染样品混浊，配制溶液不准确进行波长校正，清洗吸收池重新配制溶液噪声指标异常预热时间不够，光源老化环境振动过大，空气流速过大，样品室不正，电压低需预热分钟以上，更换光源，调换仪器运行环境。

对正样品室。

加稳压器第五节紫外可见分光光度计的应用基本分析方法定性分析二定量分析三纯度鉴定二应用实例可见光谱分析血清葡萄糖测定氧化酶法二紫外光谱分析血清丙氨酸氨基转移酶测定紫外乳酸脱氢酶法第四章紫外可见分光光度计学习要求掌握紫外可见分光光度计工作原理基本类型及其特点紫外可见分光光度计的基本结构及各部件的基本功能熟悉紫外可见分光光度计的性能指标常见故障及排除方法了解紫外可见分光光度计准确性的影响因素和应用内容提要紫外可见分光光度计的工作原理和基本结构紫外可见分光光度计的分类紫外可见分光光度计的性能指标及准确性影响因素紫外可见分光光度计的常见故障及排除方法紫外可见分光光度计的应用•分光光度计指能够从含有各种波长的混合光中将每单色光分离出来并测量其强度的仪器。

根据其使用光的波长范围不同，分光光度计又可分为紫外分光光度计可见光分光光度计红外分光光度计和全波段分光光度计。

现代常用的分光光度计通常将紫外分光光度计和可见光分光光度计合并在起，称为紫外可见分光光度计第节紫外可见分光光度计的工作原理和基本结构•吸收光谱不同的物质会吸收不同波长的光。

改变入射光的波长，并依次记录物质对不同波长光的吸收程度，就得到该物质的吸收光谱。

第节紫外可见分光光度计的工作原理和基本结构紫外可见分光光度计的工作原理每种物质都有其特定的吸收光谱，因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的构含量和纯度，这就是吸收光谱分析法的理论基础。