届硕士学位论文黄白侧耳的富硒栽培研究作者姓名牛林茹指导教师韩建荣教授学科专业细胞生物学研究方向微生物细胞发酵工程培养单位生命科学学院学习年限年月至年月二〇四年六月万方数据万方数据山西大学届硕士学位论文黄白侧耳的富硒栽培研究作者姓名牛林茹指导教师韩建荣教授学科专业细胞生物学研究方向微生物细胞发酵工程培养单位生命科学学院学习年限年月至年月二〇四年六月万方数据.,万方数据承诺书承诺书本人郑重声明所呈交的学位论文，是在导师指导下独立完成的，学位论文的知识产权属于山西大学。如果今后以其他单位名义发表与在读期间学位论文相关的内容，将承担法律责任。除文中已经注明引用的文献资料外，本学位论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的成果。作者签名年月日万方数据学位论文使用授权声明学位论文使用授权声明本人完全了解山西大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留并向国家有关机关或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印缩印或扫描等手段保存汇编学位论文。同意山西大学可以用不同方式在不同媒体上发表传播论文的全部或部分内容。保密的学位论文在解密后遵守此协议。作者签名导师签名年月日万方数据目录中文摘要第章文献综述黄白侧耳.黄白侧耳概述.黄白侧耳的营养成分.黄白侧耳栽培条件硒.硒的概述.硒的研究进程.硒的生物学功能.硒的分布情况.硒在生物体内的赋存形态.富硒研究的现状.硒代蛋氨酸的研究现状.硒元素的测定方法.研究目的与意义.第二章富硒黄白侧耳的栽培研究材料与方法.供试菌株.培养基硒代蛋氨酸.栽培容器.富硒栽培方法.培养基优化正交试验.硒含量测定方法.统计学分析结果与分析.万方数据硒代蛋氨酸对黄白侧耳菌丝生长的影响.硒代蛋氨酸对黄白侧耳子实体产量和生物学效率的影响硒代蛋氨酸对黄白侧耳子实体硒含量的影响.正交试验优化结果讨论.第三章富硒黄白侧耳中蛋白与多糖的研究材料与方法样品.仪器药品主要试剂.黄白侧耳样品处理.黄白侧耳子实体粗蛋白含量测定.黄白侧耳子实体总糖含量测定.可溶性蛋白中的硒含量测定.可溶性多糖中的硒含量测定.统计学分析结果与分析.富硒黄白侧耳子实体粗蛋白含量进行比较分析.富硒黄白侧耳子实体多糖含量的比较.富硒黄白侧耳子实体可溶性硒蛋白的分析.富硒黄白侧耳子实体可溶性硒多糖的分析讨论.第四章富硒黄白侧耳子实体抗氧化性的研究材料与方法.样品.主要试剂.样品处理.黄白侧耳子实体抗氧化物质的提取.提取物的抗氧化性分析.总酚含量的测定.统计学分析.万方数据.结果与分析清除测定.还原力测定.亚铁离子螯合能力测定.清除超氧阴离子能力测定.值比较.总酚含量的测定讨论.参考文献.攻读学位期间取得的研究成果.致谢.个人简介及联系方式.承诺书.学位论文使用授权声明.万方数据.万方数据万方数据.万方数据中文摘要本论文的主要研究内容是在黄白侧耳培养料中添加硒代蛋氨酸，栽培获得富硒黄白侧耳子实体，并对其子实体进行粗蛋白含量多糖含量蛋白硒含量多糖硒含量以及抗氧化能力的分析。目前，关于黄白侧耳富硒栽培的研究，以及以硒代蛋氨酸作为富硒食用菌硒源的研究国内外尚未报道。因此，本项研究既是探索新的硒源在食用菌栽培上的应用，也可以获得新的富硒食用菌产品。在黄白侧耳培养料中添加不同质量分数的硒代蛋氨酸，分析硒代蛋氨酸对黄白侧耳发菌出菇子实体硒含量的影响，并采用正交试验优化富硒黄白侧耳的培养料配方。结果表明培养料中低质量分数的硒代蛋氨酸.对黄白侧耳菌丝的生长有促进作用，较高质量分数的硒代蛋氨酸对黄白侧耳菌丝的生长有定抑制作用。培养料硒代蛋氨酸的质量分数对黄白侧耳菌丝长势也有的影响，硒代蛋氨酸质量分数较高时黄白侧耳菌丝长势较差。培养料的硒代蛋氨酸质量分数在.范围内，黄白侧耳均能正常出菇较低质量分数的硒代蛋氨酸.对黄白侧耳子实体产量无明显影响，但在较高质量分数硒代蛋氨酸的培养料上黄白侧耳子实体的产量却降低了，说明较高质量分数的硒代蛋氨酸对黄白侧耳子实体的生长发育不利。通过测定黄白侧耳子实体的硒含量发现，栽培获得的黄白侧耳子实体的硒含量与培养料中的硒代蛋氨酸质量分数呈极显著的正相关性，在硒代蛋氨酸质量分数为.的培养料上栽培获得的子实体的硒含量最高，达到.。选择棉籽壳麦麸硒含量蔗糖含量进行正交试验，结果表明栽培富硒黄白侧耳的最优培养料配方为棉籽壳，麦麸，石膏，硒代蛋氨酸质量分数.，蔗糖质量分数。硒代蛋氨酸在进入黄白侧耳子实体后，有的硒存在于蛋白中，其中水溶性蛋白硒占总硒的近，有的硒存在于多糖中，说明硒代蛋氨酸更容易在蛋白中富集，蛋白硒为体内有机硒的主要存在形式。黄白侧耳子实体中的硒含量与多糖含量呈极显著的正相关，但与蛋白质含量呈极显著的负相关。通过测定富硒黄白侧耳子实体的清除能力还原力亚铁离子螯合能力清除超氧阴离子的能力，结果表明黄白侧耳子实体的硒含量对其抗氧化活性的影响万方数据Ⅱ并不显著，在培养料中添加.硒代蛋氨酸栽培出的含硒量较低的黄白侧耳子实体具有较高的抗氧化活性培养料中低质量分数的硒代蛋氨酸有利于提高黄白侧耳子实体的总酚含量，高质量分数的硒代蛋氨酸反而会降低总酚含量。关键词黄白侧耳硒代蛋氨酸富硒抗氧化性万方数据,.,,,,.,.万方数据.，.,.,,.万方数据第章文献综述第章文献综述.黄白侧耳黄白侧耳概述黄白侧耳，又名秀珍菇袖珍菇小平菇姬菇等，隶属担子菌亚门层菌纲伞菌目侧耳科侧耳属。黄白侧耳在年从香港引进，相继在我国广州福建山西吉林等多地进行栽培试验并且得到广泛的推广。在日本德国等国也有栽培,。黄白侧耳的菌丝体呈白色，有锁状联合，菌落外观薄细，平坦舒展。子实体单生或丛生，中等至大型，菌盖的直径可以达到，表面呈浅棕褐色，成熟后菌盖边缘常呈波状菌褶和菌肉呈白色，菌褶延生，不等长菌柄侧生，白色，基部稍细，粗，长。成熟的黄白侧耳子实体，菌盖完全伸展，外观与般平菇没有明显的差异，但在品质和口感上，黄白侧耳子实体菌柄纤维化程度低，口感上较其它侧耳品种细腻且柔爽，比较绵脆，菇味清香浓郁。并且丛生菇菇柄处极易剥离，人们非常喜欢。黄白侧耳的栽培工艺简单，出菇整齐，栽培周期短，抗逆性强，产量高，市场好，这些特点非常适合工厂化栽培。黄白侧耳的营养成分黄白侧耳子实体营养丰富，富含蛋白质，其蛋白质含量比香菇双孢蘑菇草菇高，比般蔬菜和水果高出倍，蛋白质含量接近于肉类。富含种以上的氨基酸，干菇中氨基酸含量谷氨酸.天门冬氨酸.亮氨酸.丙氨酸.缬氨酸.苏氨酸.丝氨酸.异亮氨酸.甘氨酸.精氨酸.赖氨酸.苯丙氨酸.酪氨酸.组氨酸.脯氨酸.胱氨酸.甲硫蛋氨酸.，其中谷氨酸含量最高，它含有人体自身不能制造，而食物中通常又缺乏的苏氨酸赖氨酸亮氨酸等。另外还含有较多的不饱和脂肪酸维生素叶酸和微量元素，而脂肪含量却很低。也有文献报道在黄白侧耳子实体中分离到了具有高抗肿瘤活性的多糖。黄白侧耳栽培条件黄白侧耳的生长发育所需要的营养和环境条件如下,营养需求万方数据黄白侧耳的富硒栽培研究黄白侧耳栽培培养基的碳源可用棉籽壳阔叶树木屑稻草玉米芯麦草等众多农副产品的下脚料，培养料氮源可以添加麸皮米糠玉米粉等，黄白侧耳在生长过程中，无机盐和维生素也是必不可少的。由于黄白侧耳的采收方式为小菇多潮，因此通常栽培培养料中要含有充足的碳源。酸碱度要求黄白侧耳适宜偏碱的环境，菌丝体在的环境中均能生长，最适值为，因此生产上常用的生石灰水调节培养料的。这样不仅有利于菌丝的生长，而且还能抑制夏季高温霉菌。水分与湿度要求黄白侧耳菌丝体生长期间，培养料的含水量在范围内最佳。子实体生长期间，空气湿度在范围内最佳，湿度在以上，子实体易变软腐烂。湿度在以下，原基产生少，菇朵易干萎。在管理上要干湿交替，不易引起子实体发生病斑和死菇。温度要求黄白侧耳属于偏高温型菇类，温度在菌丝均能生长，适温范围是，最适温度为子实体发生温度，最适温度。空气要求黄白侧耳菌丝生长阶段和子实体形成与发育阶段均需要有新鲜的氧气供应，在菌丝生长阶段，需氧量逐渐增大，因此，发菌期要经常通风换气。在子实体进入伸长期，定量的二氧化碳有利于菇柄伸长，限制菇盖伸长，因此，在袋口的局部环境，需要定量的二氧化碳浓度。但菇房内仍要进行定的喷水和适当的通气。光照要求发菌期不需要光照，子实体分化阶段则需要定的散射光，子实体伸长成熟阶段，可适当减弱光照强度，使菇盖颜色变浅，完全的黑暗不宜形成子实体，可能导致子实体畸形生长。.硒硒的概述硒在元素周期表中位于第族，原子量为.，共价半径.，原子半径.，化合价有价价价和价。硒在原子大小键合能及电子亲和力等化学特性上与硫元素极为相似，是典型的氧硫族元素，具有金属和非金属万方数据第章文献综述过渡区的物理特性。在自然界中，硒的存在形式主要有单质硒亚硒酸盐硒酸盐和转化进入到生物体内的有机硒。在生物体内，硒的主要存在形式为硒氨基酸，目前在哺乳动物与微生物中只检测到硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸。在植物体内，硒除了上述两种常见的硒氨基酸，还有些硒氨基酸的衍生物形式，存在形式比较复杂。硒的研究进程年，瑞典化学家发现了硒元素，开始人们认为硒为有毒物。年，德国的和发现硒能防治大鼠肝坏死的功能，并首次发表了关于硒对于动物有营养作用的报告。世纪后半叶，硒元素在营养学上被肯定，并且发现硒是动物和人体必需微量元素。年，世界卫生组织宣布硒元素为人体生理必需的种微量元素之。近年来随着与硒代半胱氨酸相对应的遗传基因密码子中的在生物体内的发现，以及硒蛋白与硒蛋白等被发现，使人们对硒的生物学本质及在人类和动物营养上的作用，有了更加深刻的认识。硒的生物学功能越来越多的研究表明，硒对人体身体健康起着非常重要的作用，而且中国营养学会也在年将硒认定为人们膳食中必须的营养元素之。硒的生理学功效主要表现为抗氧化作用抗癌作用对糖尿病的防治作用等。在抗氧化方面，机体发挥抗氧化的作用需要通过类酶促防御体系完成，这个体系包括谷胱甘肽过氧化物酶过氧化氢酶和超氧化物歧化酶等，机体中多余的氧自由基被这类酶在不同水平上清除，从而完成抗氧化作用。硒的个重要生理作用就是参与机体谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心的组成，其抗氧化作用也是通过谷胱甘肽过氧化物酶实现的，它通过清除细胞内多余的氧自由基，达到其保护细胞膜结构的功能。长期以来，硒直被看作是重要的食源性抗氧化剂，机体缺硒会引起硒酶活性降低氧自由基清除受阻生物膜损伤解毒和免疫功能减退等系列机体功能障碍，从而引发各种疾病，因此，适当提高日粮中硒水平能增强机体抗氧化能力，并且这已在很多研究中得到证实。在抗癌方面，对小鼠