方式饮食习惯等相互作用对糖尿病发生发展的影响另方面，将利用深度测序在全基因组水平研究型糖尿病与主要靶组织甲基化的关系研究肿瘤与糖尿病细胞端粒与糖尿病转归的关系，为全面认识遗传因素与环境因素对于型糖尿病的发生与发展的影响做出有力的补充。在已有的人群流行病学研究和型糖尿病的全基因组关联研究基础上，根据中国人群特定的营养结构和遗传易感性，围绕着影响糖脂和能量代谢的重要营养素如脂肪酸维生素族维生素及矿物元素，对营养素失衡及其相关基因在型糖尿病发生发展过程中的作用及机制进行深入研究。借助糖尿病内质网应激模型动物，确定易感基因在胰岛细胞内质网应激诱导细胞凋亡中的作用，探讨高尿酸胃绕道手术等特殊环境对胰岛细胞损伤和保护的独特机制通过功能基因组学等技术深入研究脂肪酸通过诱导胰岛细胞内质网应激的关键信号分子和信号转导通路为型糖尿病的治疗提供潜在的新靶点。利用基因敲除小鼠模型，对等新脂肪细胞因子在非酒精性脂肪肝和肝脏胰岛素抵抗发生过程中的作用进行研究阐明其在肝脏中的作用及其在调节细胞应激反应中的信号通路明确肝脏家族小等在脂肪及肝细胞因子信号传导中的作用利用小动物和大动物模型揭示，和等新肝细胞因子在调控脂肪细胞功能能量代谢和胰岛素敏感性方面的功能。探索脂肪细胞因子肝细胞因子作为中国人群型糖尿病及其血管并发症的风险预测和早期诊断的可行性。从线粒体能量代谢角度，探讨介导糖尿病肾病足细胞损伤的分子机制重点研究细胞应激在糖尿病肾病蛋白尿和肾纤维化中的分子机制从细胞自身稳态调节的角度出发，着重探讨糖尿病足细胞损伤中氧化应激和内质网应激介导自噬反应异常的分子机制，并寻找减少足细胞凋亡和蛋白尿的新方法探讨氧化损伤白蛋白诱导血管细胞的应激和损伤，促进加速性动脉粥样硬化的发生和发展的分子机制为发现糖尿病肾病早期标志和新干预途径提供依据。采用代谢组学和蛋白组学研究方法，研究正常大鼠和糖尿病模型大鼠的主动脉内皮细胞和平滑肌细胞在慢性高血糖刺激后所发生的形态学氧化应激和代谢学变化检测细胞外吐小体的蛋白质变化观察对糖尿病动物模型大血管内皮细胞和平滑肌细胞的影响，并通过体内实验研究其对活体动物的心血管指数主动脉内皮细胞和平滑肌细胞病理改变的影响，以及对相关氧化应激分子表达变化的影响筛选出糖尿病大血管并发症早期诊断和病情监测的特异性分子标记。患者，型糖尿病伴发心血管并发症的人群为研究对象每组人，采用质谱分析法，比较这些人群呼吸气体中代谢相关有机成分的差异采用蛋白质组学技术，比较分析其血液和尿液标本组别间蛋白质谱的差异。用于糖尿病心血管病并发症防治的基础和临床研究体外观察对糖尿病动物模型和基因敲除动物大血管内皮细胞和平滑肌细胞的影响。体内实验中测定活体动物心血管指数的改善指数，主动脉内皮细胞和平滑肌细胞的病理改变，和相关的氧化应激分子表达的变化。在此基础上，开展的临床前应用研究。研究对型糖尿病心血管并发症患者的糖代谢脂代谢胰岛素敏感性胰岛功能心电图心功能等的影响。经费比例承担单位南方医科大学同济大学课题负责人惠宏襄学术骨干陈义汉孙云甫唐永明赵小宁课题间相互关系课题可与课题紧密互动，通过不同样本人群验证遗传因素与环境因素的相互作用。课题和发现的易感基因和营养因素可在课题中进步研究其对细胞功能胰岛素抵抗糖尿病肾病和糖尿病大血管病变中的作用机制。课题中发现的细胞应激反应关键因子可在课题中进步研究其是否参与中国人型糖尿病及并发症的遗传易感性在课题中研究其是否参与营养因素诱发型糖尿病的分子机制。课题和可为所有细胞应激机制研究课题组提供临床标本，以深化研究。各课题与项目总体目标和五年目标的关系如下课题着重开展影响型糖尿病发生发展的易感基因研究并开展表观遗传学研究。该课题的研究成果可为型糖尿病及并发症易感人群的早期检出提供支持。该课题组还可提供临床样本支持，并提供葡萄糖钳夹技术平台与其他课题组共享。课题主要研究营养因素与型糖尿病的关系，以及遗传因素与营养因素在型糖尿病发生发展上是否存在交互作用。该课题有望为建立适合中国汉族人群遗传背景和膳食特点的型糖尿病营养干预策略提供理论依据。课题围绕内质网应激导致胰岛细胞凋亡的作用机制开展研究，揭示内质网应激在脂肪酸和炎症因子诱导的胰岛细胞凋亡过程中的分子机制,为型糖尿病的治疗提供潜在的新靶点。课题研究内质网应激在肝脏胰岛素抵抗中的作用，探讨脂肪因子及肝细胞因子的代谢调节功能及分子作用机理，为脂肪因子及肝细胞因子用于型糖尿病发生发展的早期风险评估提供理论基础及临床依据。课题研究线粒体氧化应激诱导肾脏足细胞损伤和糖尿病肾病的作用机制，重点研究糖尿病足细胞转分化细胞稳态以及与足细胞生物学功能密切相关的线粒体能量代谢和内质网应激。课题研究氧化应激与型糖尿病大血管病变及心脏病变的关系。四年度计划年度研究内容预期目标第年完成技术培训，完善人群和家系数据库完成组织样本收集在小样本中进行全外显子组深度测序构建与型糖尿病有关的重要基因蛋白质的信息库选取伴有和不伴有糖尿病的肝癌患者，分析肝癌患者的预后与糖尿病的关系在基线病例和对照各例中测定样本端粒长度筛选名符合标准的患有代谢综合征的志愿者，采用核桃亚麻子或相同卡路里食物对照对所有志愿者进行为期个月的临床干预研究测定红细胞膜的各种脂肪酸组成和比例观察对胰岛细胞胰淀素表达的调节作用确定及优化细胞和小鼠模型脂肪酸刺激细胞后用明确候选基因转录蛋白表达增加或降低的倍数针对部分发生倍以上变化的靶基因，在中搜索其启动子区序列并设计引物脂肪酸刺激细胞，用抗体做染色质免疫共沉淀实验。建立小鼠的葡萄糖钳夹实验常规及高脂状态下脂肪细胞因子水平及生理代谢状态检测肝脏及脂肪细胞内质网应激和线粒体功能检测制备基因敲除小鼠筛选对功能有影响的小分子化合物构建和转基因兔载体分析家族成员的在肝脏的表达特征观察糖尿病小鼠模型肾小球足细胞数目和足突的变化与蛋白表达变化的关系利用基因缺失小鼠与糖尿病动物模型，观察足细胞数目和足突的变化，以及尿白蛋白和肾功能的变化，分析基因缺失对足细胞结构与功能的影响采用血管硬化动物模型观察氧化损建立完备的型糖尿病及其对照队列，建立相应的数据库，包括端粒信息完成小样本全基因组测序工作，结合公共数据库，选取多个用于进步研究初步建立型糖尿病重要基因蛋白质数据库平台阐明糖尿病对肝癌患者预后的影响通过比较各组干预前后的变化和组间差异，评估核桃和亚麻子对代谢综合征个体的健康改善效力确定中国京沪城乡居民脂肪酸的分布特征明确对胰淀素表达的调节作用确定及优化细胞和小鼠模型建立内本实验中质网应激产生的评判标准进步优化原代胰岛的分离方法寻找受直接调控的基因验证确定之前芯片结果的可靠性初步了解和缺失对胰岛素敏感性检测出小鼠与野生小鼠相比其脂肪氧化应激内质网应激何线粒体功能出现的差别获得肝细胞因子基因敲除小鼠杂合子获得等脂肪肝脏和神经细胞特异基因敲除小鼠获得对功能有影响的小分子化合物获得，和转基因兔载体获得初步在肝脏的表达信息成功建立基因缺失小鼠与配对的野生型小鼠建立糖尿病动物模型，获得足细胞病变相关数据，并比较差异成功建立血管硬化动物模型，观察获得血管内皮细胞凋亡，动脉组织匀浆组织因子活性和表达，以及和抗凝血因子的表达数据阐明与型糖尿病大血管病变直接相关的内皮细胞和平滑肌细胞代谢和氧化应激变化图谱明确对糖尿病动物的内皮细胞和平滑肌细胞的影响年度研究内容预期目标伤白蛋白慢性负荷对血管内皮炎症反应及血管活性物质合成的作用，观察血管内皮细胞凋亡，动脉组织匀浆组织因子活性和表达，以及和抗凝血因子的表达。观察模型大鼠的主动脉内皮细胞和血管平滑肌细胞在经由模拟糖尿病早期的慢性高血糖和高胰岛素刺激后所发生的增殖迁移和凋亡等形态学改变测定细胞中主要浓度，检测线粒体功能和代谢变化研究对糖尿病动物模型的内皮细胞和平滑肌细胞的影响，体内实验测定活体动物心血管指数的改善情况，主动脉内皮细胞和平滑肌细胞病理改变，相关的氧化应激分子表达的变化培养硕士博士研究生名在国际相关领域杂志上发表研究论文篇第二年在北方和东部人群中开展大样本易感基因关联研究完善与型糖尿病有关的重要基因蛋白质的信息库选取重要靶组织，进行全基因组甲基化富集选取伴有和不伴有糖尿病的肝癌患者肿瘤及癌旁组织标本，在组织芯片上检测肝癌患者肿瘤微环境中关键因子表达水平的改变与糖尿病的关系基线端粒数据与糖尿病的关联分析，并完成第次随访血样的端粒长度检测完成测定红细胞膜的脂肪酸测定，系统研究脂肪酸种类数量和比例与炎性反应和型糖尿病发生发展的关系研究血浆羟基维生素水平与胰岛素分泌胰岛素抵抗和型糖尿病发生发展的关系，研究维生素相关基因的变异对维生素的影响，以确定中国人羟基维生素水平是否与遗传背景密切相关，并研究基因型与维生素的相互作用对型糖尿病的发生发展的影响探讨调节胰岛细胞胰淀素表达的分子机制研究脂肪酸对基因启动子活性的影响初步发现新的中国人型糖尿病易感基因完善并发布型糖尿病重要基因蛋白质数据库平台明确糖尿病在肝癌进展过程中的关键因子初步分析端粒长度与糖尿病的关系确定中国京沪城乡居民脂肪酸的分布特征，以及与型糖尿病发病风险的关系，膳食遗传影响因素和对疾病的预测作用在中国汉族人群中阐明羟基维生素水平及其与相关基因多态性位点的交互作用对型糖尿病的发表风险的影响阐明调节胰淀素表达的分子机制阐明干扰或者过表达后，候选基因启动子活性变化的状况及表达调控机制在细胞功能水平阐明表达的增加或缺失对胰岛细胞及数量的影响确定在胰岛细胞内质网应激中受调控的基因获得脂肪细胞因子直接作用于肝脏细胞的证据明确肝脏细胞因子对人群中进步明确端粒与糖