结核分支杆菌培养仪操作维护规程 临床意义 分支杆菌的药敏试验有助于筛选有效的抗结核药物，提示药物所需的治疗剂量，供临 床医生和防痨医生参考同时，还可了解耐药株的流行情况，为抗结核药物的合理应用提 供试验依据。 涂片找抗酸杆菌操作规程 改良碱性复红法 检验目的 检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。 原理 结核菌麻疯杆菌耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有层脂或脂质之皮膜不易着 色，但经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予 染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最 初色素的颜色红色。 标本要求 标本类型病人的痰穿刺关节液腹水胸积液组织脑脊液分泌物尿 液等 标本采集见标本采集手册般须得深咳痰，其它无特殊要求。 标本储存和运输可室温保存室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环 境。 容器和添加剂类型 痰盒尿杯试管等 试剂 试剂名称结核菌染色液 试剂生产厂家广东省结核病研究所统配制 包装规格 试剂盒组成 试剂石碳酸复红液 试剂酸性酒精溶液 试剂亚甲基蓝溶液 仪器设备 奥林巴斯双目显微镜奥林巴斯落射荧光显微镜 校准程序 送市计量质量检测研究所校准 操作步骤 涂片经火焰固定，加石碳酸复红液染色分钟或更久需加温。 水洗之后尽可能将水沥干。 加酸性酒精溶液，脱色分钟。 水洗假如标本面还可以看到残存红色时，再加酸性酒精溶液脱掉红色为止。 加亚甲基蓝溶液染色秒，水洗，干燥。 镜检。 质量控制 参加我科质量管理组的质量控制活动。 干扰和交叉反应 麻风菌可能对检验结果产生影响。 生物参考区间 涂片未见抗酸杆菌 患者检验结果的可报告区间 涂片未见抗酸杆菌涂片见细长红色抗酸杆菌 临床意义 结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，其毒力主要是在机体中细胞内外生长与大量 繁殖的能力，细菌成分与其代谢产物引起免疫反应Ⅳ型导致系列组织学上的意义。 普通细菌培养鉴定操作规程 检验目的 做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导 临床治疗及预后和流行病学的调查。 原理 人体很多部位与外界相通，存在栖息菌群，但不致病，当菌群失调或分离到致病菌则 具有临床意义另外机体些部位是无菌的，如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操 作污染。 标本要求 标本类型血液，骨髓，脑脊液，胸水，腹水，尿液，等体液痰液，前列腺 液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。 标本采集见标本采集手册 标本储存和运输室温放置，室温运输并立即送检。人泌尿生殖道标本如白带前 列腺液等需临床标本接种于巧克力平板或特殊的运送培养基并置保温设备中送检。 标本拒收状态非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。 容器和添加剂类型 均使用灭菌器皿盛放标本腺 液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。 标本采集见标本采集手册 标本储存和运输室温放置，室温运输并立即送检。人泌尿生殖道标本如白带前 列腺液等需临床标本接种于巧克力平板或特殊的运送培养基并置保温设备中送检。 标本拒收状态非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。 容器和添加剂类型 均使用灭菌器皿盛放标本 试剂 试剂名称革兰氏染液氧化酶试剂触酶血平板麦康凯平板相关生化 试剂等 试剂生产厂家珠海黑马生物技术有限公司 仪器设备 接种针接种环酒精灯 黑马微生物鉴定系统。 显微镜隔水式恒温培养箱超净工作台三洋牌 二氧化碳培养箱台式离心机电子天平 校准程序 送市计量质量检测研究所校准 操作步骤 血液骨髓脑脊液等标本按照培养目的增菌培养小时后盲目接种或待自 动分析仪报警后接种。 接种以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选 择性培养基上,培养过夜，观察结果。 涂片肉眼见细菌生长，取生长物涂片做革兰氏染色 纯培养根据需要接种血平板巧克力中国蓝麦康凯或厌氧平板过夜培养以 获得纯培养。 鉴定按照鉴定仪要求调配菌液浓度，细菌的鉴定见黑马微生物鉴定 系统 质量控制 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 生物参考区间 血液，骨髓，脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长其他标本如大便，痰液为 正常菌群或未见致病菌。 患者检验结果的可报告区间 细菌鉴定到种或属菌群调查报告比例。 临床意义 为医生提供病原学诊断，并为进步药敏实验提供依据。 尿液培养操作规程 检验目的 做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导 临床治疗及预后和流行病学的调查。患有泌尿系感染时，尿中的细菌数高于，以此 作为诊断泌尿系感染依据。 原理 使用黑马微生物鉴定系统，原理见鉴定系统操作规程。 标本要求 标本类型中段尿液。 标本采集见标本采集手册 标本储存和运输室温放置，室温运输并立即送检。 标本拒收状态非无菌方式采集的标本。 容器和添加剂类型 使用灭菌器皿盛放标本，不加任何防腐剂。 试剂 试剂名称革兰氏染液氧化酶试剂触酶血平板麦康凯平板相关生化 试剂等 试剂生产厂家珠海黑马生物技术有限公司 包装规格 试剂盒组成试剂龙胆紫液试剂碘溶液试剂脱色液试剂沙黄 溶液 仪器设备 接种针接种环酒精灯 黑马微生物鉴定系统 显微镜隔水式恒温培养箱超净工作台三洋牌 二氧化碳培养箱台式离心机电子天平 校准程序 送市计量质量检测研究所校准 操作步骤 细菌的分离培养用接种环取标本接种于血平板及麦康凯琼脂培养基， 培养过夜，观察结果。菌落生长者做菌落计数，并挑取优势菌菌落做纯培养。若初次分 离菌落单且生长较多时可直接做鉴定 涂片取菌落涂片做革兰氏染色，确认时或以及是球菌还是杆菌球杆 菌。 细菌鉴定及药敏实验革兰氏阴性杆菌做氧化酶试验必要时做动力试验，氧 化酶试验阳性或氧化酶试验阴性但不利用葡萄糖不产酸者使用非发酵鉴定测试板氧化酶 试验阴性者则使用肠杆菌科细菌测试板革兰氏阳性球菌主要是成簇或四联排列，触 酶试验阳性者接种葡萄球菌微球菌鉴定药敏测试板触酶试验阴性者则接种链球菌鉴定 药敏测试板革兰氏阴性双球菌，氧化酶试验阳性者使用淋球菌鉴定药敏试剂盒测试。 鉴定按照鉴定仪要求调配菌液浓度，见黑马微生物鉴定系统 全自动细菌鉴定药敏分析系统操作规程。 质量控制 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 生物参考区间 正常人体膀胱中尿液无菌。 患者检验结果的可报告区间 细菌鉴定到种或属，菌落计数高于。 临床意义 为医生提供泌尿系感染的病原学诊断。 微生物与血库 作业指导书 文件编号 第版 编制 审核 批准 生效日期年月日 人民医院检验科 目录 序号主题内容代号页号 微生物室作业指导书部分 结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定 涂片找抗酸杆菌操作规程 普通细菌培养鉴定操作规程 尿液培养操作规程 血液培养操作规程 黑马微生物分析系统操作维护规程 型隔水式恒温培养箱操作维护规程 结核分支杆菌培养仪操作维护规程 Ⅱ型生物安全柜操作维护规程 飞鸽牌离心机操作维护规程 血库作业指导书部分 血库工作制度 交叉配血凝聚胺法 血型鉴定生理盐水法 正定型和血型鉴定 型冰冻血浆解冻箱 修订页 序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期 结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定 检验目的 做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导 临床治疗及预后和流行病学的调查。 原理 若接种的培养管中有分支杆菌生长，管中的营养成分和氧气将不断被消耗， 培养管中的荧光显示剂将随着管内氧气浓度的变化而发生反应。旦培养管内氧气被利 用，管内荧光指示剂将在特定光源的激活下释放荧光。荧光强度记忆探测 器将每隔连续测定培养管内荧光强度，从而判断管内分支杆菌生长情况。 标本要求 标本类型深部痰液。 标本采集见标本采集手册 标本储存和运输室温放置，室温运输并立即送检。 标本拒收状态非无菌方式采集的标本。 容器和添加剂类型 使用灭菌器皿盛放标本，不加任何防腐剂。 试剂 试剂名称培养肉汤，营养添加剂，抑菌剂。 试剂生产厂家美国生物技术有限公司 包装规格 试剂盒组成培养肉汤，营养添加剂，抑菌剂 仪器设备 全自动分支杆菌培养仪美国生物技术有限公司。 酒精灯 显微镜超净工作台台式离心机 校准程序 送市计量质量检测研究所校准 操作步骤 见仪器操作维护规程结核分支杆菌培养仪操作维护规程 质量控制 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 生物参考区间 阴性 患者检验结果的可报告区间 阴性阳性， 药敏及菌种鉴定见结核分支杆菌培养仪操作维护规程 临床意义 分支杆菌的药敏试验有助于筛选有效的抗结核药物，提示药物所需的治疗剂量，供临 床医生和防痨医生参考同时，还可了解耐药株的流行情况，为抗结核药物的合理应用提 供试验依据。 涂片找抗酸杆菌操作规程 改良碱性复红法 检验目的 检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。 原理 结核菌麻疯杆菌耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有层脂或脂质之皮膜不易着 色，但经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予 染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最 初色素的颜色红色。 标本要求 标本类型病人的痰穿刺关节液腹水胸积液组织脑脊液分泌物尿 液等 标本采集见标本采集手册般须得深咳痰，其它无特殊要求。 标本储存和运输可室温保存室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环 境。 容器和添加剂类型 痰盒尿杯试管等 试剂 试剂名称结核菌染色液 试剂生产厂家广东省结核病研究所统配制