，与含有序列反应单元结合，识别靶基因启动子上结合位点，诱导肝脏急性期反应基因和些立早期基因表达。在正常大鼠肝部分切除研究中发现，血清和水平在术后小时升高，小时到高峰，同时肝细胞合成在术后即开始出现，小时到达高峰血清水平上升后，转录因子和被大量激活，导致其靶基因转录增加。这提示触发了肝切除后肝细胞由向期转换。通过对基因敲除小鼠研究，进步明确了在肝再生中关键作用。基因敲除小鼠，在肝切除后肝脏再生能力严重受损，死亡率明显增高，肝细胞期异常，合成下降，同时周期素等活化表达降低，而在肝切除前注射可以纠正小鼠肝再生异常，恢复活化水平，防止肝衰发生。另外，在肿瘤坏死因子受体基因敲除小鼠中发现，肝切除后活化受损，血清水平无明显升高符号说明英文缩写英文全称中文全称细胞介素白细胞介素受体信号传导及转录激活因子肿瘤坏死因子кк激活转录因子κ抑制蛋白增殖细胞核抗原肝叶切除前言我国是肝癌高发国家，肝癌占恶性肿瘤死亡率第位。肝切除是治疗各种肝脏实质性病变最为重要手段，更是目前肝癌可能根治唯方法，但根治性肝切除预后并不能令人满意，其主要原因是大部分肝癌发生在肝硬化基础之上，而大块硬化肝脏组织切除后将易于发生肝功能衰竭而导致病人死亡。研究表明肝切除术后肝功能恢复依赖于残肝再生能力，先前研究发现硬变肝脏部分切除后再生较正常肝脏明显减慢延迟，因此提高硬化肝脏再生能力将会改善肝癌病人预后。然而目前对硬化肝再生障碍机制研究甚少，对肝硬化后肝细胞再生启动状况更缺乏研究，再生障碍机制不明就导致了目前临床上对改善肝硬化肝切除术后肝再生缺乏有效措施和方法。肝再生是指肝脏因手术创伤中毒感染坏死以及肝移植术后等致部分肝脏失丧后，肝细胞重新修复过程。肝脏具有强大再生能力。目前认为肝再生主要涉及成年肝细胞活化以及可能肝前体干细胞活化，至少包括两个重要过程期静止肝细胞进入期即触发阶段，以及通过阻滞点进入细胞周期。近年来，大量研究证实信号通路在肝再生启动触发中起重要作用。白细胞介素,是种具有广泛生物学活性多功能细胞因子，可由细胞单核细胞内皮细胞等多种细胞产生。是典型多向性细胞因子，般由局部组织产生，作用于各种细胞，在几乎所有内稳定紊乱情况下如内毒素血症创伤和急性感染等时都出现释放，它可以促进细胞骨髓细胞肝细胞等多种细胞增殖和分化，诱导肝脏急性期反应蛋白合成，并在神经，内分泌系统中发挥定生物学作用。生物学活性是通过其受体，介导。由两条多肽链组成链是分子量为特异性配体结合链，般称为。链即信号传导链为糖蛋白，也称。只在些特定组织细胞上表达，包括活化细胞静息细胞肝细胞及些肿瘤细胞等，而在机体组织中广泛分布。目前认为必须先与结合，形成复合物后，由于构型改变，才能与结合，形成具有信号传导功能高亲合力复合物，进而通过不同途径传递生物学信号，产生生物学效应。与复合物结合于分子胞外区，迅速活化胞浆区偶联激酶分子。活化激酶催化胞内区几个酪氨酸残基发生磷酸化从而使活化，活化上磷酸化酪氨酸残基及其周围特征序列共同形成了特定分子进入复合物“停泊位点”，为与偶联提供条件。蛋白是近年研究异常活跃转录因子家族，目前共发现有个成员。它们是类结合蛋白，含有转录激活区同源功能域结合区及末端保守区等结构域。其中和参与了信号转导功能，它们在活化后通过其结构域与胞浆区结合进入受体复合物，并由激酶催化其端酪氨酸残基发生磷酸化而活化，活化分子离开，形成同异二聚体进入细胞核，与含有序列反应单元结合，识别靶基因启动子上结合位点，诱导肝脏急性期反应基因和些立早期基因表达。在正常大鼠肝部分切除研究中发现，血清和水平在术后小时升高，小时到高峰，同时肝细胞合成在术后即开始出现，小时到达高峰血清水平上升后，转录因子和被大量激活，导致其靶基因转录增加。这提示触发了肝切除后肝细胞由向期转换。通过对基因敲除小鼠研究，进步明确了在肝再生中关键作用。基因敲除小鼠，在肝切除后肝脏再生能力严重受损，死亡率明显增高，肝细胞期异常，合成下降，同时周期素等活化表达降低，而在肝切除前注射可以纠正小鼠肝再生异常，恢复活化水平，防止肝衰发生。另外，在肿瘤坏死因子受体基因敲除小鼠中发现，肝切除后活化受损，血清水平无明显升高大量复制期。在期完成细胞分裂相关准备后到达期。经历有丝分裂后细胞再回到期，完成次细胞周期。该过程是个复杂且受精密调控连续过程，期间要通过个限制点，和两个控制点，在这期间，细胞周期调节相关蛋白起了关键作用。细胞周期调节相关蛋白主要有三种细胞周期调节蛋白依赖激酶，细胞周期调节蛋白细胞周期调节蛋白依赖激酶抑制蛋白，。是细胞周期调节中心，它们必须与相应结合形成复合物后才具备调节活性。参与肝脏再生调节主要是。参与肝脏再生调节主要是。复合物对中期细胞越过点非常重要复合物对期细胞越过控制点而进入期非常重要复合物在期作用是促进复制期细胞则主要在复合物帮助下越过控制点进入期。上述过程中复合物活性受其本身些部位磷酸化作用以及双重负性调节。依照蛋白序列同源性分为大两类家族，包括家族，包括。特定与特定或复合物结合发挥调节作用。硬化肝脏余肝再生期间，细胞周期调节相关蛋白表达也出现明显异常肝大部分切除前，硬化及正常肝脏内几乎检测不到相关表达肝大部分切除后，正常肝脏余肝组织内表达均迅速上升，都于术后小时左右达高峰，并持续高浓度至术后小时才缓慢下降硬化肝脏余肝组织中于术后表达也升高，但上升速度明显缓慢，到术后小时才达高峰。其中最明显，术后其水平于所有时间点均远远低于正常，而且未出现明显峰值于术后表达也迅速上升，而硬化肝脏余肝组织内表达低于正常表达在两者间则未观察到明显差异。硬化肝脏再生过程中肝再生抑制因子表达和细胞凋亡调控异常转化生长因子，被认为是上皮细胞增值负性调控因子。具有失活复合物功能，使活性下降，还可以通过影响等凋亡基因表达而增强肝细胞凋亡。因此，很多学者都认为是肝再生终止信号之。在肝脏，主要由间质细胞合成分泌，正常肝脏水平极低。肝部分切除后，正常余肝内于术后小时表达增加，小时达高峰而硬化肝脏余肝内表达高峰提前于术后小时出现，并维持较长时间，这可能是硬化余肝内水平减低原因之。有研究者用抗体或受体基因灭活方式阻断信号通路，结果显示肝硬化大鼠部分肝切除后余肝再生明显增快。肝再生时肝脏内细胞增值和凋亡同时存在。研究显示，肝脏在正常情况时也低水平表达前凋亡基因，但硬化肝脏内表达水平明显高于正常肝部分切除后，正常肝脏余肝组织内先出现抗凋亡基因等表达高峰术后小时之后才出现前凋亡基因表达高峰术后小时而硬化肝脏余肝组织内抗凋亡基因在术后小时内呈表达下降，但之后则很快上升且超过正常水平，抗凋亡基因则始终低于正常，更明显。该研究结构显示，硬化肝脏再生功能受损与细胞凋亡相关基因表达异常有关。结语硬化肝脏部分切除后余肝再生缓慢机制复杂，是由多步骤多因子及多信号通路异常所致，其中机制阐明可指导临床工作者对其进行干预，加快硬化残肝再生及肝功能恢复，减少硬化肝脏部分切除术后并发症及死亡率，改善患者预后。综述参考文献,本人声明所呈交学位论文是本人在导师指导下进行研究工作及取得研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过研究成果，也不包含未获得或其他教育机构学位或证书使用过材料。与我同工作同志对本研究所做任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名签字日期年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留使用学位论文规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印缩印或扫描等复制手段保存汇编学位论文。同时授权中国学术期刊光盘版电子杂志社中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到中国优秀博硕士学位论文全文数据库中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。保密学位论文在解密后适用本授权书学位论文作者签名导师签字签字日期年月日签字日期年月日目录中文摘要ⅠⅣ符号说明Ⅵ前言论文正文材料与方法材料实验内容实验方法观察指标统计分析结果般情况及病理改变动物模型制作情况肝切除后肝功能肝切除后血清变化有丝分裂指数表达表达讨论肝硬化大鼠肝再生模型建立肝再生检查方法硬化肝脏再生特点及可能机制参考文献附录综述致谢信号通路与肝硬变大鼠肝部分切除后肝再生实验研究中文摘要目建立肝硬化大鼠肝部份切除模型，了解肝硬化大鼠与正常大鼠肝切除后肝再生过程差异，探讨信号通路在肝硬变大鼠肝部分切除后肝再生障碍中作用。方法皮下注射四氯化碳橄榄油溶液乙醇喂养复合方法建立级大鼠肝硬化模型，剂量为，时间为周。正常大鼠为对照组。对照组及肝硬化组大鼠均切除肝脏中叶及左叶约，分别于术后及八个不同时相点处死动物模型，收集并保存残肝组织及血液标本，离心血液收集血清后保存，肝组织部分保存备用，另部分福尔马林固定后小时内行石蜡包埋。全自动生化分析仪测定大鼠血清以了解大鼠肝功能变化，法检测血清及血清浓度，免疫组化二步法检测残肝组织切片阳性细胞数及活性蛋白阳性细胞数，常规病理切片光镜观察肝组织病理改变有丝分裂细胞数。采用和进行统计分析及做图，数据采用均数士标准差土方式记录，组间差别比较采用检验为有统计学意义。结果在模型制作过程中，对照组及实验组共有只死亡，其中实验组死亡只，造模成功率分别为及，光学显微镜下染色可见肝硬化大鼠正常肝小叶结构被破坏，纤维组织广泛增生，形成假小叶，假小叶内肝细胞索排列紊乱，可见小叶中央静脉缺如偏位或有个以上对照组大鼠肝组织正常，肝小叶形态结构规则各时间段实验组大鼠血清含量基本均高于对照组，而实验组大鼠血清均低于对照组，但伴随肝再生过程进展，肝功能均能逐渐恢复肝大部切除术后是肝脏增值最活跃阶段，标记细胞数及有丝分裂细胞数均于切除后小时开始迅速升高，并于切除后小时达峰值，然后逐渐下降，肝硬化组有丝分裂细胞数也于术后小时开始升高，但术后小时已达高峰并下降，肝硬化组标记细胞数在小时前均高于对照组，于切除后小时达高峰后下降，其峰值远低于对照组肝切除后，对照组血清水平在术后达高峰，后缓慢下降而实验组则到术后小时才缓慢到达高峰，之前均低于对照组，出现第二次高峰肝切除后活性蛋白于达高峰后迅速下降至极低水平，但实验组阳性细胞数明显低于对照组。结论肝部份切除后肝硬化组肝细胞再生能力远低于对照组，肝硬化大鼠肝再生受抑制肝硬化大鼠部分肝切除术后肝再生障碍与其早期水平低下而导致蛋白活化不足有关。关键词肝硬化肝再生白细胞介素符号说明英文缩写英文全称中文全称细胞介素白细胞介素受体信号传导及转录激活因子