可以原样地切离出来，也可以把邻近的宿主在切离时带走部分。

后者称转导。

•带有宿主的噬菌体称转导噬菌体。

•来源于宿主的基因称转导基因。

转位•转位个或组基因从处转到基因组的另个位置。

•这些游动的基因称为转位子。

转位第二节基因工程•基因工程是用分离纯化或人工合成的在体外与载体结合，成为重组，用以转化宿主，筛选出能表达重组的活细胞，加以纯化传代扩增，成为克隆。

也叫基因克隆或重组技术。

•分子水平上操作，细胞水平上表达。

•赋予重组以新的生命力。

基因工程肿瘤细胞的转移与细胞表面的糖链类型有关，而后者又与糖基转移酶的表达相关。

已经证实Ⅴ与转移有关。

转入Ⅴ基因肝癌细胞株观察其迁移侵袭粘附等生物学行为转入反义Ⅴ基因转移转移基因克隆分切接转筛载体和目的基因•载体在宿主细胞内可复制的补的二段核酸链。

•连接方式粘端连接方式尾接法粘端连接尾接法重组体的转化•基因的转移重组体进入宿主细胞的过程，已开发了很多方法。

•化学法转移法碱金属离子转移法•物理法显微注射法基因枪法电穿孔法•生物学法逆转录病毒载体腺病毒载体重组体的转化•转化重组载体导入宿主后，利用宿主的酶系统表达的过程。

即改变宿主性状的过程。

基因工程的表达体系的发展载体宿主第代质粒噬菌体细菌第二代穿梭质粒酵母第三代动植物病毒昆虫载体组织培养细胞第四代直接导入生殖细胞重组体的筛选与鉴定•根据重组载体的表型进行筛选如质粒的抗药性营养素的依赖型•限制酶切图谱分析提取经粗选后的宿主，用限制性内切酶切割后与原来载体比较。

•利用核酸杂交和放射自显影进行鉴定用目的基因作探针监测宿主是否重组体。

重组体的筛选与鉴定•灭活法筛选重组体。

提取转化细胞限制性内切酶琼脂糖凝胶电泳与原来载体及重组体比较重组体的筛选与鉴定重组体的筛选与鉴定菌落硝酸纤维素滤膜探针线底片显影平板基因工程策略第三节基因工程的应用•生命科学研究趋势•基因诊断和基因治疗•基因工程产品的开发和应用生命科学研究趋势•基因的结构与功能研究•基因表达的调控•各种生物大分子之间的识别及结合•了解生命的奥秘基因诊断和基因治疗基因工程产品的开发和应用•基因工程疫苗安全廉价乙肝疫苗甲肝疫苗巨细胞病毒流行性出血热轮状病毒•基因工程生产激素类胰岛素生长激素•细胞因子生长因子肿瘤坏死因子造血因子干扰素第五节聚合酶链反应•聚合酶链反应•耐热细菌聚合酶能耐高温，在有很高的催化力。

•原理以目的为模板，快速合成大量的，用于检测制备研究。

第五节聚合酶链反应•变性•引物粘合•引物延伸第十四章基因重组与基因工程基因重组重组第节自然界的基因重组•转化•整合•转导•转位转化•转化由外来引起生物类型改变的过程称为转化。

细菌的转化转化•病毒癌基因感染宿主细胞后，可整合到宿主染色体上，从而使宿主细胞癌变。

转染噬菌体感染宿主菌后，核酸进入菌体内的过程。

细胞的转化整合•整合噬菌体感染大肠杆菌的第步噬菌体粘附于细胞壁上，将自身的注入菌体中。

此可与细菌染色体重组，成为细菌染色体的部分。

•溶原菌整合了噬菌体基因组的细菌。

•裂解噬菌体感染大肠杆菌的第二步利用菌体的酶系统，复制自身及外壳蛋白，组装成大量新噬菌体，并将细菌涨破。

整合•溶原和裂解可以相互转变。

转导•溶原菌中可以原样地切离出来，也可以把邻近的宿主在切离时带走部分。

后者称转导。

•带有宿主的噬菌体称转导噬菌体。

•来源于宿主的基因称转导基因。

转位•转位个或组基因从处转到基因组的另个位置。

•这些游动的基因称为转位子。

转位第二节基因工程•基因工程是用分离纯化或人工合成的在体外与载体结合，成为重组，用以转化宿主，筛选出能表达重组的活细胞，加以纯化传代扩增，成为克隆。

也叫基因克隆或重组技术。

•分子水平上操作，细胞水平上表达。

•赋予重组以新的生命力。

基因工程肿瘤细胞的转移与细胞表面的糖链类型有关，而后者又与糖基转移酶的表达相关。

已经证实Ⅴ与转移有关。

转入Ⅴ基因肝癌细胞株观察其迁移侵袭粘附等生物学行为转入反义Ⅴ基因转移转移基因克隆分切接转筛载体和目的基因•载体在宿主