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TOP34细胞与遗传实验课件凋亡相关基因-Bax 在不同细胞中表达产物差异检测.ppt文档免费在线阅读

内源性过氧化物酶活性作用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物抗生物素,起到放大作用试剂说明磷酸盐缓冲液封闭液山羊血清或,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除作用,使得检测物被放大,最后在显色剂的作用下,构象蛋白显色褐色。器材与试剂仪器移液枪枪头滴管显微镜材料培养细胞试剂甲醇封闭液抗二抗用线粒体膜,使其膜通透性增加,释放,细胞凋亡原理本次实验以构象蛋白为抗原,用小鼠特异性抗体抗与其结合,再用生物素标记的羊抗小鼠抗体二抗与前者结合,形成了生物素复合物。此复合物与多价结合力的物质生物素,应用于免疫组化,使得抗原抗体的亲和力比免疫组化高出万倍。其更具高灵敏性和高特异性。原理凋亡相关基因家族成员细胞损伤时其蛋白构象发生改变寡聚化作保护实验三原理免疫细胞化学免疫组化是将抗原抗体间的免疫反应引入细胞标本,并通过对其所带有的特殊标记物的显示,籍以对细胞内抗原或抗体作定性定位以及定量检测。亲和组织化学则将些具有双价或存在为佳年,而短期内生物活性则被破坏。购试剂盒时注意厂家批号,其差异很大,会影响稳定性。告知实验四细胞内微核的检测家系分析凋亡相关基因在不同细胞中表达产物差异检测细胞损伤与二抗的稀释度孵育时间和温度与染色强度背景有直接关系。染色背景过高,在显色之前,用含的洗涤标本次,再洗次,然后显色。有毒性小心试剂盒保剂盒中试剂各滴,混匀后加至细胞孔板,镜下控制,以蒸馏水终止反应。观察结果实验结果缺糖前细胞缺糖细胞缺糖细胞缺糖前细胞缺糖细胞缺糖细胞注意事项甲醇洗,次工作液加入,混匀洗,次显色显色工作液配制现配蒸馏水,加试次加入封闭液加抗或过夜洗,次加二抗加入生物素化山羊抗小鼠洗,次实验步骤加大作用显色液二氨基联苯胺实验步骤培养细胞孔板,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,羊抗小鼠甲醇消除内源性过氧化物酶活性作用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物抗生物素,起到放,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,次加入封闭液,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物抗生物素,起到放大作用显色液二氨基联苯胺实验步骤培养细胞孔板封闭液山羊血清或,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除内源性过氧化物酶活性作用构象蛋白显色褐色。器材与试剂仪器移液枪枪头滴管显微镜材料培养细胞试剂甲醇封闭液抗二抗试剂说明磷酸盐缓冲液构象蛋白显色褐色。器材与试剂仪器移液枪枪头滴管显微镜材料培养细胞试剂甲醇封闭液抗二抗试剂说明磷酸盐缓冲液封闭液山羊血清或,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除内源性过氧化物酶活性作用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物抗生物素,起到放大作用显色液二氨基联苯胺实验步骤培养细胞孔板,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,次加入封闭液,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除内源性过氧化物酶活性作用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物抗生物素,起到放大作用显色液二氨基联苯胺实验步骤培养细胞孔板,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,次加入封闭液加抗或过夜洗,次加二抗加入生物素化山羊抗小鼠洗,次实验步骤加甲醇洗,次工作液加入,混匀洗,次显色显色工作液配制现配蒸馏水,加试剂盒中试剂各滴,混匀后加至细胞孔板,镜下控制,以蒸馏水终止反应。观察结果实验结果缺糖前细胞缺糖细胞缺糖细胞缺糖前细胞缺糖细胞缺糖细胞注意事项二抗的稀释度孵育时间和温度与染色强度背景有直接关系。染色背景过高,在显色之前,用含的洗涤标本次,再洗次,然后显色。有毒性小心试剂盒保存在为佳年,而短期内生物活性则被破坏。购试剂盒时注意厂家批号,其差异很大,会影响稳定性。告知实验四细胞内微核的检测家系分析凋亡相关基因在不同细胞中表达产物差异检测细胞损伤与保护实验三原理免疫细胞化学免疫组化是将抗原抗体间的免疫反应引入细胞标本,并通过对其所带有的特殊标记物的显示,籍以对细胞内抗原或抗体作定性定位以及定量检测。亲和组织化学则将些具有双价或多价结合力的物质生物素,应用于免疫组化,使得抗原抗体的亲和力比免疫组化高出万倍。其更具高灵敏性和高特异性。原理凋亡相关基因家族成员细胞损伤时其蛋白构象发生改变寡聚化作用线粒体膜,使其膜通透性增加,释放,细胞凋亡原理本次实验以构象蛋白为抗原,用小鼠特异性抗体抗与其结合,再用生物素标记的羊抗小鼠抗体二抗与前者结合,形成了生物素复合物。此复合物与作用,使得检测物被放大,最后在显色剂的作用下,构象蛋白显色褐色。器材与试剂仪器移液枪枪头滴管显微镜材料培养细胞试剂甲醇封闭液抗二抗试剂说明磷酸盐缓冲液封闭液山羊血清或,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除内源性过氧化物酶活性作用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物抗生物素,起到放大作用显色液二氨基联苯胺实验步骤培养细胞孔板,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,次封闭液山羊血清或,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除内源性过氧化物酶活性作用,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,次加入封闭液,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的大作用显色液二氨基联苯胺实验步骤培养细胞孔板,每组正常损伤损伤恢复洗,次轻轻地洗涤甲醇固定洗,甲醇洗,次工作液加入,混匀洗,次显色显色工作液配制现配蒸馏水,加试二抗的稀释度孵育时间和温度与染色强度背景有直接关系。染色背景过高,在显色之前,用含的洗涤标本次,再洗次,然后显色。有毒性小心试剂盒保保护实验三原理免疫细胞化学免疫组化是将抗原抗体间的免疫反应引入细胞标本,并通过对其所带有的特殊标记物的显示,籍以对细胞内抗原或抗体作定性定位以及定量检测。亲和组织化学则将些具有双价或用线粒体膜,使其膜通透性增加,释放,细胞凋亡原理本次实验以构象蛋白为抗原,用小鼠特异性抗体抗与其结合,再用生物素标记的羊抗小鼠抗体二抗与前者结合,形成了生物素复合物。此复合物与试剂说明磷酸盐缓冲液封闭液山羊血清或,用时稀释抗小鼠,用时稀释二抗生物素标记的羊抗小鼠甲醇消除

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