1、度测定是通过筛选量化部分地区最高多血管代表字段在放大对于每个肿瘤被数。实时半定量。总是孤立使用迷你包试剂盒根据制造商说明。互补脱氧核糖核酸合成从.到总使用上标二世第链系统存在逆向表达载体。定量定量酵素聚合反应技术分析,绿色染料表达载体和基因序列检测系统音箱生物系统公司被使用。相对量化是通过使用方法,对正常化。引物用于分析报告补充表。为分析底漆和周期蛋白表达式是应用生物系统公司购买。转导细胞与向量。短发卡向量编码针对人类或炒,作为个控制,采购从西格玛奥德里奇。向量股由瞬态三个质粒载体包装系统如前所述。对于或转导细胞,浓缩向量包含在靶细胞上清是分层,被播种到井文化板块在每好。在到在,上层是替换为毫升培养基。沉默评估进行了小时后转导。细胞稳定表达得到父母细胞电穿孔与.质粒,其次是选择在介质毫升。细胞与.细胞与内皮细胞共同培养触发了通路其它通路成分都被细胞表达了，包括，。
2、明血管生成在癌症中新作用。中文字出处,.肿瘤和内皮细胞之间肿瘤逃逸与交联相关摘要在生理血管形成和肿瘤血管形成中都有作用，它调节内皮细胞的活性。在肿瘤细胞中作用于信号通路的效应表达依然存在，然而，这没有被广细胞恢复和用于进步分析。在组实验中,我们涂层与可溶性重组小鼠井研发系统用于毫升在后,洗井与和所有细胞被添加在他们适当培养基和培养在提取和转录分析。致瘤性试验。小鼠是购自公司。关于动物和他们护理程序符合机构指导方针,符合国家及国际法律和政策欧共体理事会指令,年月日,年。建立肿瘤,周老来周老雌小白鼠注射.细胞南卡罗来纳州在总容积为两背外侧侧面,肿瘤生长两翼相提并论。在实验中,旨在调查表达和灌注动力学血管,细胞注射结合人工基底膜。测试疗效封锁,麦布最初是与肿瘤细胞和随后皮下注射给每。在组实验中,小鼠注射南卡罗来纳州两侧与.或细胞。结果肿瘤检查每周次,以卡尺肿瘤体积与下。
3、射南卡罗来纳州两侧与.或细胞。结果肿瘤检查每周次,以卡尺肿瘤体积与下面公式计算肿瘤体积.,其中是最长直径,是最短直径,.是个常数来计算体积个椭球体。光学成像肿瘤。进行在体成像,结合肿瘤细胞与向量编码基因记者获得细胞群。细胞被注入在麻醉小鼠南卡罗来纳州。注射后立即和几个时间点之后,获得图像使用探索系统通用电气医疗集团在个固定积分时间.秒和扫描步骤.毫米,激光功率值是适应达到光子最大激光功率。分析图像进行探索使用软件通用电气医疗集团个是手动选择感兴趣区域周围信号强度。荧光计算为总强度归化计数数控面积平方毫米。免疫印迹分析。细胞于.到聚丙烯酰胺凝胶中酶解分离蛋白质被孵育在毫安到硝酸纤维膜。都使用个兔多克隆抗体对人类,只兔子单克隆抗体对人类细胞信号技术,个兔多克隆抗体对自行,个兔多克隆或鼠标多克隆购自公司,其次是杂交与,稀释或辣根过氧化物酶结合抗体淀粉微球。抗原被确定使。
4、中，这些细胞由胞内域转导或加强或信号通路表达之后形成。我们通过肿瘤模型证实通过微环境相互作用可以调节活性，揭示了其在肿瘤血管形成中新作用。材料和方法细胞系和体外培养。人类淋巴细胞细胞株和从美国购买。细胞哥伦比亚大学提供。所有细胞系是生长在补充和谷氨酰胺生命技术完整。基本成纤维细胞生长因子细胞已经得到人类逆转录病毒载体介导转移到亲代细胞,作为详细其他地方。是个细胞系来源于成长肿瘤注射获得父母细胞成肥胖症患者糖尿病严重结合南卡罗来纳州免疫缺陷点头小鼠存在外源性。细胞系源自个转移性结直肠癌,生长在完整。细胞不是在小鼠肿瘤发生点头下面描述实验条件下,肿瘤发生变异细胞,称为,获得从肿瘤发生在点头小鼠身上注射后父母南卡罗来纳州细胞在基底膜基质加上白介素。在小鼠皮肤微血管线获得博士维奇单独训练马里奥内格研究所。细胞在培养补充,中和谷氨酰胺,必需氨基酸,中和丙酮酸,增长补充西格。
5、卡罗来纳州在总容积为两背外侧侧面,肿瘤生长两翼相提并论。在实验中,旨在调查表达和灌注动力学血管,细胞注射结合人工基底膜。测试疗效封锁,麦布最初是与肿瘤细胞和随后皮下注射给每。在组实验中,小鼠注射南卡罗来纳州两侧与.或细胞。结果肿瘤检查每周次,以卡尺肿瘤体积与下面公式计算肿瘤体积.,其中是最长直径,是最短直径,.是个常数来计算体积个椭球体。光学成像肿瘤。进行在体成像,结合肿瘤细胞与向量编码基因记者获得细胞群。细胞被注入在麻醉小鼠南卡罗来纳州。注射后立即和几个时间点之后,获得图像使用探索系统通用电气医疗集团在个固定积分时间.秒和扫描步骤.毫米,激光功率值是适应达到光子最大激光功率。分析图像进行探索使用软件通用电气医疗集团个是手动选择感兴趣区域周围信号强度。荧光计算为总强度归化计数数控面积平方毫米。免疫印迹分析。细胞于.到聚丙烯酰胺凝胶中酶解分离蛋白质被孵育在毫安到硝。
6、公式计算中文字出处,.肿瘤和内皮细胞之间肿瘤逃逸与交联相关摘要在生理血管形成和肿瘤血管形成中都有作用，它调节内皮细胞活性。在肿瘤细胞中作用于信号通路效应表达依然存在，然而，这没有被广泛认识。这里，我们报道了人细胞急性淋巴细胞白血病或结直肠癌细胞从休眠中逃逸与肿瘤微环境中表达和肿瘤细胞中增加信号通路相关。介绍许多研究解释了通路在血管形成作用和减弱活性导致潜在血管缺陷机制。然而，在肿瘤血管中也发现，些学者最近报道了干扰交联可能影响肿瘤血管形成和生长。这些研究主要集中在了内皮细胞特异性通路，而在肿瘤细胞通路中可能作用还没建立起来。我们将肿瘤休眠实验模式来研究这个问题。因为细胞表达受体和在脱调节病理状态，我们建成了个细胞休眠子。事实上，激活突变已发现在人中大于，并且蛋白过表达也在所有病例中报导，除去位点严重异常情况。这些细胞中激活致瘤能力也在鼠骨髓前体细胞白血病发生过程。
7、，如前报道，然而，除了，剩下都不被诱导。所有实验都进步证实了可触发通路。与后共同培养有保护效应，延缓细胞凋亡。但加抗抗体后，这种效应就被清除了。类似情况也出现在细胞。它们说明了细胞能为在压力情况下细胞提供与相互作用有关存活信号。中和反应抑制了肿瘤生长并减少了活化。向肿瘤注射抗抗体，导致了肿瘤大小和质量减少。水平调节影响细胞存活，和导致肿瘤形成。讨论进来很多研究强调了在肿瘤血管形成作用，显示了阻断治疗肿瘤潜力。这里，我们首次研究了在肿瘤休眠调节。我们之前发现细胞缺乏血管生成并获得了个在鼠休眠表型，这种情况可被发送到肿瘤微环境血管源性转换信号打断。最近，又在缺血管细胞发现了些血管生成变异体，有增高肿瘤生成潜力。这些细胞表达受体，因此可用来进步研究通路上血管生成效应。通过实验模型，我们报道了休眠肿瘤缺乏表达，而恶性肿瘤有高表达，这和之前研究相符。发现主要在内皮细胞中表。
8、达。细胞无表达，可能些非内皮基质细胞也表达这种配体。些细胞液表达在巨噬细胞。关于表达动力学研究，在体内表达在肿瘤细胞注射之后很快就能检测到，领先于血管网供养和营养物质，支持了介导信号通路在肿瘤形成早期也起作用。这个研究主要发现时阐述了在肿瘤血管生成微环境中配体表达对肿瘤细胞通路调节作用。表达与活性水平之间在肿瘤中形成了强大联系，更重要是，体内中和作用明显抑制肿瘤细胞中通路也支持这个假说。此外，在细胞活化可被共同在内皮细或固定重组体培养而触发，被抗抗体阻断。尽管我们强调了在活性调节作用，但广泛认为有些受体和配体在内皮细胞表面表达，使邻近细胞和受体配体结合之间产生相互作用。因此，其他配体，不只是，可能激活细胞途径，这也许能解释为什么中和反应在体内和体外都不阻止活化。有趣是，当和活性形式都在白血病和大肠癌细胞中表达，肿瘤生成表型在两种模型获得都与信号选择性上调有关。考。
9、列检测系统音箱生物系统公司被使用。相对量化是通过使用方法,对正常化。引物用于分析报告补充表。为分析底漆和周期蛋白表达式是应用生物系统公司购买。转导细胞与向量。短发卡向量编码针对人类或炒,作为个控制,采购从西格玛奥德里奇。向量股由瞬态三个质粒载体包装系统如前所述。对于或转导细胞,浓缩向量包含在靶细胞上清是分层,被播种到井文化板块在每好。在到在,上层是替换为毫升培养基。沉默评估进行了小时后转导。细胞稳定表达得到父母细胞电穿孔与.质粒,其次是选择在介质毫升。细胞与.细胞恢复和用于进步分析。在组实验中,我们涂层与可溶性重组小鼠井研发系统用于毫升在后,洗井与和所有细胞被添加在他们适当培养基和培养在提取和转录分析。致瘤性试验。小鼠是购自公司。关于动物和他们护理程序符合机构指导方针,符合国家及国际法律和政策欧共体理事会指令,年月日,年。建立肿瘤,周老来周老雌小白鼠注射.细胞南。
10、酸纤维膜。都使用个兔多克隆抗体对人类,只兔子单克隆抗体对人类细胞信号技术,个兔多克隆抗体对自行,个兔多克隆或鼠标多克隆购自公司,其次是杂交与,稀释或辣根过氧化物酶结合抗体淀粉微球。抗原被确定使用发光可视化工具包皮尔斯。信号强度测量使用生物化学发光检测系统。下面数字显示乐队之间比例蛋白质或和或乐队规范化设置在中获取值从个选定样本。评价表达,形成血管,灌注标记。对免疫荧光分析,石蜡包埋或冷冻肿瘤部分被孵育要么鼠或兔主要抗体,水洗,孵育山羊萤石,萤石,或萤石表达载体二次抗体。测量灌注,老鼠注射右旋糖酐牛血清白蛋白表达载体,鼠标分钟前牺牲。灌注血管被可视化在共焦显微镜蔡司。细胞核被沾到三碘化物表达载体。激光扫描共聚焦显微镜进行了个蔡司显微镜使用氩和氦氖激光源。分析了不同字段数,每节之间和,根据肿瘤大小,至少四个部分每个时间点进行了分析。在放大图片收集或。微脉管密度偏移速。
11、玛奥德里奇和肝素毫升。显示调节血管新生因子配体缺口由多个,拥有细胞首先培养在缺乏和肝素增长补充,然后在补充与血管内皮生长因子和用于。在实验,所有细胞分层在小时细胞预处理与血管新生因子,与上面介绍。在些井,单克隆抗体被添加到井由医生燕,基因泰克最终浓度,.毫升。小时后,所有细胞恢复和用于进步分析。在组实验中,我们涂层与可溶性重组小鼠井研发系统用于毫升在后,洗井与和所有细胞被添加在他们适当培养基和培养在提取和转录分析。致瘤性试验。小鼠是购自公司。关于动物和他们护理程序符合机构指导方针,符合国家及国际法律和政策欧共体理事会指令,年月日,年。建立肿瘤,周老来周老雌小白鼠注射.细胞南卡罗来纳州在总容积为两背外侧侧面,肿瘤生长两翼相提并论。在实验中,旨在调查表达和灌注动力学血管,细胞注射结合人工基底膜。测试疗效封锁,麦布最初是与肿瘤细胞和随后皮下注射给每。在组实验中,小鼠注。
12、虑到这两个成员之间交联，休眠肿瘤中基础表达由维持是可能。活性似乎细胞存活条件，这是由于清除和靶点基因在肿瘤细胞表达，沉默在细胞存活力阴性结果但还不足以和需要结合和信号恶性表型比较。表达在大肠癌细胞里是下调，由于些未知原因，这可能说明在两种模型分析中在肿瘤生成有不同作用。在有病人，表达非常普通，在这种肿瘤发现大约，包括分子和免疫表型。假设，在活化可能是或其他在骨髓微环境配体表达引起。这样来，在三份淋巴瘤样本细胞微环境中发现表达显得很重要，它是种罕见骨髓外有类似物淋巴瘤。触发受体就像传递个生存信号给细胞。为了支持这种假设，我们发现升高途径，在恶性肿瘤中它有个确定保护作用避免凋亡。升高水平可解释凋亡细胞减少。尽管癌细胞通常可以诱导血管生成转换，和它配体在内皮细胞相互作用可通过微环境调节瘤细胞行为，这些陈述在我们关于大肠癌细胞研究里。能通过肿瘤内皮细胞相互作用调节发现说。
参考资料：
（外文翻译）肿瘤和内皮细胞之间肿瘤逃逸与Notch3_Dll4交联相关（外文+译文）