1、目前常用的方法有逆转录实验核酸序列扩增实验分支杂交实验等，这几种进口试剂盒的最低检测限为拷贝毫升•按照仪器读数报告结果，应注明使用的试验方法样品种类和样品量•测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平。注意低于最低检测限的结果不能排除感染。•应附上仪器打印的数据核酸检测样品的采集和处理•用于核酸检测的样品有全血血浆组织和其他分泌物，有时还包括生物制品•采集样品应避免微生第代病毒裂解液抗体抗体第二代病毒裂解液重组抗原合成肽抗体抗体第三代病毒裂解液重组抗原合成肽抗体病毒裂解液重组抗原合成肽第四代病毒裂解液重组抗原合成肽抗体抗原病毒裂解液重组抗原合成肽抗体第二代试剂检测抗体，第三代试剂检测抗体,第四代试剂同时检测抗体和抗原使窗口期缩短。抗体诊断结果报告和。
2、药性的测定•随着治疗的广泛开展，病毒变异和耐药株正在不断出现，甚至对个药物的耐药可引起多种药物的交叉耐药。•因此近年来各国相继建立起病毒变异和耐药的测试方法，包括基因型耐药测试和表型耐药测试。基因型耐药性测试方法•当病毒对些药物产生耐药性时，病毒基因会发生些明确的突变。病毒耐药基因型的检测有助于预测些药物的治疗效果。•检查从病人血液标本中分离到的基因物质，应用核酸酸序列分析或杂交技术以确定病毒变异的位点，并可参考已有数据库按不同亚型进行比较。在确认变异后，与既往耐药或交叉耐药研究比较，间接地估计药物耐药情况，•简单快速，费用低。•缺点是能确认所分离到的基因变异，但无法指出药物耐药的程度。中国医科大学尚红第章反转录病毒艾滋病概述•获得性免疫缺陷综合征，简。
3、体，第二受体基因在不同人种中遗传的突变率有明显差异。缺乏第二受体表达的个体似乎对有定的抗性。致病机制进入的其他方式•病毒细胞融合型与型•半乳糖苷神经酰胺受体途径•相关分子，淋巴细胞功能相关抗原，和补体受体介导途径。致病机制复制周期吸附和穿入脱衣壳和逆转录环化整合转录翻译与装配病毒体成熟出芽致病机制人体变化•体内播散期天达淋巴结，天入血循环全身播散。•原发感染期般周•血清转换期•无症状感染期•艾滋病前期•艾滋病期•艾滋病晚期致病机制临床结局•典型进展者年内，免疫功能逐渐下降。•快速进展者细胞计数在年内迅速下降•长期存活者长期不进展者维持健康状态年以上，并且细胞计数维持正常。病毒载量低，株，抗体不加重感染，型细胞因子，细胞抗病毒反应很强。细胞临床阶段无症状。
4、酶将大片断蛋白切小整和酶将原病毒插入宿主细胞中核心膜蛋白,•包膜脂质膜“借用”宿主细胞的细胞膜病毒的膜蛋白，与被感染细胞相结合部分病毒的膜蛋白，跨脂质膜的部分生物学特性基因结构•由两条单链组成，每个基因组约为，编码个基因•中含有个结构基因和，种调控基因,•基因编码病毒的核心蛋白•基因编码病毒复制所需要的酶类逆转录酶整合酶和蛋白酶•基因所编码病毒包膜蛋白，是免疫学诊断的主要检测抗原•调控基因编码辅助蛋白，调节病毒蛋白合成和复制生物学特性临床意义•结构成分与病毒感染临床诊断药物试剂和疫苗研究密切相关•包膜糖蛋白是病毒进入细胞的门户•针对各种病毒抗原等产生的抗体是临床诊断的重要物质基础生物学特性对病程的影响•病毒与宿主之间的相互作用是决定病程进展的关键因素。。
5、康状态年以上，并且细胞计数维持正常。病毒载量低，株，抗体不加重感染，型细胞因子，细胞抗病毒反应很强。细胞临床阶段无症状或急性感染或持续性全身淋巴结肿大出现症状，不是或艾滋病指针性症状及青少年艾滋病分期标准，美国，年和或出现艾滋病指针性症状如卡氏肺囊虫肺炎等时，就可定义为进入艾滋病期。如表中期。检测•直接检测病毒或其组成部分•检测人体免疫反应特异性抗体从感染到血清抗体阳转有段窗口期，平均为个月，有小部分感染者出现延迟反应抗原测定适用范围•抗体不确定或窗口期的辅助诊断•阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断•第四代抗原抗体试剂检测呈阳性反应，但抗体确认阴性者的诊断•监测病程进展和抗病毒治疗效果抗原测定结果报告和解释•抗原的阳性结果必须经过中和试验确认•抗原阳性仅作为感。
6、艾滋病，•由种名为“人类免疫缺陷病毒”,所导致的疾病。•主要侵袭辅助淋巴细胞，破坏免疫系统，最终使患者免疫功能衰竭而死亡。•传染性强，死亡率高，号称“超级癌症”的发现国际病毒分类委员会西非的分型及其亚型•现有两型和，•种类组,组组•特点有相对优势亚型同亚型差异很大亚型内的变异水平估算存在时间不同亚型传播途径和致病性不不同亚型对抗药物引起耐药不同亚型重组生物学特性•反转录病毒科，慢病毒属，人类免疫缺陷病毒组•根据病毒的生物学特性对进行分群病毒与宿主细胞结合所利用的辅助受体的不同毒株利用毒株利用根据宿主范围非合胞体诱导株合胞体诱导株复制特性不同毒力株快高型无毒力株低慢型生物学特性结构•病毒呈球形，直径，电镜下可见致密的圆锥状核心•核心个逆转录酶将转录成蛋白。
7、理•阴性反应出具抗体阴性报告•如果近期有高危行为，如性乱注射毒品等，或有急性流感样症状等情况，为排除“窗口期”的可能，可以进行抗原或核酸检测，或个月以后再做抗体检测•筛查实验呈阳性发现反应，可出具“抗体待复查”的报告，不能出阳性报告样本初筛检测阴阳均阳性反应阴性报告送确认重复检测阴性报告均阴性反应阳性反应原有试剂另种原理初筛试剂选用初筛试剂阴性反应抗体初筛检测流程图抗体诊断快速诊断试剂•采用乳胶凝集免疫斑点和免疫层析三种原理•快速不需特殊仪器•敏感度特异度低于，且价格贵•适用于血站覆盖不到的边远地区城市大医院急诊手术前检查•快速诊断阳性结果还需经方法验证阳性结果阴性结果抗体诊断快速诊断试剂阳性结果可出现患者带和质控带两条带，阴性结果只出现质控带条带抗体。
8、诊断抗体确认常用的确认实验方法是免疫印迹法免疫印迹试剂有混合型和单型，般先用混合型试剂进行检测抗体诊断蛋白印迹实验•广泛使用的确认实验•用聚丙烯酰胺凝胶电泳将纯化的抗原蛋白分开后转移到硝酸纤维膜上•标本的抗体与条带上的抗原结合，再加入酶偶联的抗人抗体和底物，在抗原抗体结合的部位会出现有色条带•可检测标本中针对不同抗原的抗体，故被用做确认试剂•不同的研究机构有不同的判定标准抗体诊断结果判定标准组织阳性阴性无条带或只有无条带或无特异性条带“不确定”出现特异性条带，但带型不足以确认阳性，每三个月随访次，共两次，仍属可疑，判为阴性抗体确认实验结果强阳性对照和弱阳性对照阴性对照典型的血清阳性反应血清对照特异带初筛检测阳性标本两种初筛试剂阴性报告阴性报告阴性反。
9、通过与靶细胞表面分子和趋化因子受体结合致病机制关于第二受体•与有关的辅助受体有类型辅助受体型辅助受体•是最主要的第二受体，第二受体基因在不同人种中遗传的突变率有明显差异。缺乏第二受体表达的个体似乎对有定的抗性。致病机制进入的其他方式•病毒细胞融合型与型•半乳糖苷神经酰胺受体途径•相关分子，淋巴细胞功能相关抗原，和补体受体介导途径。致病机制复制周期吸附和穿入脱衣壳和逆转录环化整合转录翻译与装配病毒体成熟出芽致病机制人体变化•体内播散期天达淋巴结，天入血循环全身播散。•原发感染期般周•血清转换期•无症状感染期•艾滋病前期•艾滋病期•艾滋病晚期致病机制临床结局•典型进展者年内，免疫功能逐渐下降。•快速进展者细胞计数在年内迅速下降•长期存活者长期不进展者维持健。
10、染的辅助诊断依据，不能依此确诊•抗原阴性结果只表示在本试验中无反应，不能排除感染核酸检测•窗口期辅助诊断•病程监控•指导治疗方案及疗效评价•预测疾病进程血浆病毒载量拷备数毫升年发病率核酸检测定性检测•用于感染的辅助诊断。通常使用或技术，使用分子生物学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献或自行设计，应尽量涵盖所有的或常见的毒株，也可使用复合引物。•通常根据扩增产物的电泳图像判定结果，阳性结果还要进行核酸序列测定来确定。•核酸检测阴性,只可报告本次实验结果阴性，不可排除感染。•核酸检测阳性,可作为诊断感染的辅助指标，不单独用于感染的诊断。•报告核酸定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。核酸检测定量检测•常用于监测感染者的病程进展和抗病毒治疗效果。。
11、型早期，进展慢，受体型晚期，进展快，受体的感染性•对外界抵抗力较弱•对热干燥敏感,•不耐酸，稍耐碱•对化学品敏感次氯酸钠酒精漂白粉戊二醛福尔马林等•对紫外线不敏感•注射器具医疗用具通过高温消毒煮沸或蒸汽消毒完全可以达到消毒目的传播途径•性途径同性恋异性恋双性恋共用性模拟器•血液途径输血或血液制品受精液或卵子与他人共用针具静肌注毒品意外损伤后接触感染性材料•母婴垂直传播妊娠生产母乳喂养致病机制高速复制•每天产生亿个新病毒颗粒•变异每天突变万个逆转录酶缺乏外切核酸的校读功能，使转录为时经常出现错误。比真核细胞高万倍。致病机制进入易感细胞途径通过与靶细胞表面分子和趋化因子受体结合致病机制关于第二受体•与有关的辅助受体有类型辅助受体型辅助受体•是最主要的第二受。
12、应阴阳阳性反应免疫印迹法混合型复核报告血清学阳性反应,必要时测核酸阴性反应可疑反应阳性反应免疫印迹法阴性报告出现阴性反应可疑反应阳性报告阳性反应每三个月随访次，共两次，仍属可疑，判为阴性抗体确认实验流程图细胞绝对数量有效治疗周后淋巴细胞数量增加无效细胞数量下降淋巴细胞介导的免疫功能逐渐丧失丧失必要的体内环境，功能下降感染淋巴细胞小于结合病毒载量，确定治疗时机细胞绝对数量感染通过多种直接和间接的病理机制，导致数量的缺失。淋巴细胞是感染最主要的靶细胞，其数量和功能的下降是感染引起人体免疫功能缺陷的主要体现。外周血中淋巴细胞的数量对于确定感染状态是否进入期机会性感染及肿瘤发病的可能性以及评价治疗效果具有极其重要的作用。结果回报单绝对计数结果病毒变异和耐。
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【医学PPT课件】第29章 反转录病毒 中国医科大学尚红