码子位于上,分别控制翻译过程启动和终止。题组例练分类例练提炼方法海南卷下面是将细菌基因导入大肠杆菌内,制备“工程菌”示意图。据图回答获得有两条途径是以为模板,在酶催化下,合成互补单链,然后在作用下合成双链,从而获得所需基因二是根据目标蛋白质序列,推测出相应序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其序列,再通过化学方法合成所需基因。利用技术扩增时,需要在反应体系中添加有机物质有种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性聚合酶,扩增过程可以在扩增仪中完成。由和载体拼接形成通常称为。在基因工程中,常用处理,其目是。解析利用逆转录法合成目基因过程是以为模板,在逆转录酶催化作用下合成单链,然后在聚合酶作用下,合成双链分子根据蛋白质工程合成目基因过程是根据目标蛋白质氨基酶识别序列。大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述构建好表达载体后则获得了降解纤维素能力,这是因为。解析基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌基因组中,故应以该菌基因组为模板进行基因扩增。目基因与质粒进行重组时,需将目基因插入到启动子和终止子之间,且应靠近启动子和终止子,结合示意图可知,应在扩增基因两端分别引入Ⅰ和Ⅰ两种限制酶识别序列。该基因表达载体中含有基因,其可表达产生葡萄糖苷酶,其可分解纤维素,这样大肠杆菌就获得了分解纤维素能力。答案嗜热土壤芽孢杆菌ⅠⅠ转基因大肠杆菌分泌出有活性酶方法突破限制酶选择方法应选择切点位于目基因两端限制酶,如图甲可选择Ⅰ。不能选择切点位于目基因内部限制酶,如图甲不能选择Ⅰ。切割质粒时,般所选限制酶要与切割目基因限制酶致,以确保具有相同黏性末端。质粒作为载体必须具备标记基因启动子和终止子等,所以所选择限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中限制酶Ⅰ会破坏标记基因,且切割位点应位于启动子和终止子之间以利于目基因插入和表达如果所选限制酶切点不是个,则切割重组后可能丢失些片段,若丢失片段含复制原点区,则切割重组后片段进入受体细胞后不能自主复制。为避免目基因和质粒自身环化和随意连接,可使用两种不同限制酶切割目基因和质粒,如图甲可选择用Ⅰ和Ⅰ两种限制酶但要确保质粒上也有这两种限制酶切点。考点二基因工程基本操作程序及应用知识梳理自主学习夯实基础基因工程基本操作程序目基因获取基因文技中取方法利用增通化方法人工合成库术从获扩过学基因表达载体构建目基因成止子基因子组终启动标记杆菌化法花粉管通道法微植物基因法方法物技微生物感受胞法成注射枪动术农转态细显将重组分子导入受体细胞目基因检测与鉴定基因工程应用判判利用乳腺生物反应器能够获得些重要医药产品,如人血清白蛋白,这是因为将人血清白蛋白基因导入了动物乳腺细胞中基因工程药物主要来源于转基因动物生产为培育抗除草剂作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体由大肠杆菌工程菌获得人干扰素后可直接应用深挖教材基因工程操作过程中,哪些步骤中具有碱基互补配对现象提示基因工程操作过程中第二四步中均具有碱基互补配对现象,而只有第三步没有。动物基因工程中,为什么常选动物受精卵作为受体细胞提示受精卵全能性高,能使目基因在相应组织和器官中得以表达。基因工程成功标志是什么提示目基因在受体细胞中得以表达。重点透析剖析考点拓展深化目基因获取途径从基因文库中获取包括基因组文库和文库等。人工合成目基因常用方法化学合成法已知核苷酸序列较小基因,直接利用合成仪用化学方法合成,不需要模板。反转录法以为模板,在逆转录酶作用下人工合成。通过技术扩增目基因目通过指数式扩增获取大量目基因。技术与复制比较技术复制相同点原理复制碱基互补配对原料四种游离脱氧核苷酸条件模板酶原料引物等不同点解旋方式在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制扩增仪主要在细胞核内酶热稳定聚合酶酶细胞内含有聚合酶结果在短时间内形成大量片段形成整个分子基因表达载体构建基因表达载体组成及作用基因表达载体构建过程将目基因导入受体细胞生物种类植物动物微生物常用方法农杆菌转化法显微注射法感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目基因插入到质粒上农杆菌导入植物细胞整合到受体细胞表达将含有目基因表达载体提纯取卵受精卵显微注射受精卵发育获得具有新性状动物处理细胞感受态细胞重组表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收分子目基因检测与鉴定基因治疗与基因诊断基因治疗基因诊断原理基因重组及基因表达分子杂交方法将正常基因导入有基因缺陷细胞中,使该基因表达产物发挥功能,以达到治疗目制作特定探针与病人样品混合分析,根据碱基互补配对原则,分析杂交带情况进展临床实验临床应用清错破疑目基因插入位点不是随意基因表达需要启动子与终止子调控,目基因应插入启动子与终止子之间部位。启动子起始密码子,终止子终止密码子启动子和终止子位于片段上,分别控制转录过程启动和终止起始密码子和终止密码子位于上,分别控制翻译过程启动和终止。题组例练分类例练提炼方法海南卷下面是将细菌基因导入大肠杆菌内,制备“工程菌”示意图。据图回答获得有两条途径是以为模板,在酶催化下,合成互补单链,然后在作用下合成双链,从而获得所需基因二是根据目标蛋白质序列,推测出相应序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其序列,再通过化学方法合成所需基因。利用技术扩增时,需要在反应体系中添加有机物质有种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性聚合酶,扩增过程可以在扩增仪中完成。由和载体拼接形成通常称为。在基因工程中,常用处理,其目是。解析利用逆转录法合成目基因过程是以为模板,在逆转录酶催化作用下合成单链,然后在聚合酶作用下,合成双链分子根据蛋白质工程合成目基因过程是根据目标蛋白质氨基。答案逆转录聚合酶氨基酸脱氧核苷酸引物目基因或基因模板基因表达载体使其成为感受态细胞,使大肠杆菌更容易吸收重组分子在些深海鱼中发现抗冻蛋白基因对提高农作物抗寒能力有较高应用价值。如图所示是获得转基因莴苣技术流程,请据图回答下列回答获取目基因主要途径包括从自然界已有物种中分离和。过程需要酶有。重组质粒除了带有抗冻蛋白基因以外,还必须含有启动子终止子和,这样才能构成个完整基因表达载体。如果受体细胞是土壤农杆菌,则将目基因导入它目是利用农杆菌,使目基因进入受体细胞,并将其插入到受体细胞中上,使目基因遗传特性得以稳定维持和表达,形成转基因莴苣。经过程获得转基因莴苣中目基因是否表达,在分子水平上可用法进行检测,如果出现杂交带,说明目基因已经表达蛋白质产品,转基因莴苣培育成功。解析获取目基因方法主要有从自然界已有物种中分离和人工合成。过程为构建基因表达载体,需要工具酶有限制性核酸内切酶限制酶和连接酶。基因表达载体包括目基因启动子终止子和标记基因。如果受体细胞是土壤农杆菌,则该将目基因导入受体细胞方法为农杆菌转化法,利用农杆菌转化作用,将目基因导入受体细胞莴苣体细胞并将目基因插入到受体细胞染色体上。目基因是否表达出相应蛋白质,可在分子水平上利用抗原抗体杂交法进行检测。答案人工合成限制性核酸内切酶连接酶标记基因转化作用染色体抗原抗体杂交考点三蛋白质工程知识梳理自主学习夯实基础蛋白质工程概念理解基础蛋白质分子结构规律及其与生物功能关系。操作或基因合成。结果改造了现有蛋白质或制造出。目满足人类生产和生活需求。操作过程从预期出发设计预期推测应有找到相对应基因基因表达产生需要蛋白质。基因修饰新蛋白质蛋白质功能蛋白质结构氨基酸序列脱氧核苷酸序列重点透析剖析考点拓展深化蛋白质工程与基因工程比较区别项目蛋白质工程基因工程过程预期蛋白质功能设计预期蛋白质结构推测应有氨基酸序列找到相对应脱氧核苷酸序列获取目基因基因表达载体构建将目基因导入受体细胞目基因检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向改造生物遗传特性,以获得人类所需生物类型和生物产品结果可生产自然界没有蛋白质只能生产自然界已有蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程基础上,延伸出来第二代基因工程。基因工程中所利用些酶需要通过蛋白质工程进行修饰改造。题组例练分类例练提炼方法全国Ⅱ卷已知生物体内有种蛋白质,该蛋白质是种转运蛋白,由个氨基酸组成。如果将分子中位丝氨酸变成亮氨酸,位谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后蛋白质不但保留功能,而且具有了酶催化活性。回答下列问题从上述资料可知,若要改变蛋白质功能,可以考虑对蛋白质进行改造。以基因序列为基础,获得基因途径有修饰基因或合成基因。所获得基因表达时是遵循中心法则,中心法则全部内容包括复制,以及遗传信息在不同分子之间流动,即。蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过和,进而确定相对应脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质生物进行鉴定。解析蛋白质功能由蛋白质三维结构决定,而蛋白质三维结构与氨基酸序列有关,因此,若要改变蛋白质功能,可以考虑对蛋白质氨基酸序列进行改造。基因与基因根本区别是碱基序列不同,因此可以通过对基因进行修饰获得基因,也可以直接合成基因。中心法则内容包括遗传信息复制转录逆转录和翻译。蛋白质工程基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列,进而确定相对应脱氧核苷酸序列。获得蛋白质之后要对蛋白质生物功能进行鉴定。答案氨基酸序列或结构和或遗传物质蛋白质或转录逆转录翻译设计蛋白质结构推测氨基酸序列功能构建知识网络强化答题语句建网络图填充，限制性核酸内切酶基因表达载体构建目基因检测与鉴定基因治疗要语强记三种工具限制酶具有特异性,即种限制酶只能识别特定碱基序列,并在特定位点上进行切割。连接酶作用部位是磷酸二酯键。质粒是常用载体,它是种小型环状分子,具有个至多个限制酶切割位点及标记基因。四个步骤目基因获取有从基因文库中获取和人工合成两类方法。基因表达载体包括目基因启动子终止子和标记基因。目基因导入植物细胞常用农杆菌转化法导入动物细胞常用显微注射法,导入微生物细胞常用感受态细胞法。目基因检测与鉴定方法有分子水平检测分子杂交分子杂交抗原抗体杂交和个体水平鉴定。酶识别序列。大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述构建好表达载体后则获得了降解纤维素能力,这是因为。解析基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌基因组中,故应以该菌基因组为模板进行基因扩增。目基因与质粒进行重组时,需将目基因插入到启动子和终止子之间,且应靠近启动子和终止子,结合示意图可知,应在扩增基因两端分别引入Ⅰ和Ⅰ两种限制酶识别序列。该基因表达载体中含有基因,其可表达产生葡萄糖苷酶,其可分解纤维素,这样大肠杆菌就获得了分解纤维素能力。答案嗜热土壤芽孢杆菌ⅠⅠ转基因大肠杆菌分泌出有活性酶方法突破限制酶选择方法应选择切点位于目基因两端限制酶,如图甲可选择Ⅰ。不能选择切点位于目基因内部限制酶,如图甲不能选择Ⅰ。切割质粒时,般所选限制酶要与切割目基因限制酶致,以确保具有相同黏性末端。质粒作第十单元现代生物科技专题第讲基因工程考情分析备考导航考纲解读全国卷五年考题统计最新考纲核心内容基因工程诞生Ⅰ基因工程原理及技术Ⅱ基因工程应