缓冲液条带包条薄滤纸张 氨基黑浓缩液瓶点样模具滤纸条盒 试剂储存条件及有效期贮存于室温或冰箱，不能冷 冻。有效期两年。 仪器设备 仪器名称电泳仪 仪器厂家法国公司 仪器型号 操作步骤 血红蛋白液制作抗凝血离心分钟，去掉血浆，用倍体积的 生理盐水洗涤红细胞次，若红细胞体积小于，需特别小心。取红细胞 加入溶血液造成溶血。震荡混匀秒钟，室温下培育分钟待测。 启动电泳仪 将加样器放在平板上，有数字的端向上。各加样孔加入溶血的样品， 分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内，齿端向上转运时用塑料齿保护架。 等待分钟，使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖，抬起电极和加样器支架。 使用时选择仪器的程序位于链盘左 侧。 从包装袋内取出缓冲条，拿出末端的塑料片，将缓冲条两端塑料片固定在电极 支架背侧的钉上，塑料片应紧贴支架。 取出凝胶板。将薄的滤纸轻轻吸去凝胶板表面的多余液体，然后立即丢弃滤纸。 在电泳仪温度控制板表面的边线内加蒸馏水或去离子水。凝胶面朝上，放置 凝胶板，边缘对齐边线。略略将凝胶弯曲，然后放平，使水均匀分布在凝胶板下面 而不含气泡。 降低支架，使缓冲条不接触到凝胶板。 从保温盒里取出加样器。取时拿保护框。折断加样器齿端保护框。将加样器放 在号位置。 关上电泳仪盖子，按下键盘左侧的绿色箭头键，电泳开始。 凝胶染色扫描 打开盖子 取出并丢弃加样器 升高两个支架，握住塑料端取出并丢弃缓冲条。 打开凝胶托架，平放，将干燥的凝胶片放入两层间，然后关上托架。 将凝胶支架放入染色池 取出凝胶支架，打开盖子，取出干燥的凝胶片。 在光密度仪的处或以黄色滤光片扫描测定。使用，或 光密度仪时，使片段的标记置于扫描板的标志处。 结果判断与参考范围 扫描得到的只是每种血红蛋白条带的相对浓度值。取出胶片后，首先清洁胶片的 背面。判断溶血液的浓度是否合适，主要看基质带的浓度，如基质带浓度过淡，说 明溶血液的浓度太淡。正常时浓度大约为基质带浓度的倍。 半岁≧,﹤,﹤ 个月 个月 脐带血﹤ 质量控制 建议测定每批样本时都附有控制品或含有血红蛋白和的血样本。 临床意义 检测地中海贫血 轻型轻度升高，大多在 中间型缺如，可达 重型，多低于或甚至 检测地中海贫血 标准型地中海贫血新生儿期可达，几个月后消失。 经煌焦油蓝温育后，少数红细胞内有包涵体。血红蛋白电泳无异常发现。 血红蛋白病在或电泳时，向阳极方向移动，泳速快于 在电泳时，仍向阳极方向移动。 血红蛋白胎儿水肿综合症占，可有少量。 及均缺如。 检测血红蛋白病引起临床注意的异常血红蛋白有四种和。 血红蛋白在碱性缓冲条件下血红蛋白的条带位于和片段之间 血红蛋白在碱性缓冲条件下血红蛋白，和的条带重叠在起。若 这片段﹥，应仪器的些程序处 于锁定状态。 最后染色后立即扫描测定。若欲保存，可用保护物覆盖后置于干燥暗处， 避免受热，可保存约个月。 精液常规检查 实验原理 纪录精液量颜色透明度粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计数 活动力活动率形态。 标本采集 标本采集前病人准备必须禁欲包括遗精和手淫天。这是因为少于 小时采取的精液，因相距时间太短，精液中精子的数量可能偏少，容易造成少 精症的假象。如果超过天，精子活率活力都有所下降，也可造成弱精子症的 假象。精液检查应间隔周或两周，要进行次检查。因为个人精子的产生 在年中，可因季节气候等,诸多因素的影响而有些变化。 标本种类精液 标本要求用清洁干燥小瓶收集，不应采用避孕套内精液。 标本储存立即送检。 标本运输室温运输，冬季需保温运输。 标本拒收标准久置标本，污染标本，避孕套内标本。 操作步骤 纪录精液量颜色透明度粘稠度和液化时间。 精子活动率取新鲜标本混匀后，在温玻片上用高倍镜观察个精子，计 数活动精子与不活动精子的比例，计算精子活动的百分率。 精子活动率活动精子数活动精子数不活动精子数 取上述新鲜湿片标本，观察精子的活动力，可按下列五级报告 级精子完全不活动，加温后仍不活动 级精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差 级精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动， 带有回旋 级为中速运动 级精子活动好，快速直线运动，很快超越个视野，活泼有力。 精子计数 于试管内加精子稀释液，吸液化精液，加入稀释液内摇匀。 充分摇匀后，滴入血细胞计数池内，静置，待精子下沉后，以精子 头部作为基准进行计数。 如精子数少，可计数两个大方格内精子数，总数乘以万即为每毫升精液 内精子数，再换算成报告。 如精子数多，可计数个中方格内精子数，总数乘以万即为每毫升精液 内精子数，再换算成报告。 精子形态观察革兰氏或瑞氏染色后用油镜观察。异常精子可有头部过大 过小尖细外缘不齐双头等中部消失分枝或肿胀尾部呈双尾，卷曲度 短或消失缺尾。 细胞红白细胞高倍视野。 ，平均。 其它成分精液中可有结晶体卵磷脂小体淀粉样体脂滴脱落上皮细 胞等。 结果判断与分析 般性状检查 量正常人次排精。 颜色和透明度正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色，液化后呈半透明乳 白色，久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症结核 和肿瘤，黄色脓样精液，见于精囊炎或前列腺炎。 粘稠度和液化正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状，在精液中纤溶 酶的作用下分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样，可能是精子数量减少， 见于生殖系统炎症，精液不凝固见于精囊阻塞或损伤如果精液小时后不液化， 可能是由于炎症破坏纤溶酶所致，如前列腺炎，精子不液化可以抑制精子活动力 而影响受孕。 酸碱度值。正常精液呈弱碱性，以利于中和酸性的阴道分 泌物，值小于或大于都能影响精子的活动和代谢，不利于受孕。 显微镜检查。 精子存活率排精后分钟，正常精子存活率应为，精 子存活率降低是导致不育的重要原因。 精子活动力正常精子活动力应在级以上，若的精子活动不良， 常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低，主要见于精索静脉曲张泌尿生 殖系统非特异性感染，应用些药物如抗疟药雄激素等所致。 精子计数正常人精子计数为，相当于次排出的精子总 数为。当精子计数值或次排精总数 为精子减少，超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精 子为无精症。见于先天性睾丸发育不全畸形或后天睾丸损伤和萎缩如睾丸结核 炎症淋病垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等输精管阻塞或是先天性 输精管及精囊缺陷，是导致少精或无精的重要原因，也是导致不育的重要原因。 检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后，连续检查无精子， 说明手术成功，如果结扎两个月后，精液中仍有精子，说明手术不成功。 精子形态正常精液中，异常形态精子应少于，如果精液中异 常形态精子数，将会导致不育，可能是由于精索静脉曲张血液中有毒代谢 产物铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。 如果精液中发现的病理性未成熟细胞，包括精原细胞精母细胞和发育不完 全的精细胞，提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。 如果精子凝集，提示生殖道感染或免疫功能异常。 注意事项 出现次异常结果，应隔周后复查，反复查次才能得出比较正确的结 果。 如低倍镜高倍镜检查均无精子，应将精液离心沉淀后再涂片检查，如两次 均无精子，报告无精子。 操作性能快速简便 方法局限性易受人为主观经验不足影响结果判断。 参考文献 中国人民共和国卫生部医政司编全国临床检验操作规程第二 版, 临检室作业指导书 文件编号 第版 编制 审核 批准 生效日期年月日 人民医院检验科 目录 序号主题内容代号页号 血红蛋白电泳检查电泳法 精液常规检查 粪便常规检查直接涂片法 粪便潜血试验定性纸片法 尿沉渣检查仪器法 血疟原虫厚血片检查法 血疟原虫薄血片检查法 尿人绒毛膜促性腺激素定性 阴道分泌物常规检查 小时尿沉渣计数 红细胞计数 白细胞检验 白细胞分类计数 血红蛋白检测 全血血细胞沉降率测定 红细胞比积的测定 平均红细胞体积检测 血小板测定 红细胞平均血红蛋白含量测定 红细胞平均血红蛋白浓度测定 尿液酸碱度测定干法学法 尿葡萄糖定性实验干化学法 尿蛋白定性测定干法学法 尿血红蛋白测定干化学法 尿胆原定性测定干法学法 脑脊液蛋白定性试验潘氏法 脑脊液外观检查目测法 脑脊液有形成分检查显微镜法 尿亚硝酸盐定性测定干法学法 凝血酶原时间测定 活化部分凝血活酶时间测定 凝血酶时间测定 血浆纤维蛋白原测定 骨髓巨核细胞计数 过氧化物酶染色法 糖原染色法 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 尿微量白蛋白定量 全血反应蛋白定量 尿乳糜定性检查 前列腺液常规检查玻片法 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间 异常白细胞检查显微镜法 异常红细胞检查显微镜法 浆膜腔积液粘蛋白定性检查 浆膜腔积液化学检查 浆膜腔积液外观检查目测法 浆膜腔积液有形成分检查 血球分析仪操作维护规程 血球分析仪操作手册 修订页 序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期 血红蛋白电泳检查电泳法 原理 血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每条链含有血红素和络合铁原子 的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称 之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括和。血红蛋白的结构分子 特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白， 其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。本实验在碱性条件下，以琼 脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基 黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别 有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红 蛋白异常有二种类型血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中 的条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。 标本采集 标本采集前病人准备受检者应空腹。 标本种类抗凝血 标本要求抗凝剂选用，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。常规静脉采血 ，加入含有枸橼酸钠溶液的干燥。清洁试管中，充分混匀。 标本储存储存于冰箱中