在使用前必须进行高压灭菌。

所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在储存。

微量移液器的枪头在吸取试剂后必须更换。

激趣应用在吸附性方面有何特点很容易吸附在玻璃的表面，而不容易吸附在塑料的表面，由此推测用到的微量离心管是用何种材质加工制作的提示是用塑料加工制作的。

新课堂互动探究知识点生物体内的复制与反应的比较细解教材体内复制反应时期细胞有丝分裂间期和减数第次分裂前的间期体外随时进行场所活细胞内细胞外酶解旋酶聚合酶耐高温的聚合酶聚合酶特点边解旋边复制，半保留复制体外迅速扩增是否需缓冲液不需缓冲液严格配制倍浓缩扩增缓冲液不同点设备无严格控制温度变化的温控设备原料种脱氧核苷酸复制原理严格遵循碱基互补配对原则，半保留复制模板以母链为模板相同点引物都需要分别与两条模板链相结合的两种引物特别提醒解旋酶的作用是使两条链的氢键断开，而聚合酶与连接酶的作用都是催化形成磷酸二酯键。

聚合酶是将单个核苷酸加到已有的单链片段的端上，需要模板而连接酶连接的是两条，聚合酶催化反应的进行，而引物是满足聚合酶起作用的需要，四种脱氧核苷酸是该过程的原料。

综上所述，正确。

答案华中师大附条件是要有段已知目的基因的核苷酸序列以便合成对引物，条随堂自测技术扩增，需要的条件是目的基因引物四种脱氧核苷酸聚合酶等核糖体解析技术需要目的基因作为扩增的模板错误聚合酶不能从头开始合成，而只能从引物的端延伸链，正确中需要两种不同的引物，引物般为段或，基本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸，正确。

答案新思维聚合酶聚合酶不能从头开始合成，而只能从引物的端延伸链的引物的基本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸扩增时，需要加入两种引物解析需要耐高温的聚合酶，三个循环后可得到种长度的片断，正确次循环后，不是所有的单链上都有引物，错误。

答案跟踪练习吉林中质检下列有关技术的叙述，错误的是技术定需要解旋酶和不在该片段的端点，因此第轮循环后，得到的两片段中两条脱氧核苷酸链都不等长通过绘图可推知，第二轮中亦不会出现等长的引物，所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的片段，错误长度的片断次循环后，所有的单链上都有引物解析由于引物和引物均不在该片段的端点，因此第轮循环后，得到的两片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，错误由于题图中的引物和引物均单链片段，它是子链合成延伸的基础。

下列说法正确的是从理论上推测，第轮循环产物中就能得到含引物对的片断至少完成两轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的片段三个循环后可得到种引物和单链之间形成氢键，两条单链之间并未形成氢键，因此复性后，无双链分子形成。

典例精析华中师大附中期中技术扩增片断，其原理与细胞内复制类似如下图所示图中引物为的这特点进行含量的测定，具体方法如下特别提醒过程中无解旋酶，需要升高温度才能打开氢键，但此时的温度还不能破坏磷酸二酯键，因此，热变性后是单链，并未分解成单体。

复性时只是在次后有个若开始有个提供模板，则循环次后获得的子代数目为个。

含量的测定在的紫外线波段有强烈的吸收峰，峰值的大小与含量有关。

可以利用知识点二操作细解教材解旋与复旋的原理热变性与复性的反应过程如图扩增的计算与含量的测定理论上呈指数方式扩增。

若开始只有个提供模板，则循环旋需要解旋酶，延伸需要聚合酶等胞外扩增通过高温解旋而不需要解旋酶，延伸只需热稳定的酶。

选项能量供应不同，胞内复制过程由提供能量，而扩增主要由外界供能。

答案查考生对细胞内外复制条件的理解。

选项模板不同，胞内复制以整个分子作为模板，扩增却以段目的作为模板。

选项原料相同，均以种脱氧核苷酸为原料。

选项酶不相同，胞内解正确。

答案跟踪练习如图表示细胞内复制和细胞外扩增两个过程，两反应过程的条件中相同的是模板原料酶能量供应解析本题主要考查细胞内复制和细胞外扩增的知识，意在考热稳定聚合酶酶，具体过程有高温变性解旋过程低温复性引物结合到互补链上中温延伸合成子链。

扩增中双链解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开，全称为聚合酶链式反应，是项在生物体外复制特定的核酸合成技术，原理是复制，前提条件是要有段已知目的基因的核苷酸序列以便合成对引物，条件还包括模板四种脱氧核苷酸对引物全称为聚合酶链式反应，是项在生物体外复制特定的核酸合成技术，原理是复制，前提条件是要有段已知目的基因的核苷酸序列以便合成对引物，条件还包括模板四种脱氧核苷酸对引物热稳定聚合酶酶，具体过程有高温变性解旋过程低温复性引物结合到互补链上中温延伸合成子链。

扩增中双链解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开，正确。

答案跟踪练习如图表示细胞内复制和细胞外扩增两个过程，两反应过程的条件中相同的是模板原料酶能量供应解析本题主要考查细胞内复制和细胞外扩增的知识，意在考查考生对细胞内外复制条件的理解。

选项模板不同，胞内复制以整个分子作为模板，扩增却以段目的作为模板。

选项原料相同，均以种脱氧核苷酸为原料。

选项酶不相同，胞内解旋需要解旋酶，延伸需要聚合酶等胞外扩增通过高温解旋而不需要解旋酶，延伸只需热稳定的酶。

选项能量供应不同，胞内复制过程由提供能量，而扩增主要由外界供能。

答案知识点二操作细解教材解旋与复旋的原理热变性与复性的反应过程如图扩增的计算与含量的测定理论上呈指数方式扩增。

若开始只有个提供模板，则循环次后有个若开始有个提供模板，则循环次后获得的子代数目为个。

含量的测定在的紫外线波段有强烈的吸收峰，峰值的大小与含量有关。

可以利用的这特点进行含量的测定，具体方法如下特别提醒过程中无解旋酶，需要升高温度才能打开氢键，但此时的温度还不能破坏磷酸二酯键，因此，热变性后是单链，并未分解成单体。

复性时只是在引物和单链之间形成氢键，两条单链之间并未形成氢键，因此复性后，无双链分子形成。

典例精析华中师大附中期中技术扩增片断，其原理与细胞内复制类似如下图所示图中引物为单链片段，它是子链合成延伸的基础。

下列说法正确的是从理论上推测，第轮循环产物中就能得到含引物对的片断至少完成两轮循环，才能获得两条脱氧核苷酸链等长的片段三个循环后可得到种长度的片断次循环后，所有的单链上都有引物解析由于引物和引物均不在该片段的端点，因此第轮循环后，得到的两片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，错误由于题图中的引物和引物均不在该片段的端点，因此第轮循环后，得到的两片段中两条脱氧核苷酸链都不等长通过绘图可推知，第二轮中亦不会出现等长的引物，所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的片段，错误三个循环后可得到种长度的片断，正确次循环后，不是所有的单链上都有引物，错误。

答案跟踪练习吉林中质检下列有关技术的叙述，错误的是技术定需要解旋酶和聚合酶聚合酶不能从头开始合成，而只能从引物的端延伸链的引物的基本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸扩增时，需要加入两种引物解析需要耐高温的聚合酶，错误聚合酶不能从头开始合成，而只能从引物的端延伸链，正确中需要两种不同的引物，引物般为段或，基本单位是脱氧核苷酸或核糖核苷酸，正确。

答案新思维随堂自测技术扩增，需要的条件是目的基因引物四种脱氧核苷酸聚合酶等核糖体解析技术需要目的基因作为扩增的模板，聚合酶催化反应的进行，而引物是满足聚合酶起作用的需要，四种脱氧核苷酸是该过程的原料。

综上所述，正确。

答案华中师大附条件是要有段已知目的基因的核苷酸序列以便合成对引物，条件还包括模板四种脱氧核苷酸对引物热稳定聚合酶酶，具体过程有高温变性解旋过程低温复性引物结合到互补链上中温延伸合成子链。

扩增中双链解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

答案扬州中学考试在扩增的实验中，预计分子经过次循环后，应该得到个分子，但是结果只有约个分子，那么不是出现该现象的原因是聚合酶的活力不够，或活性受到抑制系统设计欠妥循环次数不够引物不能与亲链结合解析扩增没有得到应有的分子数，有可能是聚合酶活性不够或活性受抑制，可能形成的少，故正确。

系统设计欠妥会导致达不到预期的结果，故正确。

循环次数不够会出现子代分子数少，故正确。

引物与亲链不能结合的情况下不会出现子代，而不是少，故错误。

答案技术是把片段在实验条件下，合成许许多多相同片段的种方法，利用这种技术能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或者分子片段，“人类基因组计划”的研究中常用到这种技术。

请结合有关知识，回答有关此技术的些问题技术能把片段进行扩增，依据的原理是。

在实验条件下，分子进行扩增，除了所要扩增的片段处，还需要和等条件。

片段有个碱基，其中有腺嘌呤个，若让该分子扩增三次即复制三次至少需要腺嘌呤脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目分别是和个。

分子具有双螺旋结构和分子中碱基的互补配对四种脱氧核苷酸能量酶将大肠杆菌置于含的培养基上培养。

这样，后代大肠杆菌细胞中的双链均被标记。

然后将被标记的大肠杆菌作为亲代转到普通培养基中，繁殖两代。

亲代第代第二代大肠杆菌的状况如图所示。

第代大肠杆菌贮存的遗传信息与亲代大肠杆菌贮存的遗传信息完全相同的原因是。

如果将第二代大肠杆菌的分子总量作为整体，其中，带有的第二代大肠杆菌分子约占总量的。

如果将第二代大肠杆菌的含量作为整体，其中含标记的第二代大肠杆菌的脱氧核苷酸单链约占总量的。

它们均是以亲代标记的双链的每条链为模板，通过碱基互补配对原则合成的新视点名师讲座的常见问题技术实验很容易出现假阴性或假阳性的结果。

常见的原因及预防措施是出现假阴性主要原因有聚合酶活力不够或其活性受到抑制引物设计不合理导致不能复制提取的模板质量或数量不过关以及系统的建立欠妥当循环次数不够等等。

补救措施在原来扩增的产物中再加入聚合酶，并增加次循环。

预防措施选用活力高质量好的聚合酶在提取模板时，要特别注意避免提取物中含有抑制酶活性的污染物，如酚氯仿等。

不允许有机试剂的污染。

扩增的先决条件以及特异性的高低，很大程度上取决于引物与靶的互补情况，尤其要保证引物端与靶基因互补。

出现假阳性技术高度灵敏，极其微量的靶基因污染都会造成非目标片段的大量增加，因此，模板的污染是假阳性结果的主要原因。

此外，样品中存在靶基因的同源序列也可能造成假阳性结果。

预防措施操作时要注意做到隔离操作区分装试剂简化操作程序使用次性吸液枪头等。

新情境激趣引航能快速特异扩增任何已知目的基因或片段，并能轻易在皮克水平起始混合物中的目的基因扩增达到纳克微克毫克级的特异性片段。

因此，技术经问世就被迅速而广泛地用于分子生物学的各个领域。

例如梅毒。

新课堂互动探究学习目标尝试技术的基本操作。

使学生体验这常规的分子生物学实验方法。

理解的原理。

讨论的应用。

新知预习原理概念是种体外迅速扩增片段的技术，它能以极少量的为模板，在几小时内复制出上百万份的拷贝。

复制需要的条件解旋酶母链种脱氧核苷酸聚合酶和引物。

激趣应用复制为什么还需要引物提示聚合酶不能从头合成，只能从端延伸链。

因此，复制需要引物，的合成方向总是从子链的端向端延伸。