1、体微卫星多态分析应用与环境生物学报谭杰,孙慧玲,刘萍,等个仿刺参地理种群遗传变异的微卫星分析水产学报杜博,龚世园,童馨,等皱纹盘鲍和盘鲍南方养殖群体遗传变异的微卫星分析南方水产高绪生,常亚青中国经济海胆及其增养殖北京中国农业出版社,常亚青,王子臣,孙培海,等虾夷马粪海胆的海区渡夏室内中间培育及工厂化养成中国水产科学常亚青,王子臣,宋坚,等四种海胆杂交的可行性及幼体早期发育的研究水产学报王子臣,常亚青虾夷马粪海胆人工育苗的研究中国水产科学王子臣,常亚青经济类海胆增养殖研究进展及前景海洋科学王丽梅,韩家波,许伟定,等中间球海胆与光棘球海胆杂交及子代人工育苗技术水产科学王丽梅,韩家波,董颖,等中间球海胆与光棘球海胆杂交子代的生长比较研究水产科学常亚青,王子臣,宋坚,等四种海胆杂交的可行性及子代。
2、胆的早期生长发育。结果表明，采用生殖调控可使不同海胆达到同步繁殖，在下各种海胆杂交组合的受精率与亲本亲缘关系有关，同时受到双亲繁殖适宜温度的影响,受大连水产学院本科毕业论文前言精率介于之间。王吉桥等于年月曾进行了不同密度虾夷马粪海胆与仿刺参投饵混养的试验,发现在静水精养下混养时海胆的特定生长率和成活率比单养高,水质稳定,适宜密度为每立方米。目前国内外对海胆形态学生物化学以及遗传学的研究都有报道，但有关分子标记技术在海胆研究上的应用的相关报道相比较少。等利用个微卫星标记分析了从大西洋北部至太平洋东北部个取样地点的绿海胆的遗传结构。常亚青等曾利用技术对种经济海胆基因组多态性进行了分析。丁君等采用磁珠富集法获得了虾夷马粪海胆的微卫星序列,利用软件设计引物,经筛选,应用其中的对微卫星引物获得了个。
3、作风，诲人不倦的高尚师德，严以律己宽以待人的崇高风范，朴实无华平易近人的人格魅力对我影响深远。不仅使我掌握了基本的研究方法，还使我明白了许多待人接物与为人处世的道理。在此，谨向导师表示崇高的敬意和衷心的感谢,感谢两位师兄，感谢你们在实验过程中对我的帮助，正是由于你们的帮助和支持，我才能克服个个的困难和疑惑，直至本文的顺利完成,最后，衷心感谢在校学习期间所有老师对我的栽培支持和鼓励，感谢我深爱的父母和直支持帮助我的亲戚朋友们,衷心地感谢在百忙之中参加此结题报告答辩的各位专家教授,大连海洋大学本科毕业论文参考文献参考文献李琪,木岛明博长牡蛎微卫星克隆快速分离及特性分析海洋湖沼徐鹏,周岭华,田丽萍,等从中国对虾中筛选微卫星标记的研究水产学报,尹绍武,廖经球,黄海,等海南近海点带石斑鱼野生和养殖。
4、重要参数，其大小可反映群体遗传变异程度的高低。通常，杂合度高的生物群体更容易适应环境变化，忍受自然选择压力并可能具有更多的优良经济性状。般认为，用于检测遗传变化的标记在群体中的平均杂合度的范围应该在之间才有实际意义。战爱斌等检测了仿刺参个微卫星位点的平均观测杂合度和平均期望杂合度。丁君等研究结果显示，个虾夷马粪海胆养殖群体的平均观测杂合度为，期望杂合度为，杂合度的平均观察值都低于杂合度的平均期望值，结果显示个虾夷马粪海胆养殖群体的遗传多样性较低，这可能与海胆养殖群体育苗时所取父母本海胆较少，且进行累代繁殖有关，海胆育苗养殖过程中的这些问题将导致海胆子代群体中亲缘关系较近，些杂和位点丢失，建议海胆育苗养殖单位在较大范围内，选择数量较多的亲本海胆繁育后代，以保证养殖群体的杂和度保持在个较高水。
5、，建立了稚胆材料的固定裂解及技术，丰富了中间球海胆分子遗传学研究内容。大连海洋大学本科毕业论文材料与方法第二章材料和方法实验材料于年月，分别由只海胆雌雄和只海胆雌雄建立中间球海胆混交家系，分别命名为和。受精后个月，在中间球海胆的稚海胆时期，和家系分别取样只和只，用酒精固定，小时后换次固定液即可，冰箱中保存，准备进行分子标记分析。实验方法提取将每只海胆分离开来，蒸馏水反复冲洗，分别放入离心管中。灭菌后的小剪刀在海胆的壳上剪个小口，然后加入裂解液，。加入蛋白酶恒温裂解后，升温到保持以灭活蛋白酶。裂解液放入冰箱中保存。扩增以稚胆的裂解液为模板，进行扩增，反应体系见表。表中间球海胆微卫星扩增反应体系反应体系需加体积海胆幼虫裂解液引物大连海洋大学本科毕业论文材料与方法反应条件预变性，分钟变性，秒退。
6、很难获得足够量的用于后续分子生物学研究。本实验参照前人在扇贝担轮幼虫中的研究报道，摸索出了适用于海胆稚胆阶段的裂解方法，并将裂解液直接用于扩增模板，进行了微卫星标记的扩增分析，得到了清晰的微卫星扩增带谱。微卫星扩增结果说明该方法可以得到较好的幼虫模板，可以用于后续的分子标记分析。该方法不需抽提可直接用于扩增，不但防止了抽提步骤引起的损失，而且简化了实验过程。另外，该方法不但可以将微小的幼虫阶段纳入到分子标记的研究中来,便于更全面的掌握海胆整个生命周期内的遗传结构变化动态,扩大了海胆遗传育种学的研究范围和研究内容，也为海胆标记辅助育种等遗传学研究工作提供了早期取样研究的实例，大大简化该方向的研究步骤，且节约了人力物力及宝贵的时间。亲本数目对海洋生物遗传结构的影响杂合度作为反映群体遗传变异的。
7、虾夷马粪海胆养殖群体的等位基因频率等位基因数杂合度及遗传距离和遗传相似性等遗传参数,研究个虾夷马粪海胆群群体间的差异,发现山东荣成群体与大连个群体间差异较大,群体间存在定程度的分化,将有可能逐渐形成新的地理种群。耿慧君等进行了中间球海胆野生和养殖群体遗传结构的微卫星分析，利用对微卫星分子标记对中间球海胆的个野生和个养殖群体进行了遗传多样性分析。邹林林等利用技术，对以光棘球海胆♀中间球海胆♂的代为材料，对与海胆壳径体质量和生殖腺质量等主要经济性状相关的分子标记进行筛选，并对这些数量性状与分子标记的相关性进行分析。结果表明,对引物共筛选出与壳径体质量生殖腺质量显著相关标记数分别为和个极显著相关标记数分别为和个。本研究采用微卫星标记技术，分析了由不同数目亲本所产生的两个中间球海胆群体的遗传结构。
8、。本实验所用海胆稚胆群体杂合度水平处于中等，但是用于产生这些个体的亲本数均较少，推测将会存在不同程度的等位基因丢失杂合度下降等的情况。万俊芬等利用标记技术探讨了不同的交配亲本数对鲍养殖群体遗传结构的影响，结果表明，亲本数少的群体的总位点数少于亲本数多的群体,后者的些低频位点在前者中丢失，同时群体的位点频率发生漂移，的低频位点数目减少而高频位点略有增加。另外统计了各群体的相似指数和杂合度，发现群体的相似指数低于,而杂合度高于群体。总之，群体的亲本大连海洋大学本科毕业论文讨论数减少会引起些低频位点丢失及位点频率发生漂移，同时亲本数过少会导致群体的杂合度暂时升高。等研究报道了海湾扇贝不同数目亲本所产生的后代的遗传结构变化，发现随着亲本数目的减少，出现了越来越严重的低频位点丢失和杂合度下降的现象。
9、目的中间球海胆群体遗传结构分析学生姓名指导教师专业名称所在学院年月目录摘要第章前言第二章材料与方法实验材料实验方法提取扩增数据统计与分析第三章实验结果微卫星扩增位点分析各位点等位基因情况遗传多样性分析第四章讨论海胆幼虫提取方法的优势海胆遗传学研究现状致谢参考文献大连海洋大学本科毕业论文摘要摘要本实验利用对微卫星引物，对由不同亲本数目所产生的中间球海胆群体进行了遗传结构分析。实验所用的两个海胆群体分别来源于个命名为和个亲本命名为，群体取只个体，群体取样只。所有海胆稚胆期采用直接裂解法提取基因组，裂解液直接进行微卫星扩增。结果表明群体扩增出个等位基因，平均有效等位基因数为，平均香浓氏指数为，平均奈氏杂合度为，群体扩增出个等位基因，平均有效等位基因数为，平均香浓氏指数为，平均奈氏杂合度为所有遗。
10、的早期发育水产学报王吉桥,程鑫,杨义等不同密度的虾夷马粪海胆与仿刺参混养的研究大连水产学院学报大连海洋大学本科毕业论文参考文献,常亚青,丁君,邢荣莲,等用技术对种经济海胆基因组多态性的研究中国水产科学丁君,李润玲,常亚青,等虾夷马粪海胆微卫星标记制备及对个养殖群体的遗传多样性分析分子科学学报耿慧君,周遵春,董颖,等中间球海胆野生和养殖群体遗传结构的微卫星分析水产学报邹林林,周遵春,董颖,等利用技术筛选与海胆数量性状相关显著的分子标水产科学万俊芬，包振民，刘广绪，等扇贝种间单对杂交代幼虫标记的分离方式高技术通讯战爱斌，包振民，陆维，等仿刺参的微卫星标记水产学报万俊芬，包振民，汪小龙，等亲本数目对鲍养殖群体标记位点及其遗传结构的影响水产学报,大连海洋大学本科毕业论文参考文献毕业论文不同亲本数。
11、退火温度秒④延伸，分钟循环从到共个循环下最后延伸分钟保存。扩增产物的电泳分离制胶丙烯酰胺贮备液丙烯酰胺固体,甲叉双丙烯酰胺加入超纯水，水浴搅拌溶解备用。超纯水定容至过硫酸铵过硫酸铵固体溶解于超纯水中，避光保存。④,四甲基乙二胺，避光保存。胶制备丙烯酰胺超纯水过硫酸铵灌胶胶配置好后，后立即灌胶，室温凝胶小时以上，胶厚约为。电泳组装电泳槽，放入缓冲液，于预电泳分钟，将产物与上样缓冲液混合，每个点样孔点样，电泳小时。染色和显色电泳结束后，将胶取下，用纯水冲洗次，染液溶于超纯水中染色分钟。再将胶用纯水冲洗次。配置显色液无水溶于超纯水中，因此可以在定程度上弥补在抽提过程中的丢失。而对于海洋生物发育早期来说，大多个体组织较小，需要显微观察才能分辨其形态结构，如果采用传统的酚氯仿抽提法，由于大量的损失。
12、。本研究也发现亲本数目较少的群体虽然等位基因数量与群体相同，但基因型数量少于群体。两组之间杂合度尚未出现显著差异，但群体杂合度略高于群体，推测也出现了杂合度暂时升高的情况，这些研究结果与以上报道相似。随着海胆人工育苗广泛开展，累代养殖和亲本数目较少的情况时常出现，该研究对中间球海胆不同亲本数目所产生的群体进行了直接裂解和微卫星扩增分析，比较了两个群体的基因频率和各遗传学指标，为评价中间球海胆养殖现状以及遗传育种工作提供了基础资料。大连海洋大学本科毕业论文参考文献致谢本论文从选题的确定，论文的写作修改到最后定稿都是在指导老师秦副教授悉心指导下完成的。秦老师多次询问实验进程，帮我分析解决我在实验中遇到各种难题，不厌其烦，精心点拨，热忱鼓励。秦老师渊博的专业知识，严谨的治学态度，精益求精的工作。
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【毕业设计】不同亲本数目的中间球海胆群体遗传结构分析