二印迹三蛋白质的印迹用于基因组重组质粒和噬菌体的分析。用于的定性定量分析。用于蛋白质定性定量及相互作用研究。目录其他斑点印迹原位杂交点阵芯片技术三种印迹技术的比较分子杂交实验目录放射自显影照片目录点阵目录第二节聚合酶链反应目录技术的工作原理目录次循环后，模板的含量可以扩大万倍以上。目录•模板•特异性引物•耐热聚合酶••体系基本组成成分目录的基本反应步骤变性˚延伸˚退火˚目录•利用特异性引物以或基因组为模板获得已知目的基因片段,或与逆转录反应相结合，直接以组织和细胞的为模板获得目录是指将许多特定的片段有规律地紧密排列固定于单位面积的支持物上，然后与待测的荧光标记样品进行杂交，杂交后用荧光检测系统等对芯片进行扫描，通过计算机系统对每位点的荧光信号做出检测比较和分析，从而迅速得出定性和定量的结果。该技术亦被称作微阵列。基因芯片基因芯片目录基因芯片工作流程示意图目录是将高度密集排列的蛋白分子作为探针点阵固定在固相支持物上，当与待测蛋白样品反应时，可捕获样品中的靶蛋白，再经检测系统对靶蛋白进行定性和定量分析的种技术。二蛋白质芯片蛋白质分子间的亲和反应蛋白质芯片蛋白质芯片作用原理目录第六节生物大分子相互作用研究技术目录蛋白质相互作用研究技术•酵母双杂交•各种亲和分析标签蛋白沉淀免疫共沉淀等•荧光共振能量转换效应分析•噬菌体显示系统筛选常用蛋白质相互作用的研究技术目录标签融合蛋白结合实验是个基于亲和色谱原理的分析蛋白质体外直接相互作用的方法。标签蛋白沉淀标签融合蛋白结合实验主要用于证明两种蛋白分子是否存在直接物理结合分析两种分子结合的具体结构部位及筛选细胞内与融合蛋白相结合的未知分子。目录标签融合蛋白沉淀实验流程示意图目录二酵母双杂交技术的基本原理和用途目录酵母双杂交系统的应用•证明两种已知基因序列的蛋白质可以相互作用的生物信息学推测。•分析已知存在相互作用的两种蛋白质分子的的相互作用功能结构域或关键的氨基酸残基。•将拟研究的蛋白质的编码基因与基因融合成为“诱饵”表达质粒，可以筛选基因融合的“猎物”基因表达文库，筛选未知的相互作用蛋白质。目录电泳迁移率变动测定，或称凝胶迁移变动实验最初用于研究结合蛋白与相应序列间的相互作用，可用于定性和定量分析，已经成为转录因子研究的经典方法。目前这技术也被用于研究结合蛋白和特定序列间的相互作用。二蛋白质相互作用分子分析技术电泳迁移率变动测定目录放射自显影未结合探针结合有蛋白的探针标记探针核蛋白提取物未标记探针凝胶迁移实验结果示意图目录染色质免疫沉淀技术,是目前可以研究体内与蛋白质相互作用的主要方法。二染色质免疫沉淀法目录染色质免疫沉淀实验流程及结果示意图目录遗传修饰动物模型的建立及应用第七节目录常用分子生物学技术的原理及应用第章目录第节分子杂交与印迹技术目录核酸分子杂交在复性过程中，如果把不同单链分子放在同溶液中，或把与放在起，只要在或的单链分子之间有定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂化双链。分子杂交与印迹技术的原理目录复性目录印迹技术利用各种物理方法使电泳胶中的生物大分子转移到等各种膜上，使之成为固相化分子。这技术类似于用吸墨纸吸收纸张上的墨迹，因此称之为，译为印迹技术。目录用放射性核素生物素或荧光染料标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为“探针”，探针可以与固定在膜上的核苷酸结合，判断是否有同源的核酸分子存在。二探针技术目录二印迹技术的类别及应用印迹二印迹三蛋白质的印迹用于基因组重组质粒和噬菌体的分析。用于的定性定量分析。用于蛋白质定性定量及相互作用研究。目录其他斑点印迹原位杂交点阵芯片技术三种印迹技术的比较分子杂交实验目录放射自显影照片目录点阵目录第二节聚合酶链反应目录技术的工作原理目录次循环后，模板的含量可以扩大万倍以上。目录•模板•特异性引物•耐热聚合酶••体系基本组成成分目录的基本反应步骤变性˚延伸˚退火˚目录•利用特异性引物以或基因组为模板获得已知目的基因片段,或与逆转录反应相结合，直接以组织和细胞的为模板获得目的片段•利用简并引物从文库或基因组文库中获得序列相似的基因片段•利用随机引物从文库或基因组文库中克隆基因。二技术的主要用途目的基因的克隆目录利用技术可以随意设计引物在体外对目的基因片段进行嵌和缺失点突变等改造。技术高度敏感，对模板的量要求很低，是和微量分析的最好方法。三和的微量分析二基因突变