化生成花色素聚合原花青素其单元间连接键易在酸作用下被打开，下部单元生成黄烷醇，上部单元生成花色素。因此，该法与香草醛盐酸法相比，精密度和准确度较差，且测得的原花青素含量偏低。原理如图所示。类柠檬苦素的应用前景原花青素具有多种药理活性，如抗氧化清除自由基护肝解毒抗菌及抗癌等功能。的提取国内外关于从松针中提取的报道很多，般采用水煮法和溶剂提取法。，简称。儿茶素与表儿茶素的结构见图，原花青素的结构通式如图所示。图儿茶素和表儿茶素的结构式图原花青素的结构通式研究发现，具有强大的抗氧化清除自由基能力和对人体微循环具有特殊改善的双重功效，以高效低毒高生物利用而著称。它能抑制低密度脂蛋白氧化，也是细胞循环中些关键酶的抑制剂，它能诱导不同细胞链中脱噬作用，抑制些癌基因的表达，因此可作为心血管疾病癌早老病的预防剂。近年国外关于低聚原花青素的性能研究较多，并已在饮料药品保健食品和化妆品业得到了广泛的应用原花青素的提取和检测方法原花青素素它能抑制低密度脂蛋白氧化，也是细胞循环中些关键酶的抑制剂，它能诱导不同细胞链中脱噬作用，抑制些癌的抗氧化清除自由基能力和对人体微循环具有特殊改善的双重功效，以高效低毒高生物利用而著称。部分内容简介，简称，将五聚体以上的称之为高聚体，简称。儿茶素与表儿茶素的结构见图，原花青素的结构通式如图所示。图儿茶素和表儿茶素的结构式图原花青素的结构通式研究发现，具有强大的抗氧化清除自由基能力和对人体微循环具有特殊改善的双重功效，以高效低毒高生物利用而著称。它能抑制低密度脂蛋白氧化，也是细胞循环中些关键酶的抑制剂，它能诱导不同细胞链中脱噬作用，抑制些癌基因的表达，因此可作为心血管疾病癌早老病的预防剂。近年国外关于低聚原花青素的性能研究较多，并已在饮料药品保健食品和化妆品业得到了广泛的应用原花青素的提取和检测方法原花青素素的提取国内外关于从松针中提取的报道很多，般采用水煮法和溶剂提取法。溶剂提取法得率高，但成本高，安全性低，更可能造成环境污染。水煮法耗能大，杂质多，操作困难。近年来，随着微波技术的发展，微波以其促进反应的高效性和强选择性，操作简便，副产物少，产率高及产物易于提纯等优点，已广泛应用于生化蛋白质水解及有机合成酯化等反应中，目前也有用于天然物的提取文献报道。经查阅资料确定本实验微波水提取的条件为功率为，时间为，料液比为。原花青素的检测原花青素的检测方法主要有可见分光光度法，高效液相色谱法，电化学法，流动注射化学发光法，原子吸收法，紫外分光光度法，毛细管电泳法等。原花青素最常用的测定方法是可见分光光度法，它分为香草醛盐酸法正丁醇盐酸法铁盐催化比色法法和示差法等。香草醛盐酸法的原理是基于原花青素环的化学活性较高，在酸性条件下，其上的间苯二酚或间苯三酚与香草醛发生缩合，产物在浓酸盐酸或硫酸作用下形成红色的正碳离子，于处测定其吸光度，据标准曲线法即可得到样品中原花青素含量。正丁醇盐酸法测定原花青素是基于原花青素在热酸作用下能产生红色花色素，可在波长处测定其吸光度，以甲醇作为空白对照，据原花青素标准曲线计算样品中原花青素含量。单体原花青素在强酸作用下，正碳离子失去质子，氧化生成花色素聚合原花青素其单元间连接键易在酸作用下被打开，下部单元生成黄烷醇，上部单元生成花色素。因此，该法与香草醛盐酸法相比，精密度和准确度较差，且测得的原花青素含量偏低。原理如图所示。类柠檬苦素的应用前景原花青素具有多种药理活性，如抗氧化清除自由基护肝解毒抗菌及抗癌等功能。据报道，原花青素抗氧化和清除自由基的能力远远高于和，其抗氧化能力是维的倍维的倍，是迄今为止发现的最好的天然抗氧化剂之。此外它还具有防癌抗癌，防治心血管疾病，抗高血糖，抗辐射，免疫调节，改善人体微循环及保护皮肤等多种功效，是欧美国家最受欢迎的植物药之具有抗癌活性。通过大鼠的急性和亚慢性毒性实验遗传毒性实验细菌基因突变哺乳动物细胞染色体畸变和小鼠微核实验证明原花青素无毒。近年来已成为国内外研究的热点，美国欧洲诸国阿根廷澳大利亚和新西兰等国相继开发了营养保健品或药品。目前已广泛应用于食品营养添加剂医药保健及化妆品等领域。本研究的目的和意义我国对松针的利用研究虽起步晚，但起点相对较高，目前已取得了不少可喜的成果，这是我国松针开发利用加工生产的主流。但是，也应清醒地看到，我国松针的开发利用潜力还很大，而且在松针开发利用加工生产方面与国外先进水平还存在着定差距，尤其在对松针中有特殊作用成分的开发利用方面与国外相比更是落后。因此，开展松针中原花青素的的深入研究，综合利用资源，不仅可以扩大天然药物的来源，生产出更多更好的生物活性物质和开发更有价值的功能性食品，造福人民，而且可以变废为宝，把我国松针资源优势转化成商品经济优势，产生巨大的经济效益和社会效益。本研究旨在探索松针中原花青素的提取关键技术。利用微波辅助提取松针中的原花青素，研究提取过程中各种因素如提取温度提取值提取料液比提取时间对其提取效果的影响，利用正交实验对微波辅助提取松针中的原花青素的工艺进行优化，寻找最佳工艺条件，为进步规模化提取原花青素奠定基础，实现松针的综合利用。研究的主要内容微波辅助提取松针中的原花青素可见光分光光度法判定提取物中原花青素的含量利用单因素实验建立原花青素的提取率与提取温度提取值提取料液比提取时间的关系，并通过正交实验和验证实验对松针中原花青素的微波辅助提取工艺进行优化。材料与方法试验材料马尾松松针洗净晾干的马尾松松针。主要化学试剂盐酸正丁醇，石油醚，乙酸乙酯，甲醇，硫酸铁铵，以上均为分析纯。仪器和设备Ⅱ恒温水浴锅天津市泰斯特仪器有限公司，真空抽滤机巩义市予华仪器有限公司，型紫外可见分光光度计，旋转蒸发器巩义市予华仪器有限公司，型计福州华志科学仪器有限公司，电热恒温鼓风干燥箱，微波炉分液漏斗，计时器，量筒，移液管，容量瓶，滤纸，剪刀，烧杯，冷凝回流装置，普通天平试验方法物料预处理取洗净晾干的马尾松松针，置于干燥箱干燥后待验结果和分析提取温度对松针中原花青素提取率的影响温度主要影响分子的热运动，温度低时，分子运动缓慢，溶解度随着温度的增加而增加，当温度过高时，溶液的氧化速度过快，从而影响原花青素的提取率。提取温度对松针中原花青素提取率的影响结果如图。图提取温度对松针原花青素提取率的影响提取温度吸光度由图可以看出原花青素的提取率在提取温度内随温度的增加而增加。随着提取温度的升高，原花青素的提取效果增强。因为温度升高，分子运动速度加快，渗透扩散溶解速度加快，同时高温可以引起细胞膜结构的变化，使原花青素由松针的外层细胞转移到溶剂中，但是高温也使原花青素的结构被氧化破坏，导致其提取效果下降。故选择合适的温度对实验起着至关重要的作用。由图可知，温度时，原花青素的提取效果较优。提取料液比对松针中原花青素提取率的影响由图可知，随着料液比的增加，原花青素的提取率随之提高当料液比增大到定程度时，提取效果趋于稳定，即定比例的溶剂已将有效成分基本溶出完全。考虑到后续加工中浓缩的成本，液料比选择不宜过高。由此可见，料液比为时，原花青素的提取效果较优。提取对松针中原花青素提取率的影响图料液比对原花青素提取的影响提取料液比吸光度图提取对松针中原花青素提取率的影响提取吸光度由图可知，原花青素在偏酸性的环境下较稳定，在值为左右提取效果较好，以后随着值的增加，含量反而下降，这是因为花青素在碱性条件下不稳定，原花青素发生了降解，已经生成了其他物质。因此，原花青素在使用和加工时应在弱酸性介质中进行，故以值为时提取效果最好。提取时间对松针中原花青素提取率的影响图提取时间对松针中原花青素提取的影响提取时间吸光度由图可知，原花青素提取效果随时间不同而不同。当提取达到定时间时，松针中的有效成分浓度达到平衡，提取效果最好随着时间的进步延长，其提取效果有所下降，因为原花青素在溶液中长时间受热可能使部分酚结构被破坏但是，如果提取时间过短，原花青素则不能很快从龙葵果细胞中溶出。因此，提取时间以为宜。正交试验结果与分析正交实验结果及极差分析以料液比，提取温度，提取时间，提取四因素设置的三水平正交实验及结果如表所示。由表中的极差大小可知，各因素对松针中原花青素提取率的影响顺序为提取温度提取时间料液比提取，故在实验过程中值大的因素要引起充分的重视，以免影响实验结果的准确性。由值可知，从松针中提取原花青素的最好设计方案为，即最佳工艺条件为，提取温度，提取时间，料液比。表正交试验设计方案和结果试验号料液比温度提取时间吸光度极差最佳提取工艺验证实验为验证所选工艺为最佳优化工艺，在最优条件下进行了次平行实验，所得湿地松松针原花青素的提取率见表。表最佳工艺条件下松针原花青素的吸光度实验序号吸光度平均值标准差由表可以知道，条件下松针原花青素的得率确实高于表中每项实验结果，确定为最佳工艺优化组合。结论与展望通过单因素实验和正交实验，确定用微波水提法从松针中提取原花青素的最佳提取工艺条件提取温度为，提取时间为，为，料液比为，该条件下松针中原花青素的吸光度为。微波辅助从松针中提取原花青素具有省时高效节能等优点，且提取物更易于分离纯化。对同类物质的提取有很大的参考价值。参考文献吉玲松针的新用途中国专利施立钦葡萄籽中原花青素提取工艺研究精细与专用化学品申鸿，杭湖，郝晓丽葡萄籽化学分析及其抗氧化性质的研究食品工业科技吉洪武葡萄厂下脚料综合开发利用途径食品开发与研究王献慨天然药物化学北京人民卫生出版社，卢汝梅，蒋先明酸催化半干微波法水解蚕蛹蛋白的研究天然产物研究与开发张力学，丁金昌，谷亨杰微波技术在有机合成中的应用合成化学李嵘，金美芳微波法提取银杏黄酮甙的新工艺食品科学汪兴平，周志，张家年微波对茶多酚浸出特性的影响研