1、期和代细胞，提取细胞总蛋白并测定其浓度，然后用分离蛋白，转膜，封闭，用特异性抗孵育过夜，结合二抗后，用化学发光法检测相关蛋白磷酸化水平及其表达情况。抑制表达选取含有完全培养液连续培养第代细胞，加入特异性抑制剂分别作用两天五天后，检测相关蛋白磷酸化水平及表达改变情况及细胞恶性转化程度。结果低剂量连续慢性处理致细胞恶性转化分别用含完全培养液连续培养细胞周，从代开始表达明显升高，细胞迁徙转移能力逐渐增强且代细胞形态明显改变，细胞生长速度加快，倍增时间显著缩短与此同时，染毒细胞能在软琼脂培养基上形成更多更大细胞集落，说明此时细胞具有恶性表型。低剂量连续慢性处理致细胞恶性转化过程中及通路变化情况结果发现，在染毒中后期代代随着染毒细胞代数增加，表达逐渐增加活性则在染毒初期代明显升高，在随后暴露过程中水平呈现先下降后上升趋势，代达最高点之后活性逐渐降低，在代时活性明显低于对照细胞。在染毒中后期，表达水平逐渐升高，而蛋白表达没有明显变化。结果提示诱导产生激活表达可能参与到表达升高中。信号通路对低剂。
2、正确方向。你们存在，让我安心，从不惧怕。感谢我家人和朋友们，感谢你们对我无私奉献和支持，感谢所有关心和帮助过我人。时光飞逝，带着三年沉淀和积累，即将迈向新征程。我想，生活每段经历，相识每个人，都给我过去和未来增添了浓墨重彩笔，有你们真好！马园年月于苏州大学独墅湖校区低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究作者马园学位授予单位苏州大学引用本文格式马园低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究学位论文硕士低剂量亚砷酸钠致硕士学位论文论文题目低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究研究生姓名马园指导教师姓名安艳教授专业名称卫生毒理学研究方向环境毒理学论文提交日期年月低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究中文摘要低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究中文摘要目是交联包膜蛋白前体，其不仅作为表皮角质细胞早期分化标记，同时也是鳞状上皮细胞终末分化标记。研究表明，在多种肿瘤呈现高表达状态，在肿瘤诊断中发挥重要作用。然而其在肿。
3、活，憧憬着切未知美好可更多是对过去三年时光留恋，舍不得三年生活点点滴滴，舍不得起早贪黑却仍不尽人意实验，舍不得陪伴我成长良师益友，舍不得弥漫着欢笑与泪水分分秒秒。份答卷，镌刻着三年辛勤与汗水轻轻划上个句号，故事落幕，离别也悄然降至。此时此刻，唯有满满感谢能代表我心情。首先，我要感谢我导师安艳教授。安老师深厚学术积累，严谨治学态度，精益求精敬业精神，刚正不阿高尚品质，都将成为我终生追求治学楷模。从论文选题到论文框架，从初稿完成到论文反复修订，无不是在安老师倾心帮助下步步完成。当我感到失望迷茫时，安老师深切关怀与耐心指导让我再次鼓足勇气继续前行。在毕业论文撰写时，尽管字斟句酌，但仍觉笔力欠缺疏漏颇多，在对安老师表示诚挚感谢同时更有深深惭愧。卫生毒理学教研室严谨科研态度融洽人际关系，为我营造了个良好学习氛围。在这里我要衷心感谢童建教授，曹毅副教授李建祥副教授李冰燕副教授陈涛副教授，聂继华老师和张洁老师对我实验和生活上给予支持与帮助，让我积累信心，不断改变自我，不断进步。另外，还要特别感谢劳动与环境卫生教研室田海林副教授，信丽丽老师对我实验与生活给予关怀和支持，感谢苏州大学医学部公共卫生学院其他教研室老师给予我支持和鼓励。感谢学院芮秀文书记，张永红院长，徐勇副院长，钟宏良主任，王维芳老师，何燕老师以及班主任饶永华老师在生活学习和科研等各方面给予关怀和帮助。感谢杨旭同学三年以来在实验。
4、题及项目中日国际合作课题“不同人种通过不同途径暴露于不同形态砷化合物与砷致癌危险度间关系研究”日本文部科学省资助项目。苏州大学国家自然基金预研课题资助项目“饮水型慢性砷中毒氧化应激机制及防治研究”。中国科学院研究生院“国家环境污染物健康风险名录生物分册”，环保部专项计划项目。高等学校博士学科点专项科研基金博导类。江苏省普通高校研究生科研创新计划。江苏省高等学校大学生创新创业训练计划重点项目。发表论文马园,王大朋,许熙国,杨旭,等活性氧丙二醛及超氧化物歧化酶在致人皮肤角质形成细胞恶性转化过程中动态变化卫生研究已录用马园,王大朋,杨旭,等亚砷酸钠致人皮肤角质形成细胞恶性转化模型建立中华地方病学杂志地方病学分会第七届委员会青年委员会学术会议论文集Ⅱ区Ⅱ区,攻读硕士学位期间科研成果低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究杨旭,王大朋,许熙国,马园,王小娟,朱震,赵莹莹,陈敏,许菲菲,付乐,朱继刚,高芬芳,安艳亚砷酸钠致人支气管上皮细胞恶性转化过程中氧化应激指标变化环境与健康杂。
5、瘤发生过程中不同阶段表达变化及相应变化机制目前尚不清楚。本研究以低剂量亚砷酸钠长期染毒致永生化人角质形成细胞,恶性转化细胞模型为研究载体，检测此过程中表达动态变化，并以信号通路为切入点探讨引起表达变化分子机制。方法建立低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化模型以细胞为研究对象，常规培养后，再分别加入含有完全培养液连续培养直至代约周后，观察检测细胞恶性程度。细胞生长动力学实验分别收集传代对照和染毒和代处于对数生长期细胞，接种相同数量细胞于二十四孔板中，每天计数，连续六天，最后计算细胞倍增时间。软琼脂克隆形成实验将代染毒组和传代对照组细胞分别与低熔点琼脂糖培养基等体积混合后，铺于含有低熔点琼脂糖下层培养基上，凝固后，表面加入适量完全培养液，培养，每换次液，培养过程中动态观察，周后终止培养并停止计数。氧化应激指标检测收集染毒组处于生长对数期和代细胞，采用流式细胞仪检测不同代数细胞内活性氧,水平。中文摘要低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究检测蛋白表达收集染毒组和对照组处于生长对数。
6、劳动与环境卫生教研室田海林副教授，信丽丽老师对我实验与生活给予关怀和支持，感谢苏州大学医学部公共卫生学院其他教研室老师给予我支持和鼓励。感谢学院芮秀文书记，张永红院长，徐勇副院长，钟宏良主任，王维芳老师，何燕老师以及班主任饶永华老师在生活学习和科研等各方面给予关怀和帮助。感谢杨旭同学三年以来在实验和生活中给予帮助，同门亦是缘分，起时光终将成为美好回忆。感谢师兄王大朋许熙国，师姐刘星金洹宇在课题中给予指导和生活中给予帮助感谢师弟朱震，师妹王小娟邓晗依和李春春在实验中给予协助因为有你们，有这样个小家庭，回忆也变得更加温馨。感谢同学陈清清王旭吉永新纪雅慧王萍杨勇孙萍孙金鹏陈佳红孙斌，感谢低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究致谢你们对我实验和生活支持。感谢你们给我枯燥生活增添了乐趣，很高兴能与你们相识并共同渡过了三年时光，生活因为有你们而变得精彩。感谢我好友刘淑敏张玉彭欢杨果谢金明，感谢你们给我生活上照顾和关心，物质上支持和帮助，你们就像重重迷雾中那抹星光，总能指引我找到。
7、志杨旭,王大朋,马园,许熙国,朱震,王小娟,安艳恶性转化发生后通路改变研究中华地方病学杂志地方病学分会第七届委员会青年委员会学术会议论文集参加学术会议参加全国时间生物医学基础与前沿学习班年月，江苏，苏州中华医学会地方病学分会第七届委员会青年委员会学术会，分会发言年月，福建，福州低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究中英文缩略语对照表中英文缩略语对照表英文缩写英文名称中文名称过硫酸铵亚砷酸钠二甲亚砜苯甲基磺酰氟十二烷基磺酸钠四乙基乙二胺三羟甲基氨基甲烷磷酸盐缓冲液增强化学发光氨基端激酶丝裂原活化蛋白激酶达尔伯克改良伊格尔培养基辣根过氧化物酶基质金属蛋白酶聚丙烯酰胺凝胶电泳胎牛血清缓冲盐溶液人支气管上皮细胞人胚肺成纤维细胞人永生化角质形成细胞超氧化物歧化酶活性氧致谢低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究致谢燕子去了，有再来时候杨柳枯了，有再青时候桃花谢了，有再开时候。时光去了，就没了回来时候。沉思良久，饱含着憧憬和不舍。憧憬着光明前程，憧憬着舒适而安逸生。
8、,目录引言第部分亚砷酸钠致细胞恶性转化模型建立材料与方法材料实验方法结果低剂量连续慢性染毒致细胞恶性转化形态学改变低剂量连续慢性染毒致细胞恶性转化表达改变恶性转化细胞生长动力学改变恶性转化细胞软琼脂集落形成讨论第二部分低剂量致细胞恶性转化过程中及通路变化情况材料与方法材料实验方法结果低剂量连续慢性处理致细胞恶性转化过程中表低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究英文摘要英文摘要低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究,目录引言第部分亚砷酸钠致细胞恶性转化模型建立材料与方法材料实验方法结果低剂量连续慢性染毒致细胞恶性转化形态学改变低剂量连续慢性染毒致细胞恶性转化表达改变恶性转化细胞生长动力学改变恶性转化细胞软琼脂集落形成讨论第二部分低剂量致细胞恶性转化过程中及通路变化情况材料与方法材料实验方法结果低剂量连续慢性处理致细胞恶性转化过程中表化中华医学杂志低剂量亚砷酸钠致细胞恶性转化过程中表达变化及其机制研究攻读硕士学位期间科研成果攻读硕士学位期间科研成果参与课。
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