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PCR基因扩增仪【40页医学PPT课件】

件下引物同模板杂交,在聚合酶和合适缓冲液存在条件下延伸引物,重复“变性退火引物延伸”过程至个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。第节基因扩增仪的工作原理的基本原理第节基因扩增仪的工作原理二基因扩增仪的工作原理从反应基本原理可以看出,基因扩增仪工作关键是温度控制。第节基因扩增仪的工作原理仪温度控制水浴锅控温压缩机控温半导体控温离心式空气加热控温第二节扩增仪的分类与结构扩增仪的种类普通扩增仪实时荧光定量扩增仪梯度仪原位仪第二节扩增仪的分类与结构荧光实时定量,技术在反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实地反映了体系中模板的增加,通过检测荧光信号,从而实时监测整个反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。第二节扩增仪的分类与结构实时荧光定量仪金属板式实时定量仪离心式实时定量仪各孔控温的定量仪第二节扩增仪的分类与结构金温度均性好,无边缘效应。体积大,自动化程度不高,需人为干预,更换水浴锅时控温不稳定。第节基因扩增仪的工作原理由压缩机自动控温,金属导热,控温较水浴锅方便,台机器便可完成整个流程。压缩机故障率高,边缘效应及温度现象严重。升温过程中,由于些加热元件,比如半导体金属块本身会积蓄能量,虽然温度探头探测温度到达了设定温度,但半导体金属块上积蓄的能量仍然会传给体系,造成实际的温度高于设定的温度,即。第节基因扩增仪的工作原理由半导体自动控温,金属导热,控温方便,体积小,相对稳定性好。仍有边缘效应,温度均性尚有欠缺,各孔扩增效率可能不致,并且仍存在温度现象。第节基因扩增仪的工作原理由金属线圈加热,采用空气作为导热媒介,温度均性好,各孔扩增效率高度致满足荧光定量的高要求,直接发展为离心式的定量仪。第二节扩增仪的分类与结构普通定性扩增仪水浴式仪由三个不同温度的水浴槽和机械臂组成。变温金属块式仪中心是由铝块或不锈钢制成的热槽,上有不同数目甚至不同规格的凹孔,用来放置样品管。变温气流式仪由机壳热源冷空气泵控制器及辅助元件等组成。第二节扩增仪的分类与结构梯度仪由普通仪衍生出的带梯度功能的基因扩增仪。每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,步就可以摸索出最适反应条件。使用梯度仪,多次实验可在台仪器上完成,既节省实验时间,提高实验效率,又节约实验成本。第二节扩增仪的分类与结构原位仪由普通仪衍生出的带原位扩增功能的基因扩增仪。其样品基座上有若干平行的铝槽,每条铝槽内可垂直放置张载玻片,每张载玻片面均与铝槽紧密接触,温度传导极佳,控温很精确。配有支持原位模块的仪可以机两用,比较经济。第三节扩增仪的性能指标操作规程及常见故障的排除温度的准确性指样品孔温度与设定温度的致性。对扩增仪而言温度控制就意味着质量。第三节扩增仪的性能指标操作规程及常见故障的排除温度的均性指样品孔间的温度差异,关系到不同样品孔之间反应结果的致性。“位置的边缘效应”会影响结果的可重复性。第三节扩增仪的性能指标操作规程及常见故障的排除升降温的速度升降温速度快,可以提高工作效率,提高反应特异性。样品管与基座接触的紧密性基座的导热性邻近样品管的相互影响都会影响样品的实际升降温速度。第三节扩增仪的性能指标操作规程及常见故障的排除不同模式下的相同温度特性带梯度功能的仪,应考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。现有专利技术,能以同样的温度变化速率到达所有设定的梯度温度。第十七章基因扩增仪内容提要基因扩增仪的工作原理技术的原理及发展基因扩增仪的工作原理扩增仪的分类与结构定性扩增仪实时荧光定量扩增仪内容提要扩增仪的性能指标操作规程及常见故障的排除扩增仪的性能指标扩增仪的操作规程扩增仪常见故障的排除扩增仪的应用教学基本要求掌握基因扩增仪的工作原理和主要性能指标。掌握梯度仪和原位仪的功能和特点。掌握实时荧光定量扩增仪的种类金属板式实时定量仪和离心式实时定量仪的特点。熟悉技术的原理扩增仪的种类荧光实时定量技术原理。了解扩增仪的操作规程扩增仪常见故障的排除扩增仪的应用。第节基因扩增仪的工作原理技术的发展及原理年,等人首次在文章中准确客观地阐述了方法。年,美国公司的等人发明技术。第节基因扩增仪的工作原理技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板杂交,在聚合酶和合适缓冲液存在条件下延伸引物,重复“变性退火引物延伸”过程至个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。第节基因扩增仪的工作原理的基本原理第节基因扩增仪的工作原理二基因扩增仪的工作原理从反应基本原理可以看出,基因扩增仪工作关键是温度控制。第节基因扩增仪的工作原理仪温度控制水浴锅控温压缩机控温半导体控温离心式空气加热控温第二节扩增仪的分类与结构扩增仪的种类普通扩增仪实时荧光定量扩增仪梯度仪原位仪第二节扩增仪的分类与结构荧光实时定量,技术在反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实地反映了体系中模板的增加,通过检测荧光信号,从而实时监测整个反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。第二节扩增仪的分类与结构实时荧光定量仪金属板式实时定量仪离心式实时定量仪各孔控温的定量仪第二节扩增仪的分类与结构金属板式实时定量仪可作为普通仪使用可带梯度功能可容纳的样本量大,无需特殊耗材温度均性欠佳,有边缘效应,标准曲线的反应条件难以做到与样品完全致第二节扩增仪的分类与结构荧光定量仪公司荧光定量仪公司荧光定量仪第二节扩增仪的分类与结构离心式实时定量仪温度均性较好使用的是同个

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