药物在生物样品内的生物转化代谢的方式和途径等信息，从而为药品生产临床医疗实验研究等方面对所研究药物作出估计与左右，用甲醇和甲醇含甲酸和抗坏血酸洗脱，最后用甲醇洗脱。馏分合并，真空吹干，残渣用甲醇复溶后进样。,盐含抗坏血酸调尿液至，样品中加入漆树黄酮做内标，用葡萄糖醛酸苷酶芳基磺胺酶在温孵震荡水解，取反相填料，甲醇湿润装柱，随后用甲酸平衡柱，酶解后的尿液上样，流速为•冷冻解冻循环稳定性•贮备液稳定性第五节生物药物分析的常用测定方法•光谱法紫外可见分光光度法荧光分光光度法•色谱法•电泳法•免疫分析法人尿中槲皮素含量测定取氩气消泡后的尿液，用醋酸样品内药物分析方法•方法的评价方法的专属性注重考虑代谢物内源性物质和同时服用药物的干扰线性范围相关系数样品稳定性考察•长期贮存短期室温贮存•回收率相对稳定•与参比方法相比较相关系数精密度各浓度点不应大于，最低定量限不应大于。灵敏度•检测限定量限最低检测浓度第四节生物定以水代替空白样品，添加对照品后测定了解提取回收率和最低检测浓度的大致情况空白样品中添加对照品后测定回收率实验实际样品测定第四节生物样品内药物分析方法•方法的评价准确度化学降解衍生化反应络合蒸发样品玷污•增塑剂•脂肪酸和酯类•其他第四节生物样品内药物分析方法•分析方法建立的般步骤以纯品进行测定确定线性范围最适测定浓度灵敏度最佳测定条件等空白样品测化•液固萃取固相提取柱使用硅藻土氧化铝离子交换树脂活性炭等填充剂“干混合物”萃取待测组分的富集•真空挥发或通气流挥发衍生化处理第三节生物样品的制备•样品预处理待测物的损失•吸附变化或干扰药物的测定肝素是种含硫酸的粘多糖，常用其钠盐钾盐，能阻止凝血酶原转化为凝血酶，抑制纤维蛋白原形成纤值提取溶剂离子强度离子对提取第三节生物样品的制备•样品预处理药物的分离与净血浆下层血细胞全血第三节生物样品的制备抗凝剂的选择肝素最常用，般不会干扰药物分析及导致药物发生化学变化枸橼酸盐乙二胺四乙酸能与血中结合，可能引起被测组分发生化学试管或其他容器时，应注意勿用力压出，而应取下针头后轻推，以免血球破裂使血浆或血清带红色。第三节生物样品的制备全血血浆和血清样品的制备血液自然凝结离心上层血清下层血细胞加抗凝剂离心上层等器官组织第三节生物样品的制备二常用生物样品的种类特点与采集血样二尿液三唾液四脏器组织第三节生物样品的制备血样采血方式及评价多用静脉采血注意将注射器内取好的血液转入同检测目的与要求进行选取第三节生物样品的制备二常用生物样品的种类特点与采集按照生物样品的性质，生物样品可分为均匀样品血液尿液唾液胆汁脑脊液淋巴液等非均匀样品心肝脾肺脑品的种类特点与采集三样本的代表性四样品的储存五样品的预处理第三节生物样品的制备选择体液或组织供体内药物分析的般原则能够反映出浓度与药效之间的关系易于获得便于处理适合分析根据不萄糖醛酸硫酸盐等结合，极性进步增大，便于从尿中排泄第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化•举例川芎嗪主要是氧化代谢第三节生物样品的制备选择体液或组织供体内药物分析的般原则二常用生物样代谢的过程第阶段药物在以细胞色素为核心的混合功能氧化酶等催化下发生氧化还原水解等反应，增加极性基团水溶性增强，活性改变第二阶段药物与代谢物在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶等催化下，与葡，使临床用药更加安全合理第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物代谢的器官肝脏肝微粒体中存在的药物代谢酶另外肾脾肺肠粘膜胎盘等组织第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物代，使临床用药更加安全合理第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物代谢的器官肝脏肝微粒体中存在的药物代谢酶另外肾脾肺肠粘膜胎盘等组织第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物代谢的过程第阶段药物在以细胞色素为核心的混合功能氧化酶等催化下发生氧化还原水解等反应，增加极性基团水溶性增强，活性改变第二阶段药物与代谢物在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶等催化下，与葡萄糖醛酸硫酸盐等结合，极性进步增大，便于从尿中排泄第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化•举例川芎嗪主要是氧化代谢第三节生物样品的制备选择体液或组织供体内药物分析的般原则二常用生物样品的种类特点与采集三样本的代表性四样品的储存五样品的预处理第三节生物样品的制备选择体液或组织供体内药物分析的般原则能够反映出浓度与药效之间的关系易于获得便于处理适合分析根据不同检测目的与要求进行选取第三节生物样品的制备二常用生物样品的种类特点与采集按照生物样品的性质，生物样品可分为均匀样品血液尿液唾液胆汁脑脊液淋巴液等非均匀样品心肝脾肺脑等器官组织第三节生物样品的制备二常用生物样品的种类特点与采集血样二尿液三唾液四脏器组织第三节生物样品的制备血样采血方式及评价多用静脉采血注意将注射器内取好的血液转入试管或其他容器时，应注意勿用力压出，而应取下针头后轻推，以免血球破裂使血浆或血清带红色。第三节生物样品的制备全血血浆和血清样品的制备血液自然凝结离心上层血清下层血细胞加抗凝剂离心上层血浆下层血细胞全血第三节生物样品的制备抗凝剂的选择肝素最常用，般不会干扰药物分析及导致药物发生化学变化枸橼酸盐乙二胺四乙酸能与血中结合，可能引起被测组分发生化学变化或干扰药物的测定肝素是种含硫酸的粘多糖，常用其钠盐钾盐，能阻止凝血酶原转化为凝血酶，抑制纤维蛋白原形成纤值提取溶剂离子强度离子对提取第三节生物样品的制备•样品预处理药物的分离与净化•液固萃取固相提取柱使用硅藻土氧化铝离子交换树脂活性炭等填充剂“干混合物”萃取待测组分的富集•真空挥发或通气流挥发衍生化处理第三节生物样品的制备•样品预处理待测物的损失•吸附化学降解衍生化反应络合蒸发样品玷污•增塑剂•脂肪酸和酯类•其他第四节生物样品内药物分析方法•分析方法建立的般步骤以纯品进行测定确定线性范围最适测定浓度灵敏度最佳测定条件等空白样品测定以水代替空白样品，添加对照品后测定了解提取回收率和最低检测浓度的大致情况空白样品中添加对照品后测定回收率实验实际样品测定第四节生物样品内药物分析方法•方法的评价准确度•回收率相对稳定•与参比方法相比较相关系数精密度各浓度点不应大于，最低定量限不应大于。灵敏度•检测限定量限最低检测浓度第四节生物样品内药物分析方法•方法的评价方法的专属性注重考虑代谢物内源性物质和同时服用药物的干扰线性范围相关系数样品稳定性考察•长期贮存短期室温贮存•冷冻解冻循环稳定性•贮备液稳定性第五节生物药物分析的常用测定方法•光谱法紫外可见分光光度法荧光分光光度法•色谱法•电泳法•免疫分析法人尿中槲皮素含量测定取氩气消泡后的尿液，用醋酸盐含抗坏血酸调尿液至，样品中加入漆树黄酮做内标，用葡萄糖醛酸苷酶芳基磺胺酶在温孵震荡水解，取反相填料，甲醇湿润装柱，随后用甲酸平衡柱，酶解后的尿液上样，流速为左右，用甲醇和甲醇含甲酸和抗坏血酸洗脱，最后用甲醇洗脱。馏分合并，真空吹干，残渣用甲醇复溶后进样。,第六节应用实例五灵胶囊中五味子乙素在小鼠体内药代动力学研究色谱条件色谱柱,粒度流动相为甲醇水∶流速检测波长柱温为室温。给药方法昆明小鼠只，雄性，臵相对湿度温度动物试验室饲养，禁食过夜，自由饮水，次日按体重分层，随机分组，每时间点为组，每组只，五灵胶囊按相当于人体给药剂量倍,其中含五味子乙素给药,分别在,眼眶采血，臵于肝素钠的离心管内，室温放臵，离心,分离血浆,每组血浆合并臵冻存。乙素供试品按给药,分别在,采血，同上法操作得血浆，冻存。五灵胶囊中五味子乙素在小鼠体内药代动力学研究血浆供试品溶液血浆乙素供试品溶液与阴性供试品溶液的制备取上述依时间点取每组小鼠混匀血浆，分别加硫酸胺，振荡混匀，再加乙腈甲醇∶溶液，振荡混匀，离心，取上清液臵蒸发皿内，于水浴上用氮气吹干，残渣加色谱甲醇溶解至，摇匀，放臵过夜。次日用微孔滤膜抽滤，作为血浆供试品溶液。取上述乙素供试品依时间点取每组混匀血浆，按供试品溶液的制备方法制得血浆乙素供试品溶液。另取五灵胶囊缺五味子阴性样品按和供试品溶液的制备方法制得的阴性供试品溶液。结论五味子乙素在小鼠体内从吸收到消除历程，五灵胶囊中乙素在小鼠体内从吸收到消除历程大于。方剂改变了处方中主要成分在体内动力学参数，使有效成分在血中滞留时间延长，生物利用度提高，从而增强了药物的治疗作用。王胜春等时珍国医国药,第八章生物样品内中药制剂化学成分的测定大纲要求•掌握生物样品体内药物分析的性质意义和任务•掌握生物样品的制备过程•熟悉生物样品内药物分析的方法•了解药物在生物体内的存在状态与生物转化相关知识第节概述生物样品内药物分析的性质二生物样品内药物分析的目的意义三生物样品内药物分析的任务四生物样品内药物分析的对象五生物样品内药物分析的特点第节概述生物样品内药物分析的性质•生物样品内药物分析又称体液药物分析生物药物分析，是随着临床药学临床药理学的发展和需要而建立起来的门新兴学科。概述二生物样品内药物分析的目的意义研究及了解药物在生物样品内的数量和质量变化，获得药物代谢动力学的各种参数药物在生物样品内的生物转化代谢的方式和途径等信息，从而为药品生产临床医疗实验研究等方面对所研究药物作出估计与评价。第节概述三生物样品内药物分析的任务分析方法学的研究在药物浓度检测中的应用在药代动力学研究中的应用生物样品内内源性物质的测定第节概述四生物样品内药物分析的对象受试者大鼠兔狗猴人分析对象体液器官组织排泄物等分析的目标母体药物代谢产物种类结构数量分布情况第节概述五生物样品内药物分析的特点掌握干扰杂质多内源性物质，如蛋白质多肽脂肪酸色素酶等代谢物共存药物等样品量少生物体采样量受限要求较快提供结果为临床用药监护中毒解救第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物在生物体内的存在状态二药物代谢研究的意义第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化存在状态游离药物结合药物蛋白质结合不能透过细胞膜可逆第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化二药物代谢研究的意义了解药物进入生物体后的状态与生物系统的相互作用，保证临床用药安全有效研究药物的代谢途径酶催化机制结构与药理作用的关系，对避免药物的毒性及寻找新药具定意义研究药物相互作用毒性作用机制，使临床用药更加安全合理第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物代谢的器官肝脏肝微粒体中存在的药物代谢酶另外肾脾肺肠粘膜胎盘等组织第二节药物在生物体内的存在状态与生物转化药物代谢的过程第阶段药物在以细胞色素为核心的混合功能氧化酶等催化下发生氧化还原水解等反应，增加极性基团水溶性增强，活性改变第二阶段药物与代谢物在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶等催化下，与葡萄糖醛酸硫酸盐等结合，极性进步增大，便于从尿中排泄第二节