的个体相同分化程度的细胞群获得克隆动物应用植株快速繁殖脱毒作物苗的培养人工种子细胞产物工厂化生产转基因植物的培育生产生物制品医学研究检测有毒物质加速良种繁育保护濒危物种生产医用蛋白作为异种移植的供体用于组织器官的移植动物细胞核移植的疑难解析卵母细胞选择时期及原因Ⅱ中期的卵母细胞，此时具备受精能力，细胞质中合成与分裂分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。选卵细胞作为受体细胞的原因。卵细胞大，易于操作。卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。能激发重组细胞分裂分化。供体细胞取供体动物的体细胞培养，般选用传代代以内的细胞，因为代以内的细胞般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体的原因动物体细胞的全能性受到限制。该过程用到的技术手段动物细胞培养动物细胞融合早期胚胎培养和胚胎移植。高考警示动物细胞培养和核移植技术的理解误区动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同第次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞，第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本可能不同。克隆动物细胞质基因来源于另个亲本，与植物组织培养不同来自个亲本，即克隆动物遗传物质来自两个亲本。在发育过程中可能发生基因突变染色体变异导致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。考题回访银川模拟回答下列有关动物细胞培养的问题在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，常用的酶是。随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，这种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质糖蛋白的量。用种大分子染料对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是。检查种有毒物质是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂到期的细胞用显微镜进行观察。在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤当作进行攻击。解题指南解答本题需明确三个方面细胞贴壁生长与接触抑制。胰蛋白酶和糖蛋白的作用。器官移植与排斥反应。解析在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象，此时是单层细胞。用胰蛋白酶处理可以使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来。随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞，这种细胞细胞膜表面糖蛋白减少，细胞黏着性降低。由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色。由于细胞分裂中期染色体形态固定数目清晰，因此最好选用分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。由于在冷冻超低温或液氮条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低，通常在此条件下保存细胞。聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外，也可用灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合相同点原生质体融合原理相同，原生质体融合的方法相似单克隆抗体的制备高考警示植物体细胞杂交和动物细胞融合过程中所选酶和结果的辨析植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶作用于细胞间的蛋白质。植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞的全能性不能表达。取相应淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆抗体。考题回访新课标全国卷Ⅰ研究者用抗原分别免疫只同种小鼠和，每只小鼠免疫次，每次免疫周后测定各小鼠血清抗体的效价能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数，结果如图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的淋巴细胞染色体数目条，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞染色体数目条按定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题制备融合所需的淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到以上，则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的这只免疫小鼠中，最适合用于制备淋巴细胞的是小鼠，理由是。细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有，体系中出现多种类型细胞的原因是。杂交瘤细胞中有个细胞核，染色体数目最多是条。未融合的淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是。解题指南题干关键词“效价”“杂交瘤细胞”“传代培养”。隐含信息柱形图中效价越高，能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数越大，说明免疫后小鼠的淋巴细胞产生抗体的能力越强。关键知识制备单克隆抗体的技术流程和动物细胞体外培养的过程。解析本题考查制备单克隆抗体的相关知识。据图中数据分析，第四次注射后小鼠的血清抗体效价均达到以上，免疫后小鼠的淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体。淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在起融合时，可能发生淋巴细胞之间的融合，骨髓瘤细胞之间的融合和淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，故体系中会出现多种类型的细胞。杂交瘤细胞形成后，小鼠的淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成个细胞核。染色体可达条，有丝分裂后期染色体数目最多为条。未融合的淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，分裂次数是有限的。答案四小鼠的抗体效价最高淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，没有特异性且融合率达不到不能无限增殖潍坊模拟人绒毛膜促性腺激素是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的种糖蛋白，制备抗单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题。制备单克隆抗体过程中要用到和技术。制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的相当于，使小鼠产生分泌相应的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的免疫。在细胞内的合成般有两条途径，主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶的催化作用合成，而骨髓瘤细胞的合成没有此辅助途径。利用合成途径不同的特点配制的培养基含有多种成分，其中添加的具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是。此过程生产的单克隆抗体可以与特异性结合，从而诊断早孕。解题指南解答本题的关键明确单克隆抗体的制备过程。熟知在培养基中能够生长增殖的细胞是具有复制途径的细胞。解析制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。给小鼠注射，使小鼠进行体液免疫，产生能分泌抗体的淋巴细胞。骨髓瘤细胞的合成只有条途径，在培养基中加入氨基嘌呤，阻断了骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合体的增殖。杂交瘤细胞有两条合成的途径，因此在选择培养基上杂交瘤细胞能生存并无限增殖。淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单抗体。此单克隆抗体是针对人绒毛膜促性腺激素作抗原产生的，可以与人绒毛膜促性腺激素特异性结合。动物细胞工程考纲考情三年考高考指数动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ细胞融合与单克隆抗体Ⅱ三年考题年考新课标全国卷Ⅰ，浙江，福建年考山东，江苏，福建，浙江，海南，重庆年考山东，江苏，广东，福建，浙江，安徽考情播报考查内容主要是动物细胞培养细胞融合和单克隆抗体的制备及应用。考查方式单独考查动物细胞融合和动物细胞培养技术常结合制备单克隆抗体过程考查原理的应用，还可与基因工程和胚胎工程综合考查。考查题型以非选择题为主，属中档题。知识梳理动物细胞培养操作流程组织单个细胞的悬浮液培养培养原代传代培养条件无菌无毒的环境对和所有培养用具进行无菌处理，添加，定期更换培养液以。营养除正常的有机和无机营养外，加入等些天然成分。适宜的温度和温度为哺乳动物，为。气体环境含空气加的混合气体，其中后者的作用是。应用生物制品的生产，检测，医学研究。培养液抗生素清除代谢产物血清血浆维持培养液的有毒物质二动物体细胞核移植技术和克隆动物动物核移植将动物个细胞的移入个已经去掉细胞核的中，使其重组并发育成个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为。细胞核卵母细胞动物个体过程原理动物体细胞核具有。结果获得与供体基本相同的个体。克隆动物用核移植方法得到的动物。全能性供体细胞培养遗传物质去核重组细胞胚胎移植供体三动物细胞融合原理。融合方法聚乙二醇电激等。意义突破了的局限，使成为可能，也为制造开辟了新途径。细胞膜的流动性灭活的病毒有性杂交方法远缘杂交单克隆抗体四单克隆抗体制备过程杂交瘤细胞能分泌所需抗体优点特异性强，并可大量制备。用途作为，用于治疗疾病和。灵敏度高诊断试剂运载药物速记卡片动物细胞培养过程分散细胞方法组织块剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。生长特点贴壁生长接触抑制。分瓶。原代培养动物组织消化后的初次培养。传代培养分瓶继续培养。动物细胞培养的条件无菌无毒的环境。营养糖氨基酸促生长因子无机盐微量元素动物血清血浆等。温度和与动物体温相近，为。气体环境的主要作用是维持培养液的。动物细胞融合原理细胞膜的流动性。融合方法聚乙二醇灭活的病毒电激等。单克隆抗体制备涉及的三种细胞作用不同。淋巴细胞能分泌单抗体，但不能无限增殖。骨髓瘤细胞能大量增殖，但不能产生抗体。杂交瘤细胞既能产生单抗体，又能大量增殖。两次筛选的目的不同。第次筛选是得到杂交瘤细胞。第二次筛选是得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。考点植物组织培养动物细胞培养和细胞核移植三者比较项目植物组织培养动物细胞培养动物体细胞核移植原理植物细胞的全能性细胞增殖动物细胞核的全能性关键环节细胞的脱分化和再分化细胞增殖和癌变细胞核融合细胞分化项目植物组织培养动物细胞培养动物体细胞核移植结果与外植体相同的个体相同分化程度的细胞群获得克隆动物应用植株快速繁殖脱毒作物苗的培养人工种子细胞产物工厂化生产转基因植物的培育生产生物制品医学研究检测有毒物质加速良种繁育保护濒危物种生产医用蛋白作为异种移植的供体用于组织器官的移植动物细胞核移植的疑难解析卵母细胞选择时期及原因Ⅱ中期的卵母细胞，此时具备受精能力，细胞质中合成与分裂分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化，形成重组胚胎。选卵细胞作为受体细胞的原因。卵细胞大，易于操作。卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。能激发重组细胞分裂分化。供体细胞取供体动物的体细胞培养，般选用传代代以内的细胞，因为代以内的细胞般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体的原因动物体细胞的全能性受到限制。该过程用到的技术手段动物细胞培养动物细胞融合早期胚胎培养和胚胎