1、“.....剥离好的茎尖经预培养后图,进行农杆菌侵染,并共培养图然后转移到筛选培养基上筛选图,不具潮霉素抗性的茎尖逐渐褐化死亡将经筛选后成活的茎尖转移到增殖培养基上图,促进芽增殖与指标表。正确认识农杆菌及虎杖茎尖转化的科学管理模式论文原稿。虎杖茎尖对潮霉素的敏感性本研究以潮霉素作为筛选标记,为有效筛选抗性苗,将制备的茎尖分别置于不同浓度梯度的潮霉素培养基上进行筛选,观察外植体的色泽变化生长状态和存活情况,试验结果见表和图。从表和图结果可以看出,对照组的虎杖茎尖生长迅速,并分化出绿色的芽,芽的存活率为随着潮霉素浓度的增高外植体生长减缓,分化出的芽弱小且存活率逐渐降低至高浓度潮霉素处理造成植认识农杆菌及虎杖茎尖转化的科学管理模式论文原稿。虎杖茎尖对潮霉素的敏感性本研究以潮霉素作为筛选标记,为有效筛选抗性苗,将制备的茎尖分别置于不同浓度梯度的潮霉素培养基上进行筛选......”。

2、“.....试验结果见表和图。从表和图结果可以看出,对照组的虎杖茎尖生长迅速,并分化出绿色的芽,芽的存活率为随着潮霉素浓度的增高外植体生长减缓,分化出的芽弱小且存活率逐渐降低至高浓度潮霉素处理造成植物组织失绿褐杂交试验中可以采用多个限制性内切酶进行单酶切,或者采用双酶切。另外转基因植株的遗传稳定性外源基因的表达活性成分的含量变化等方面还需要进步深入研究。结论采用根癌农杆菌菌株侵染虎杖茎尖较适宜的转化系统为预培养,农杆菌菌液浓度为,侵染,共培养,在筛选培养基中添加潮霉素,待筛选获得的抗性芽生长至高,再转至根诱导培养基使其长成完整植株。利用该体系成功实现虎杖茎尖遗传转化白藜芦醇合酶基因正确认识农杆菌及虎杖茎尖转化的科学管理模式论文原稿和线粒体中的核糖体与延长因子的结合,从而抑制肽链的延长。潮霉素浓度过低易造成假阳性率过高潮霉素浓度过高......”。

3、“.....在对植物材料进行基因转化之前,对受体材料进行潮霉素敏感性试验是十分必要的。段晓昱等的研究表明向日葵茎尖子叶胚轴不同部位转化外植体对潮霉素敏感性存在定的差异大豆品种黑农的子叶节分化的潮霉素筛选浓度为,而丛生芽生根的潮霉素筛选浓度降低为可见对于同种植物,不同的外过长茎尖伤口细胞已不能提供足够的诱导农杆菌贴壁的受体,或由于茎尖分生组织细胞的分裂速度减缓,进入细胞核的量减少。王沛雅等对河北杨的遗传转化研究表明,预培养以上可以显着提高转化率,但预培养间的差异不显着,转化率并不表现出随着预培养时间的延长先增加后下降的趋势,说明预培养的时间对转化率的影响可能与所选用植物材料等有关系。本试验成功建立了虎杖茎尖为转化受体以潮霉素为筛选剂的根癌农杆菌介导的遗传转化体系,但虎杖株系的基因组中确实整合了目的基因。讨论本试验前期采用叶盘法和愈伤组织侵染方法进行转化遇到诸多困难叶盘经过不同激素组合诱导......”。

4、“.....其愈伤组织易褐化难分化成苗。而植物茎尖具有变异性小有利于保持原有材料的优良性状等特点,国内外很多学者利用茎尖或茎尖分生组织获得了转基因植株。因此,本试验选择茎尖为转化受体,探讨了影响虎杖茎尖遗传转化的主要因素。潮霉素的毒性机理是干扰植物细胞叶绿异大豆品种黑农的子叶节分化的潮霉素筛选浓度为,而丛生芽生根的潮霉素筛选浓度降低为可见对于同种植物,不同的外植体对抗生素的敏感性也是不同的。本研究通过虎杖茎尖对潮霉素的敏感性试验,确定了虎杖茎尖转化的适宜浓度为。在连续筛选过程中直使用同浓度进行筛选,这可能是造成转化率低的原因之。在后续的研究中可以考察虎杖不同部位外植体对潮霉素的敏感性,采用梯度添加筛选剂的方式来提高转化率。在植物遗传转化中,预培素基因为杂交探针的杂交结果图表明,在这个株系中均检测到杂交条带,而野生虎杖没有杂交信号。因此......”。

5、“.....讨论本试验前期采用叶盘法和愈伤组织侵染方法进行转化遇到诸多困难叶盘经过不同激素组合诱导,较难诱导产生不定芽虎杖是含酚类物质较高的药用植物,其愈伤组织易褐化难分化成苗。而植物茎尖具有变异性小有利于保持原有材料的优良性状等特点,国内外很多学者利用茎尖或茎尖分生组可以促进细胞分裂,处于分裂状态的细胞更易整合外源,从而提高转化率另方面预培养能减少褐化现象的产生。赵福永对含酚类物质较高的棉花进行了预培养处理,根诱导阶段根诱导率要比对照组高左右。虎杖也是含酚类物质较高的植物,本试验中预培养是最佳处理,而预培养时间超过,转化率显着下降。转化率随着预培养时间的延长先增加后下降,在高粱茎尖转化中也有类似报道,其原因可能是预培养时间过短茎尖伤口未愈合易受农杆菌的侵害预培养时不同共培养时间对侵染结果的影响差异较大,时分化率较低,经共培养后分化率可达......”。

6、“.....本试验条件下选择在侵染后共培养较为适宜,有利于获得较多生长健壮的抗性再生芽。虎杖转化苗的获得虎杖茎尖遗传转化各阶段如图所示。剥离好的茎尖经预培养后图,进行农杆菌侵染,并共培养图然后转移到筛选培养基上筛选图,不具潮霉素抗性的茎尖逐渐褐化死亡将经筛选后成活的茎尖转移到增殖培养基上图,促进芽增殖与量变化等方面还需要进步深入研究。结论采用根癌农杆菌菌株侵染虎杖茎尖较适宜的转化系统为预培养,农杆菌菌液浓度为,侵染,共培养,在筛选培养基中添加潮霉素,待筛选获得的抗性芽生长至高,再转至根诱导培养基使其长成完整植株。利用该体系成功实现虎杖茎尖遗传转化白藜芦醇合酶基因,本研究结果为拓宽虎杖遗传转化受体提供了技术和方法共培养时间对虎杖遗传转化的影响用值约的茎尖,分别于黑暗中共较高的棉花进行了预培养处理,根诱导阶段根诱导率要比对照组高左右。虎杖也是含酚类物质较高的植物,本试验中预培养是最佳处理......”。

7、“.....转化率显着下降。转化率随着预培养时间的延长先增加后下降,在高粱茎尖转化中也有类似报道,其原因可能是预培养时间过短茎尖伤口未愈合易受农杆菌的侵害预培养时间过长茎尖伤口细胞已不能提供足够的诱导农杆菌贴壁的受体,或由于茎尖分生组织细胞的分裂速度减缓,进入细胞核的量减少。王尖的转化率远低于棉花小麦等作物的茎尖转化效率,所以该遗传转化体系还有待优化。后续工作可以从农杆菌菌株农杆菌介导法结合漩涡振荡真空负压处理等方面来进步优化该转化体系。本试验希望通过提高关键酶基因在虎杖中的表达水平,调控虎杖中白藜芦醇的生物合成。和杂交检测,表明外源基因已经整合到转基因植株的基因组中。但是本试验只进行酶的单酶切,还不能准确确认外源基因插入的拷贝数和位点。在后续可以促进细胞分裂,处于分裂状态的细胞更易整合外源,从而提高转化率另方面预培养能减少褐化现象的产生......”。

8、“.....根诱导阶段根诱导率要比对照组高左右。虎杖也是含酚类物质较高的植物,本试验中预培养是最佳处理,而预培养时间超过,转化率显着下降。转化率随着预培养时间的延长先增加后下降,在高粱茎尖转化中也有类似报道,其原因可能是预培养时间过短茎尖伤口未愈合易受农杆菌的侵害预培养时和线粒体中的核糖体与延长因子的结合,从而抑制肽链的延长。潮霉素浓度过低易造成假阳性率过高潮霉素浓度过高,可能导致不能得到足量的转基因植株。在对植物材料进行基因转化之前,对受体材料进行潮霉素敏感性试验是十分必要的。段晓昱等的研究表明向日葵茎尖子叶胚轴不同部位转化外植体对潮霉素敏感性存在定的差异大豆品种黑农的子叶节分化的潮霉素筛选浓度为,而丛生芽生根的潮霉素筛选浓度降低为可见对于同种植物,不同的外系,剥取虎杖茎尖个,经农杆菌侵染转化筛选,获得了移栽成活的抗性植株共株,潮霉素基因的检测图显示其中株为转基因的阳性植株......”。

9、“.....转基因虎杖的杂交选取鉴定为阳性的转基因虎杖植株,提取叶片基因组,经酶切电泳转膜后以潮霉素基因为杂交探针的杂交结果图表明,在这个株系中均检测到杂交条带,而野生虎杖没有杂交信号。因此,这些转基因虎正确认识农杆菌及虎杖茎尖转化的科学管理模式论文原稿养和,以转化后获得的抗性芽百分率及增殖系数作为评价指标表。自创刊以来,以新观点新方法新材料为主题,坚持期期精彩篇篇可读的理念。农业展望内容详实观点新颖文章可读性强信息量大,众多的栏目设置,农业展望公认誉为具有业内影响力的杂志之。农业展望并获中国优秀期刊奖,现中国期刊网数据库全文收录期刊。共培养时间对虎杖遗传转化的影响用值约的茎尖,分别于黑暗中共培养和,以转化后获得的抗性芽百分率及增殖系数作为评价指标和线粒体中的核糖体与延长因子的结合,从而抑制肽链的延长。潮霉素浓度过低易造成假阳性率过高潮霉素浓度过高......”。