【医学PPT课件】第7章球菌温州医学院㊣精品文档值得下载

，采集不同的标本。

该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采取时避免病灶周围正常菌群污染。

标本直接检查•显微镜检查无菌体液如脑脊液和关节穿刺液等可直接涂片革兰染色后，显微镜检查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌，则具有重要临床价值其他体液标本查见细菌的同时伴有炎性细胞则也具有参考价值。

可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”，并进步进行分离和鉴定。

•抗原检测乳胶凝集试验测定及荚膜抗原。

•核酸检测针对耐热核酸酶可鉴定葡萄球菌，测定可以快速检出。

分离培养与鉴定•分离培养•脓液分泌物等临床标本可接种血琼脂平板•有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板•血液标本则用肉汤增菌培养基增菌后。

初步鉴定•菌落性状平板培养基上孵育后，菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实。

•鉴别试验•触酶试验阳性溶葡萄球菌素和呋喃唑酮敏感，氧化酶试验阴性可以与其他革兰阳性球菌区别。

•红霉素耐药和甘油需氧产酸可以与微球菌区别。

种的鉴定•凝固酶试验玻片法测定结合型凝固酶试管法测定分泌型凝固酶。

金黄色葡萄球菌中间型葡萄球菌呈现阳性反应。

路邓葡萄球菌产生结合型凝固酶而不分泌游离型凝固酶，因而玻片凝固酶试验阳性试管凝固酶试验阴性。

•耐热核酸酶试验大多数金黄色葡萄球菌施氏葡萄球菌中间葡萄球菌猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。

此外表皮葡萄球菌模仿葡萄球菌肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。

其他鉴定试验•磷酸酶试验吡咯烷酮芳基酰胺酶试验鸟氨酸脱羧酶试验脲酶试验半乳糖苷酶羟基丁酮酸试验新生霉素敏感试验多粘菌素耐药试验糖产酸试验是常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验。

肠毒素检测•生物学试验采用幼猫腹腔注射肉汤培养物或呕吐物，内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在。

•琼脂扩散试验或法测定用琼脂扩散试验法或放射免疫分析法检测样本中的肠毒素。

•肠毒素基因测定针对肠毒素基因设计毒素的通用引物及特异性引物，应用技术可直接进行分型测定。

第二节链球菌属•链球菌属细菌种类多，分布广，是人和些动物的寄生菌。

其中些菌种为毒力强的致病菌，另些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道消化道泌尿生殖道，还有些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌分类•群溶血性链球菌菌落直径大于•群的化脓性链球菌群群的马链球菌和似马链球菌菌落直径小于•具群抗原，统称米勒链球菌，主要分为种咽喉炎链球菌中间型链球菌和星座链球菌。

除此之外，米勒链球菌还有溶血和不溶血的细菌。

•二群溶血性链球菌又称无乳链球菌。

•三溶血性链球菌包括肺炎链球菌和草绿色链球菌群。

•四不溶血群链球菌牛链球菌二临床意义•致病因素•菌体细胞壁成分•脂磷壁酸位于细胞壁中并伸展至菌体表面，与黏附宿主细胞有关。

•蛋白是链球菌细胞壁中的表面蛋白质，具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用。

蛋白有抗原性，能刺激机体产生型特异性抗体与心肌肾小球基底膜有共同抗原成分。

侵袭性酶•链道酶也称链球菌酶，能分解黏稠脓液中具有高度黏性的，使脓汁稀薄易球基底膜发生反应，属第型变态反应由链球菌的蛋白所产生的相应抗体形成的免疫复合物沉积于肾小球基底膜，造成基底膜损伤，属于第型变态反应。

猪链球菌病•猪链球菌病主要是由几种及群链球菌引起，现已发现其荚膜抗原血清型有种以上。

大多数致病性血清型在血清型。

血清型为最常见和毒力最强的血清型。

人主要通过接触病死猪感染。

三微生物学检验•链球菌的基本特性•形态结构链球菌是直径小于的球形或卵圆形革兰阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细菌的种类及生长环境有关。

肺炎链球菌呈矛尖状，宽端相对尖端向外，成双排列，无芽胞无动力，但能形成荚膜和黏液层。

抗原结构•抗原结构复杂，主要有多糖抗原和蛋白抗原，前者位于细胞壁以此可将链球菌分类为等群，后者主要有蛋白蛋白和蛋白等。

变异性•肺炎淋球菌的和的单个突变或多个同时突变，导致对青霉素或头孢菌素的耐药。

培养特性•兼性厌氧菌，肺炎链球菌和草绿色链球菌些种需要促进其生长•营养要求高，须在培养基中加入血液血清。

最适生长温度，•血平板上形成灰白色，透明或半透明，表面光滑的小菌落不同菌种的菌落可分别形成三种溶血现象培养特性•群链球菌菌落较大，溶血环较群模糊，些群链球菌无溶血环。

•牛型链球菌则为无溶血环呈灰色菌落•液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀•肺炎链球菌因荚膜多糖使菌落呈黏液状，因产生自溶酶，在平板上培养小时后出现中心凹陷的“脐窝状”菌落。

抵抗力•本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感，除肺炎链球菌外，本菌属细菌较少引起细菌耐药性，但近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出现并在全球播散，引起高度关注。

二链球菌的临床检验程序•标本采集•咽拭子痰液脓汁和血液等标本采集后在内运送到实验室，立即进行检查和接种。

对群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集第周周妊娠妇女的阴道分泌物，置于含多粘菌素和萘啶酸选择性培养肉汤中孵育，再作分离培养。

标本直接检查•显微镜检查标本涂片革兰染色显微镜检查见链状排列革兰阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断。

•抗原检测咽拭标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌可用抗原检测荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌。

分离培养与鉴定•分离培养采用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进步鉴定。

•初代分离需用环境，孵育，观察菌落性状菌落周围呈现透明溶血环的为溶血性链球菌，菌落直径大于或小于。

草绿色溶血环的为溶血性链球菌有些菌落灰白色不出现溶血环。

初步鉴定•取分离平板上生长的菌落周围呈现溶血或不溶血的单个菌落作涂片，革兰染色镜检革兰阳性球菌，链状或短链状排列触酶试验阴性，不生长者•可确定为链球菌属细菌溶血性链球菌鉴定•群特异性抗原鉴定•根据分群的要求提取各菌落的抗原，与相应的分群血清进行凝集试验。

•与群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链菌•与群抗血清凝集并且菌落直径可确定为米勒链球菌•与群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需根据菌落大小和生化反应进步鉴定。

抗原群菌落大小菌种名化脓性链球菌米勒链球菌无乳链球菌马链球菌米勒链球菌米勒链球菌似马链球菌米勒链球菌未分群米勒链球菌杆菌肽敏感试验•群链球菌对杆菌肽几乎全部敏感。

•从临床分离的菌株中有非群链球菌如和群链球菌等也敏感。

•而其他群链球菌绝大多数对其耐药。

•可作为群链球菌的筛选试验。

有别于其他阳性的溶血性细菌猪链球菌海豚链球菌和群小菌落溶血性链球菌米勒链球菌。

试验•无乳链球菌能产生因子，它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用。

本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验非溶血链球菌鉴定菌种敏感试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验肺炎链球菌草绿色链球菌牛链球菌草绿色链球菌鉴定菌群脲酶精氨酸七叶苷甘露醇山梨醇温和链球菌群变异链球菌群唾液链球菌群米勒链球菌群第三节肠球菌属概述•肠球菌属•广泛分布在自然界，常栖居在人动物的肠道和女性生殖道•为医院感染的重要病原菌二临床意义•肠球菌广泛分布于自然环境及人和动物消化道内。

近年来，研究者在肠球菌内发现了个约包含个基因的致病片段，称为“致病岛”。

包括多种致病因子，可增强肠球菌离开人类肠道后的侵袭力，引起肠道外感染。

第章球菌温州医学院李向阳球菌•菌体形态为球形的类细菌。

临床上通常引起化脓性感染，又称化脓性球菌。

•与医学有关的革兰阳性兼性厌氧球菌有属。

本章主要介绍临床最常见的兼性厌氧球菌，包括葡萄球菌属链球菌属肠球菌属。

•革兰阴性球菌主要包括奈瑟菌属和莫拉菌属。

第节葡萄球菌属•葡萄球菌属在自然界广泛分布。

存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株可致多种化脓性感染，如疖痈脓肿菌血症等，还可引起烫伤样皮肤综合征和毒性休克综合征等疾病。

葡萄球菌属•目前有个种个亚种，引起人类疾病的重要菌有金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，头状葡萄球菌，人葡萄球菌等。

•临床常以是否产生凝固酶分为凝固酶阳性和凝固酶阴性葡萄球菌，。

•根据噬菌体分型，可分成群型。

•利用质粒大小分型血清学分型抗生素分型和细菌的或分型，用来研究细菌的致病性耐药性流行病学特点和细菌鉴别的关系。

•该属细菌为。

二临床意义•致病因素•酶类凝固酶耐热核酸酶透明质酸酶磷脂酶•毒素葡萄球菌溶素肠毒素毒性休克综合征毒素杀白细胞素表皮剥脱毒素凝固酶•葡萄球菌属产生种血浆凝固酶•结合凝固酶或聚集因子，是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集•游离凝固酶，是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同因子激活形成复合物，再使纤维蛋白原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固保护病原菌不被吞噬或免受抗体等的作用。

二所致疾病•化脓性疾病皮肤化脓性感染各种器官的化脓性感染全身感染•毒素性疾病食物中毒烫伤样皮肤综合征毒素性休克综合征假膜性肠炎•医院感染三微生物学检验•葡萄球菌的基本特性•形态结构抗原成分•葡萄球菌蛋白，位于菌体表面，存在于菌细胞壁的种表面蛋白。

可与的段结合，应用于协同凝集试验。

蛋白有抗吞噬作用，还有激活补体替代途等活性。

是完全抗原，具属特异性。

•多糖抗原具有群特异性，细胞壁中的磷壁酸包含的乙酰葡胺核糖醇残基为群多糖抗原乙酰区糖胺甘油残基为群多糖抗原。

•荚膜抗原几乎所有金黄色葡萄球菌菌株的表面有荚膜多糖抗原的存在。

表皮葡萄球菌仅个别菌株有此抗原。

变异性•细菌细胞壁缺陷型受抑制破坏细胞壁药物或外界因素作用，可以形成细胞壁缺陷型细菌，在高渗环境中生存。

•耐药性变异部分菌株通过获得外源性的而产生青霉素结合蛋白，导致对所有内酰胺类抗生素耐药。

培养特性•兼性厌氧菌，有氧条件下生长较厌氧条件迅速和旺盛•对营养要求不高，最适生长温度，最适。

•普通培养基上形成直径不透明的圆形凸起菌落。

产生金黄色白色柠檬色等非水溶性色素附着在菌落上。