无菌操作台上冷却按照接种量接种，用带棉花的玻璃管胶塞封口以甲烷作为碳源培养，采用真空抽气法抽气后臵入变摇瓶法培养甲烷氧化菌的条件，采用大孔树脂法对甲烷氧化菌素的静态吸附及动态吸附后分离纯化甲烷氧化菌素，找到最佳吸附甲烷氧化菌素效果，有望为甲烷氧化菌应用提供理论参考仪器与材料仪器立式高压灭菌器上海申安型恒温振荡器哈尔滨东联电子型紫外可见分光光度计日本试述基于甲烷氧化菌素的吸附分析进行摇瓶法甲烷氧化菌分离微生物学论文同时，颗粒性甲烷单加氧酶旦与甲烷氧化菌素分离，颗粒性甲烷单加氧酶会丧失活性，生长受到抑制分析其原因，甲烷氧化菌可能会像其他能分泌嗜铁素用于捕获环境中铁的细菌样具有捕获铜的能力，而这种能力就来源于甲烷氧化菌素此后，等发现甲烷氧化菌细胞外的甲烷氧化菌素在结合铜后返回细胞内膜，式存在于甲烷氧化菌细胞外，同时又可以进入细胞内膜参与颗粒性甲烷单加氧酶的形成年这种荧光肽的结构数据被发表，由个氨基酸组成，包含个咪唑和个硫酰的硫酰咪唑基团，可以与铜离子发生络合年该结构又被进行了部分修正，原来的羟咪唑基团更改为酮咪唑基团，异丙酯结构更改为甲基丁酰基结构从此以后的微生物，它对于改善大气中甲烷的平衡具有重要意义，可以预防并阻止日趋严重的温室效应此外，大量研究表明，甲烷氧化菌在生物可降解塑料单细胞蛋白的合成食品抗氧化剂食品安全检测氯乙烯等有机成分的降解以及提供清洁能源等方面也表现出了相当大的潜力甲烷氧化菌的代谢主要依靠种叫甲烷单加氧酶的摘要甲烷氧化菌素是甲烷氧化菌分泌的种可结合铜的小分子荧光肽，具有氧化还原活性采用摇瓶法培养甲烷氧化菌，通过不同培养基装液量来寻找菌体的生长规律，确定最适生长条件，并采用大孔树脂法分离纯化甲烷氧化菌素，通过大孔树脂对甲烷氧化菌素的静态吸附及动态吸附方式对比，找到最佳的吸附效果实验结菌的筛选及培养条件应用与环境生物学报，顾华兵，沈阳，周淑鑫，等甲烷氧化菌的分离鉴定及其发酵条件优化贵州大学学报自然科学版，辛嘉英，姜加良，张帅，等甲烷氧化菌素铜配合物催化过氧化氢氧化对苯酚高等学校化学学报，辛嘉英，董静，闫超泽，等甲烷氧化菌素的产生和铜捕获作用中国生物工程解破碎而无法被检测到故选择为甲烷氧化菌最佳吸附甲烷氧化菌素的培养时间图大孔树脂静态吸附甲烷氧化菌素的全波长扫描通过静动态两种吸附方式比较发现，静态吸附培养时，随着时间的递增，甲烷氧化菌素的吸收峰明显而在相同培养条件下动态吸附没有明显的吸收峰，说明静态吸附培养条件下，更化菌的生长曲线图不同装液量在大孔树脂动态吸附方式培养甲烷氧化菌的生长曲线大孔树脂静态吸附法对吸附甲烷氧化菌素的影响结果如图所示，的培养基，在相同的培养条件下，分别进行的培养后，可以看出，培养所得到的甲烷氧化菌素进行紫外分光光度计的全波长扫描后，随着培养时间的增加，甲烷氧化静态和动态吸附下甲烷氧化菌的生长结果如图所示，种不同装液量的培养基，在相同的培养条件下，分别进行的培养后，可以看出装液量的甲烷氧化菌吸光值增加并不明显，说培养基装液量不足导致营养物质不能满足甲烷氧化菌的生长需求而生长缓慢而随着装液量的升高，菌体生长加快时，菌体试述基于甲烷氧化菌素的吸附分析进行摇瓶法甲烷氧化菌分离微生物学论文杂志，张帅，郝雪，王悦，辛嘉英摇瓶法培养甲烷氧化菌吸附甲烷氧化菌素的研究哈尔滨商业大学学报自然科学版，基金国家自然科学基金项目哈尔滨商业大学校级科研项目哈尔滨商业大学研究生创新科研项目试述基于甲烷氧化菌素的吸附分析进行摇瓶法甲烷氧化菌分离微生物学论文态吸附和动态吸附法对吸附甲烷氧化菌素的影响结果表明，培养基装液量为时，培养，大孔树脂静态吸附的培养方式对甲烷氧化菌的生长较好同时，静态吸附下，大孔树脂静态吸附甲烷氧化菌素的量也更多，为今后提高甲烷氧化菌素的分离能力奠定了科学基础参考文献魏文平，邓辉，李国学，等株型甲烷氧化菌素的影响分别配制瓶的甲烷氧化菌培养基，每个培养基各加入等量已处理好的大孔树脂，按照接种量接种甲烷氧化菌空气浴摇床中培养，每通入次甲烷，每隔天取出瓶菌液对其产生甲烷氧化菌素进行分离纯化，用紫外分光光度计扫描全波长，计算甲烷氧化菌素的浓度大孔树脂动态吸附多的甲烷氧化菌素被吸附进入大孔树脂而最后被分离出来因此从紫外分光光度计检测甲烷氧化菌素含量的角度来说，静态吸附要优于动态吸附图大孔树脂动态吸附甲烷氧化菌素的全波长扫描结语本实验分别对甲烷氧化菌在大孔树脂静态和动态吸附法的培养方式下，考察不同装液量对菌体生长的影响，大孔树脂静菌素在最大吸收峰对应增加，说明随着甲烷氧化菌的生长速度加快，菌体数量增多，其向胞外释放的甲烷氧化菌素量也逐渐增多，随即很快就被培养基中的大孔树脂所吸附培养后，甲烷氧化菌素开始减少，可能是由于在发酵液中甲烷氧化菌数量已达到最大值，部分菌体出现死亡，部分甲烷氧化菌素发生裂生长反而下降，说明装液量过多，导致留给菌体进行有氧呼吸的空间被缩小，抑制了菌体生长故当培养基用量为时，甲烷氧化菌的生长情况最好另外，对比大孔树脂静态和动态吸附下培养甲烷氧化菌的生长结果发现，大孔树脂静态吸附的培养方式也优于动态吸附图不同装液量在大孔树脂静态吸附方式培养甲烷氧法对吸附甲烷氧化菌素的影响分别配制瓶的甲烷氧化菌培养基，按照接种量接种甲烷氧化菌空气浴摇床中培养，每通入次甲烷，每隔天取出瓶菌液对其发酵液进行分离纯化产生甲烷氧化菌素，用紫外分光光度计扫描全波长，计算甲烷氧化菌素的浓度实验结果与讨论不同装液量对大孔树脂试述基于甲烷氧化菌素的吸附分析进行摇瓶法甲烷氧化菌分离微生物学论文脂动态吸附培养甲烷氧化菌生长的影响分别于玻璃摇瓶中配制装液量为的不同体积的甲烷氧化菌培养基，不加入大孔树脂灭菌后按照接种量接种空气浴摇床中培养，每通入次甲烷，每隔天取出菌液，用紫外可见分光光度计测菌液吸光值大孔树脂静态吸附法对吸附甲烷氧化甲烷温度空气浴摇床中培养，每通入次甲烷甲烷氧化菌素的制备分离纯化离心取上清液，柱层析前对大孔树脂进行活化，过柱后用甲醇洗脱大孔树脂中吸附的甲烷氧化菌素，将装有甲烷氧化菌素提取液的烧瓶，旋转蒸发，旋蒸多余的甲醇样品冷冻干燥获得甲烷氧化菌素不同装液量对大孔岛津型高速离心机德国贺默公司旋转蒸发仪德国公司实验材料甲烷氧化菌，由清华大学邢新会教授赠送培养基参照文献方法配制甲烷北京海普气体有限公司大孔树脂甲醇，硫酸铜等均为分析纯天津市天力化学试剂有限公司实参与颗粒性甲烷单加氧酶的催化氧化过程加快了反应中电子的流动性甲烷氧化菌素还具有过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性，说明甲烷氧化菌素在颗粒性甲烷单加氧酶的催化氧化过程中将等电子供体向颗粒性甲烷单加氧酶传递，清除氧化反应过程中产生的超氧阴离子自由基，对细胞起到保护作用通过改，该物质也就被命名为甲烷氧化菌素甲烷氧化菌素对铜具有较强的亲和性，年等人在研究甲烷氧化菌素结合铜的机理时，发现低浓度有利于促进甲烷氧化菌素的积累当提供大量的时，会促使甲烷氧化菌素与结合在细胞内膜上另外，甲烷氧化菌素∶∶时，甲烷氧化菌素促进甲烷氧化菌的生长物质，甲烷在它的作用下被催化氧化而生成甲醇甲醇脱氢酶又将生成的甲醇继续氧化成甲醛，依赖于甲醛脱氢酶和甲酸脱氢酶的作用最终使甲醛彻底氧化分解为和，同时通过丝氨酸循环或磷酸戊糖途径完成细胞合成，为细胞代谢提供还原物质在甲烷氧化菌的研究中发现存在种小分子的荧光肽，它以分泌物的形结果表明，摇瓶法培养的最佳培养基装液量，通过大孔树脂静态吸附是最佳的吸附甲烷氧化菌素方式，为今后提高甲烷氧化菌素的分离能力奠定了科学基础关键词分离能力动态吸附大孔树脂微生物学甲烷氧化菌甲烷氧化菌素静态吸附甲烷氧化菌是广泛存在于自然界中的种能够以甲烷甲醇等单碳化合物为碳源来进行生长