该方法，文中还得到了水解过程中各组分浓度的变化图，这些信息能更好的表现整个水解过程中发生的变化。王应霞引入方法，对以溴化乙锭作为荧光探针时喜树碱与作用的三维荧光光谱进行分析，得到了各组分的纯光谱曲线及浓度变化趋势。等应用的方法对农药速灭威与小牛胸腺作用的紫外光谱进行解析，得到的浓度变化及纯物质光谱图使对二者作用的反应过程的了,,,,该方法，文中还得到了水解过程中各组分浓度的变化图，这些信息能更好的表现整个水解过程中发生的变化。王应霞引入方法，对以溴化乙锭作为荧光探针时喜树碱与作用的三维荧光光谱进行分析，得到了各组分的纯光谱曲线及浓度变化趋势。等应用的方法对农药速灭威与小牛胸腺作用的紫外光谱进行解析，得到的浓度变化及纯物质光谱图使对二者作用的反应过程的了解更为全面。琼脂糖凝胶电泳技术凝胶电泳技术因为其操作方便，分辨率高，稳定性好等优点而被广泛应用于化学生物等学科的研究中，根据大分子所带电荷不同造成迁移速率的差别，将不同分子质量甚至不同构象的物质进行分离。通过凝胶电泳中不同条件下条带状况的差别，可以判断小分子与作用后对结构的影响或是对产生的断裂等损伤。除了以上方法外，还有核磁共振，电化学方法，拉曼光谱等多种方法都被应用于小分子与作用的研究中。这些方法各有优缺点，通过多种方法联合使用，能更好的做到扬长避短，为整个研究提供更加全面和准确的信息。选题意义与研究内容选题意义国家重点实验室目标导向课题食品中化学生物风险因子的作用机理及新检测技术研究。环境雌激素种类繁多，在日常生活中广泛使用，在给工业生产和日常生活都带来方便的同时，也给人体健康带来了诸多潜在危害，随着人们对环境雌激素研究的不断深入，环境雌激素的毒性检测方法等也有了更多的报道。环境雌激素与些生物大分子如的体外相互作用研究近年来引起了广泛关注。由于是重要的遗传物质，研究表明，绝大部分化学有害物的作用靶点都是，化学有害物与的作用引起结构的损伤，可能会引起基因第章绪论和机体的改变，但如果特定位点的序列发生紊乱，且无法恢复正常，将很有可能导致细胞的恶性转化，乃至癌症和在之后转录中突变概率的增加。目前，环境雌激素与的作用研究文献还十分有限，因此，本文对种环境雌激素己烯雌酚双酚双酚与的相互作用进行了测定，获得的结果为了解种环境雌激素的作用机制及其毒性行为提供理论基础和有益数据。研究内容光谱技术测定环境雌激素己烯雌酚与小牛胸腺相互作用在人体生理酸度条件下，以吖啶橙为荧光探针，利用荧光光谱法和粘度测量技术，测定己烯雌酚与的猝灭常数结合常数相关热力学参数作用力和结合模式应用光谱和光谱技术检测己烯雌酚与的作用位点及己烯雌酚对构象的影响。双酚与的结合性质及环糊精的影响分析采用化学计量学−方法紫外吸收光谱法荧光光谱法和光谱法并结合熔点和粘度测量等集成技术，研究双酚与作用的紫外光谱并进行−分析，通过获得的目标组分的纯光谱及其浓度变化，监测双酚与的相互作用。分析对双酚的荧光猝灭光谱，测定荧光猝灭机理结合常数和作用力类型。结合熔点和粘度测量盐效应以及和光谱分析结果确定双酚与的结合模式结合区域以及构象的变化。研究环糊精对结合作用的影响。−结合光谱法检测双酚与的作用模式在缓冲条件下，联合应用多种光谱技术结合−和分子模拟方法测定双酚与的作用模式作用位点以及结构的变化，并对双酚−空间结合姿态进行可视化描述，通过反应过程中组分之间浓度的变化进行结合作用的质量分析。第章光谱技术测定环境雌激素己烯雌酚与小牛胸腺相互作用第章光谱技术测定环境雌激素己烯雌酚与小牛胸腺相互作用引言己烯雌酚分子结构如图是种人工生产制造合成的雌激素，因为其有促进动物体重增长的功效，被作为促生长剂用于动物饲料中。同时由于其有类似动物雌激素，调节动物体生长的作用，之后也被用于治疗骨质疏松闭经卵巢功能不全和更年期综合症的相关治疗。随着科技的进步和药物使用后的副作用显现，人们发现会增加使用者后代患癌症的风险，且因为其难溶难降解的性质，在使用之后很难在自然环境下被降解，在水源和土壤形成富集，对环境造成严重的污染。先后已经有部分国家停止了在动物生产中的应用，但是其作为药物的临床使用仍然还在继续，环境中富集的也通过各种渠道影响着人们的身体健康。是外源小分子物质的主要作用目标，作为生命体主要遗传物质的载体，与它的相互作用可能会给生命体带来致癌致畸的威胁。本章以吖啶橙作为荧光探针，主要采用荧光光谱法物理测量化学计量学等方法对与的相互作用进行研究。实验部分实验仪器与试剂图己烯雌酚的分子结构第章光谱技术测定环境雌激素己烯雌酚与小牛胸腺相互作用紫外可见分光光度计日本，岛津公司型荧光光度计日本，日立公司圆二色谱仪法国，−公司傅里叶红外光谱仪，配置附件美国，公司乌氏粘度计，上海前锋橡塑玻璃制品厂−型酸度计上海雷磁仪器厂。标准品公司用乙醇溶液配制成浓度的储备液小牛胸腺，公司用的溶液溶解，测得，表明已充分去除蛋白质，利用ε确定浓度为，置于的冰箱中备用吖啶橙，公司配制成的水溶液，使用时根据所需进行稀释的−缓冲溶液其他试剂均为分析纯，实验用水均为超纯水。实验方法荧光竞争实验用−缓冲液配置定浓度的−混合液，放于的冰箱中低温保存，待溶液稳定之后再使用。取混合液于比色皿中，逐次加入等量的溶液，混合均匀后放置，扫描混合溶液的荧光光谱实验中设定扫描的激发波长为，激发及发射狭缝均为。紫外可见吸收光谱的测定取配置好的溶液溶于的−缓冲液中混合均匀，逐次加入定量浓度为的稀释液，稳定后扫描混合溶液在波长范围内的紫外光谱，再向的−缓冲液中逐次加入等量的的稀释液，扫描相同条件下单纯稀释液的紫外光谱。粘度实验将乌式粘度计置于的恒温水浴锅中，分别测定−缓冲液，溶液和混合液流经乌氏粘度计中毛细管所用时间，实验中固定溶液的浓度为。由公式η计算的相对粘度值，以ηη对作图，可以得到己烯雌酚存在情况下对粘度的影响，其中ηη分别代表加入前后溶液第章光谱技术测定环境雌激素己烯雌酚与小牛胸腺相互作用的相对粘度。圆二色谱的测定分别配制与摩尔比为，和的混合溶液，扫描其在范围内的色谱。红外光谱实验配制与摩尔比，的混合液，以超纯水作为背景，以附近得到平直基线时为标准背景，扫描不同摩尔比的混合溶液在范围内的红外光谱。同时按不同摩尔比下己烯雌酚的量，配制不同浓度的溶液，扫描其在纯水中的红外谱图并做差谱。结果与讨论己烯雌酚对紫外光谱的影响分别测量−混合液及单独溶液的紫外光谱，对所得光谱结果进行差谱处理后比较存在时对紫外光谱的影响。如图所示由于碱基中存在共价键产生的跃迁，会在附近形成特征吸收峰，这个特征吸收峰随着的加入出现峰位置和峰值强度的变化，这表明能与生成新的物质。而特征吸收峰的减色红移现象可能是因为插入到碱基对中使其跃迁的能量和跃迁几率变小而造成的。图对紫外可见吸收光谱的影响,分类号密级学号南昌大学专业学位研究生学位论文几种环境雌激素与相互作用检测作者姓名速俊华培养单位院系食品学院指导教师姓名职称张国文教授指导教师姓名职称章新泉教授级高工专业学位种类工程硕士专业领域名称