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用天根生化科技北京有限公司的反转录试剂盒并按照说明书进行反转录操作，获得。
将获得的放在保存。
将获得的目的基因克隆到大肠杆菌中并进行测序。
将测序结果与进行分析。
利用在线软件进行蛋白质级结构分析。
通过网站中对蛋白功能域进行预测。
材料与方法材料以高感品种与高抗品种为试材，在延边大学农学院温室进行育苗，待烟苗长至叶期移栽至营养钵中，烟株长至片叶时进行人工接种病毒。
病毒叶由延边朝鲜族，再转化到感受态细胞中，挑取阳性单菌落进行液体培养，后稀释划线。
酶切验证正确后送到生工生物工程公司进行测序。
生物信息学分析采用将测序后得到的序列进行同源性分析，并对目标序列编码的蛋白质序列进行分析。
利用在线软件对蛋白质进行理化性质分析。
蛋白质亚细胞磷酸化位点可能对修饰该蛋白的结构或功能起着重要作用，同时也能参与该蛋白的活性调控。
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使用在线和高抗品种为材料，克隆基因，并进行生物信息学以及相对表达量分析。
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烟草基因克隆与生物信息学分析烟草工业论文。
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的磷酸化位点有个，较的磷酸化位点多个农民脱贫问题，同时也大大提高了我国的财政税收。
但烟草容易发生病虫害，严重影响产量。
当烟草感染马铃薯病毒后，会造成烟株花叶，脉带坏死，植株畸形矮化，严重影响植株的生长发育，这对烟草的产量造成了不可逆的伤害。
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酸分析发现，蛋白为非跨膜亲水性蛋白，无信号肽，可能定位在细胞质，属于家族蛋白，和分别有个和个磷酸化位点，者均有个糖基化位点，进化分析显示与辣椒和茄子的亲缘关系最近。
关键词基因克隆植株畸形烟草生物信息学分析烟草作为我国重要的经济作物之，不仅能够解决边远地，共个。
的磷酸化位点有个，较的磷酸化位点多个。
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摘要翻译控制肿瘤蛋白广泛分布在真核生物中，其表达在翻译和转录水平上受控制。
近年来，在植物中对研究集中在植物生长与抗逆性方面。
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接种时，选取长势致的烟株，用石英砂在叶片划出伤口，用棉签蘸取病毒液涂抹在伤口，在温室中培养。
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采用天根生化科技北京有限公司的反转录试剂盒类蛋白为稳定蛋白脂肪指数为，亲水性总平均值为。
感病材料蛋白由个氨基酸构成，分子质量为，等电点值为带负电荷残基总数为，带正电荷残基总数为，分子式为不稳定指数为，推测这类蛋白为稳定蛋白脂肪指数为，亲水性总平均值为。
材料与方法材料以高感品种与高抗品种据库进行对比发现，与已公布的基因序列登录号为致性为，证实所得到的序列为烟草基因。
与的片段长度都为，者均有完整的开放阅读框，编码个氨基酸。
通过对和基因序列与蛋白质进行对比，发现者基因序列存在第位，位，位，位，位，位，位存在处碱基突变图，蛋治州农业科学院烟草研究所提供，将病叶放入干净的研钵中，加入磷酸缓冲液进行研磨，汁液全部磨出后过滤掉残渣，最后用磷酸缓冲液定容至，制成病毒液，放在冰箱备用。
接种时，选取长势致的烟株，用石英砂在叶片划出伤口，用棉签蘸取病毒液涂抹在伤口，在温室中培养。
方法的提取与反转录接种后位采用在线软件。
使用在线软件对蛋白进行跨膜结构预测。
利用在线软件蛋白进行信号肽预测。
使用在线软件对蛋白进行疏水性亲水性预测。
使用在线软件进行蛋白质磷酸化位点预测。
利用在线软件对蛋白进行葡萄糖糖基化位点预测。
利用在线软件对蛋白级结为，下游引物为。
分别以和的为模板进行扩增，程序为变性，变性，退火，延伸，进行个循环之后延伸。
将结果凝胶电泳检测，回收后连接
烟草TCTP基因克隆与生物信息学分析（烟草工业论文）
