平。
柱形代表至少三次实验均值标准差。
.，静态对照组与细胞受周期应变和比较。
.，细胞受周期应变和比较。
施加周期拉伸力后和裂解增加，减少。
因为可能参与到受周期应力人体细胞凋亡过程中，我们检测了周期应变对表达影响。
通过分析表明，与对照组相比，在.，来源于.。
伦理申明这项研究草案被上海交通大学伦理委员会通过，并获得了捐赠者位岁女性和两位岁男性家属同意声明，这符合宣言。
每种品系结果见，.细胞培养及处理如上所述，人体细胞从畸齿矫正后健康前磨牙组织获取。
组织从中间第病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡三牙根分离出，并用冲洗五次，每个捐赠者组织依附在培养瓶侧面。
组织用胰蛋白酶处理五分钟后以离心分离分钟，滤渣用.胶原酶在摇床中培养分钟。
离心三分钟后，滤渣加入含有，并用移液管加入抗生素和链霉素。
细胞放入培养基中培养，温度，二氧化碳浓度，在加抗生素传代。
传代次细胞被用于所有实验中，传代次细胞用抗波形蛋白和抗角蛋白作为特异性标记。
在周期应变试验中，人体细胞接种在胶原覆盖孔盘上，密度为细胞孔。
小时后聚集细胞血清饥饿，再用加载周期应变，以.，频率拉伸细胞和小时，未拉伸细胞以相同方式培养作为对照。
形态学变化分析通过倒置相差显微镜观察细胞在加载周期应变前后及对照组形态流式细胞仪测量凋亡细胞在加载病理周期性应变前后，用胰蛋白酶处理细胞，再用含血清培养基清洗后离心收集。
用和和悬浮细胞。
黑暗条件下室温培养分钟后，用流式细胞仪记录和绑定情况。
分析将培养在孔培养板上无周期性应变细胞刮入细胞溶解缓冲液，，蛋白酶抑制剂混合物样品在下离心分钟澄清，然后加入含辅助缓冲液中加热。
蛋白浓度取决于染色法实验室等样蛋白由凝胶电泳中分离出并被转移到聚偏二氟乙烯膜.条带与特殊初级抗体和用和免疫球蛋白抗体标记二级抗体杂交，.膜经冲洗几次后用波长红外成像系统扫描数据由软件分析。
干涉及抑制处理人体序列由中获得。
作用于由上海生物公司合成。
中针对序列是和.根据厂商说明，经小时培养后，在浓度达到时用将转染入细胞。
在温度，潮湿二氧化碳培养箱中培养细胞个小时，诱发周期性应变前将培养基换为。
非沉默作为阴性对照抑制研究中，施加周期性应变前用人体细胞与和特定抑制剂起预培养小时。
没用抑制剂细胞以相同条件培养。
病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡数据分析数据以三个独立实验方差标准差给出。
单向方差分析和检验被用于数据意义评测中.。
结果拉伸力改变了人体细胞形态体外培养细胞形态在周期拉伸下发生了变化。
细胞变得相互平行并且长轴与拉伸力方向垂直。
病理周期性应变引发人体细胞形态变化未施加周期性应变细胞排列是杂乱无章。
受到小时应变细胞排列方向致，并且长轴排列方向与周期力矢量方向是垂直。
黑色箭头显示了拉伸力方向原始放大，。
通过和染色分析人体细胞凋亡凋亡细胞通过和或仅示踪确定，包括坏死细胞和下阶段凋亡细胞早期进入凋亡细胞仅由染色，存活细胞不染色。
显示了和染色点图。
点图中左下象限表示存活细胞右下象限表示早期凋亡细胞右上象限表示后期凋亡细胞左上象限表示坏死细胞.人体细胞受到周期性应变后，凋亡细胞早期和后期比例相比于控制细胞有轻微上升，上升约。
在受到周期性应变后，因为细胞进入早期凋亡，凋亡比例有明显上升，上升约为。
病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡.在病理周期应变下人体细胞凋亡分析及细胞蛋白变化利用流式细胞仪分析含和染色人体细胞。
经和染色细胞由点图显示。
右下象限表示早期凋亡细胞，右上象限表示后期凋亡细胞。
无拉伸组小时应变小时应变小时每组凋亡细胞定量分析.，静态对照组与细胞受周期应变和比较。
.，细胞受周期应变与比较.对，和蛋白水平分析周期拉伸提升了裂解物与蛋白水平，而及蛋白水平未发生变化，蛋白水平降低。
定量分析人体细胞在周期拉伸力和后及裂解蛋白水平。
柱形代表至少三次实验均值标准差。
.，静态对照组与细胞受周期应变和比较。
.，细胞受周期应变和比较。
施加周期拉伸力后和裂解增加，减少。
因为可能参与到受周期应力人体细胞凋亡过程中，我们检测了周期应变对表达影响。
通过分析表明，与对照组相比，在.织平衡及正常发育必要条件。
在牙周组织中，应用生理大小力调节细胞突是正常组织维护基础。
与此相反，应用病理大小力可以诱导细胞凋亡。
在本次研究中，我们使用了可以提高不同拉伸力系统对细胞施加周期拉伸力，模拟体外细胞受到力。
我们实验目是研究拉伸力诱导细胞凋亡机制。
为了统计受病理学周期应变而凋亡细胞，我们使用了流式细胞仪记录被病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡和染色凋亡细胞个数。
我们发现由周期应变引发凋亡细胞个数随时间变化，对细胞施加病理周期应变比施加早期细胞凋亡比例高。
根据这结果和临床应用，人体细胞不应被施加超过病理周期应变如过多畸齿矫正力，否则细胞可能进入不可逆晚期凋亡甚至坏死。
人体细胞如何将周期应变转化为生物化学信号机制尚未研究清楚。
之前在对剪切力引发血管重建蛋白质组学分析表明可以对剪切力做出反应并调节血管平滑肌肉细胞迁移和凋亡。
因此，被认为参与到了人体细胞识别并转导细胞外周期应变刺激中。
是蛋白解离抑制因子成员，可对家族蛋白进行负调控，通过抑制和胞液膜移位。
我们结果表明周期应变抑制蛋白水平。
转染最低水平提高了细胞凋亡水平和与裂解程度。
这表明人体细胞在对周期应变做出反应过程中，在力传导和功能调节方面发挥了重要作用，这与在癌细胞和其他正常细胞发挥作用致，说明高表达有利于防止人体细胞凋亡。
篇最近已出版报告显示考虑到在凋亡作用，周期拉伸引发细胞凋亡可能由其控制，最近研究显示病理周期应变会引发时间依赖蛋白裂解上升，且与培养人体细胞凋亡有关。
是种抑制剂，能够显著减少裂解水平并抑制凋亡。
这些数据显示仅能通过信号传导路径抑制细胞凋亡而不是其他传导路径。
及其底物是细胞凋亡关键调节器，尤其是由裂解产生片段。
为了确认流式细胞仪统计结果，我们分析了和蛋白条带。
在受拉伸细胞中，裂解产物和裂解产物随时间增加而增加。
裂解产物量在细胞受拉伸力条件下与是否存在无关，但明显高于未受拉伸力细胞。
因为未抑制裂解为，所以我们认为是在处发挥作用，抑制了周期拉伸力引发人体细胞凋亡。
人体细胞受拉伸力后也发生了形态变化。
拉伸细胞比未拉伸细胞更长，但仍是纺锤状，并与力矢量垂线平行。
人体细胞受周期拉伸后排列方向也许是种自我保护机制，防止细胞变得过于瘦长，从而减少受到伤害。
机械力应用到牙齿时，细胞以垂直于力矢量方向排列也许是其基本排列方式。
综上所述，我们提供了有保护细胞不受周期应变而凋亡这新功能证据，并证明了在体外和凋亡过程中可以有效抑制被裂解。
在研究病理周期应变引发细胞凋亡机制中，我们提供了通过信号通路激活引发细胞凋亡这新观察角度。
我们进步工作将专注于确定那些对理解口腔内力学机制有重要意义抗凋亡分子。
病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡.通路调节由病理周期应变引发细胞凋亡增加图解抑制通路蛋白可以调节周期应变对细胞下游通路影响，但无法影响上游通路。
本次研究通过这个图解阐明信号分子分层关系。
辅助信息对人体细胞施加小时和小时周期应变后细胞凋亡分析第个供体第二个供体第三个供体人体细胞表达减少后凋亡分析第个供体第二个供体第三个供体人体细胞经特定抑制剂处理后凋亡分析第个供体第二个供体第三个供体对人体细胞施加小时和小时周期应变后蛋白分析第个供体第二个供体第三个供体人体细胞表达减少后蛋白变化分析第个供体第二个供体第三个供体人体细胞经特定抑制剂处理后蛋白变化分析第个供体第二个供体第三个供体病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡鸣谢本次实验由口腔肿瘤生物实验室和上海口腔重点实验室及上海交通大学附属第九人民医院资助，我们也对.，和宝贵建议和科学探讨表达诚挚感谢。
作者贡献提出并设计实验。
实验操作。
分析数据。
提供试剂材料分析工具。
论文编写。
参考文献略，来源于.。
伦理申明这项研究草案被上海交通大学伦理委员会通过，并获得了捐赠者位岁女性和两位岁男性家属同意声明，这符合宣言。
每种品系结果见，.细胞培养及处理如上所述，人体细胞从畸齿矫正后健康前磨牙组织获取。
组织从中间第病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡三牙根分离出，并用冲洗五次，每个捐赠者组织依附在培养瓶侧面。
组织用胰蛋白酶处理五分钟后以离心分离分钟，滤渣用.胶原酶在摇床中培养分钟。
离心三分钟后，滤渣加入含有，并用移液管加入抗生素和链霉素。
细胞放入培养基中培养，温度，二氧化碳浓度，在加抗生素传代。
传代次细胞被用于所有实验中，传代次细胞用抗波形蛋白和抗角蛋白作为特异性中文字出处，.病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡学部院电子信息与电气工程学部专业生物医学工程病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡，上海交通大学附属第人民医院口腔科上海交通大学附属第九人民医院口腔颌面外科，上海口腔重点实验室和上海口腔研究所上海闵行区中心医院口腔科摘要目周期应变会引发人体牙周膜细胞形态变化和蛋白表达。
但周期应变，尤其是过多周期应变是否会诱导细胞凋亡还不清楚。
若周期应变可以诱导细胞凋亡，其诱导机制也未被确定。
本次研究目是阐明病理周期应变诱发细胞凋亡分子层面机制。
材料及方法人体细胞来自于健康前磨牙组织，经过三到五次传代，这些细胞受到或个小时周期应变，频率为.，使用仪器为系统。
利用相差显微镜检测这些细胞形态变化。
利用流式细胞仪追踪和结合体及被碘化丙啶染色细胞，从而检测出凋亡细胞。
通过分析蛋白表达水平。
结果在病理周期应变下，凋亡细胞数量随时间增长。
受拉伸力细胞以相互平行方式排列，且细胞长轴与拉伸力矢量方向垂直。
在病理周期应变下，细胞裂解物和蛋白增加而蛋白解离抑制因子减少。
另外，通过转染减少表达会导致由拉伸力引发细胞凋亡数量增加且裂解物和蛋白水平上升。
抑制会阻止拉伸力引发细胞凋亡但不会影响蛋白水平。
结论总结果表明病理层面上周期应变不仅影响细胞形态，而且会通过通路诱发细胞凋亡。
在对病理周期应变诱发细胞凋亡机制研究方面，我们结果提供了种新见解。
简介在咬合加载或正畸牙移动时，牙周膜细胞会受到机械应力。
对机械应力产生反应是生物基本反应。
在功能加载下牙齿移动预测不仅是生物力学经典问题，而且对探索牙齿恢复假牙修复以及畸齿矫正手术新方法有着重要意义。
理解牙齿移动需要知道细胞力学特性。
细胞是连接牙齿和周围骨骼复杂软体组织，种常见观点认为细胞是牙齿移动和将力传导到支撑组织主要因素。
由周期应变引发细胞凋亡是齿根膜疾病中连接组织破坏重要因素。
轻微正畸力导致牙槽骨吸收和牙齿移位，但过度正畸力会引发过度周期应变，进而导致局部贫血病理周期应变通过通路引发人体牙周膜细胞凋亡组织透明变化及细胞死亡。
细胞死亡有两种机制是坏死，细胞新陈代谢和膜完整性受到主要破坏二是凋亡，凋亡是细胞内部自杀程序。
程序细胞死亡凋亡整合了多重生理学和病理学死亡信号，对长寿命哺乳动物调节组织更新有着重要意义。
许多凋亡信号通路已被证实，包括通路，家族通路，细胞色素信号通路和线粒体通路。
在这些信号通路中，家族通路被认为是最重要通路，因为许多信号通路最终激活是串联体。
是半胱氨酸蛋白酶家族成员，在细胞凋亡起着重要作用。
被激活后可以切开底物蛋白如，进而引发蛋白降解和细胞不可逆凋亡。
家族参与了细胞极性调控增殖粘附扩散细胞骨架组合及凋亡。
因为在人类肿瘤抗药物癌症细胞品系中频繁过度表达，所以可能是癌症细胞抗凋亡分子。
对于正常细胞，有研究显示在低剪应力引发平滑肌细胞凋亡这过程中起到了决定性作用。
因此，也被认为参与到人体内其他正常细胞如人体细胞凋亡过程中。
至今为止，还没有体外实验明确研究在病理状态下周期性应变引发人体细胞凋亡机制。
在这次研究中，我们评估了和蛋白在周期性应变引发人体细胞凋亡中作用。
首先，我们研究了周期性拉伸细胞形态和持续小时和小时病理层面拉伸力周期应变之间关系。
细胞应变后，我们立即发现细胞凋亡范围取决于其发生应变时间。
我们利用倒置相差显微镜观测凋亡细胞形态，并用流式细胞仪对每组凋亡凋亡细胞计数。
另外，我们利用对细胞中，和蛋白进行分析。
我们研究表明病理周期性应变通过信号串联体激活引发细胞凋亡。
实验材料及方法抗体和试剂和免疫细胞化学所用抗体包括单克隆
（外文翻译）病理周期应变通过RhoGDIαCaspase3PARP通路引发人体牙周膜细胞凋亡（外文+译文）
