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浅谈用于ATP含量检测的电化学发光适配体传感(分析化学论文) 浅谈用于ATP含量检测的电化学发光适配体传感(分析化学论文)

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,并获得更宽的检测范围。如示意图所示,形成颈环结构的可以重新与适配体杂交形成刚性线形的双链结构,使得该传感器具有再生性能。实验试剂和仪器磷酸腺苷磷酸胞苷适配体以及与适配体互补的探针均购于上海生工生物工程技术和服务有限公司。端氨基修饰的核酸适配体碱基序列为,其互补的序列为纳米金电极增加探针组装量和茂铁分子猝灭联吡啶钌信号,建立了种灵敏度更高检测范围更宽的电化学发光适配体型检测传感器。两端含个互补碱基的单链,先通过分子端修饰的氨基标记上电化学发光信号联吡啶钌,再利用端修饰的巯基自组装到纳米金电极表面。电极表面的与通过端修饰的氨基标记茂铁分子的适配体杂交形成刚性线形的双链,从而构建出电化学发光适配体型检测传感器。在分子与适配体作用之前,传感器表面的与互补适配体呈刚性线形的双浅谈用于含量检测的电化学发光适配体传感分析化学论文。溶液浓度为,。插图信号强度与浓度对数值之间的线性曲线。近年来,人们把适配体的分子识别功能和电化学发光的信号指示功能结合起来,构建出系列功能各异性能优越的电化学发光适配体型传感器。该类传感器已被广泛研究应用于蛋白酶,毒素,肿瘤细胞肿瘤坏死因子金属离子,等的分析检测。但该类型传感器应用于磷酸腺苷的含量检测少有报道,。适配体寡核酸链可以显著增强溶液中分子的信号。当分子与适配体作用后,检测范围。该传感器构建方法为其他基于适配体的电化学发光传感器构建提供了参考。姚武,崔朋,胡晓倩基于信号增强的电化学发光适配体传感器检测磷酸腺苷发光学报,基金安徽省自然科学基金面上项目安徽省高校自然科学重点研究项目资助。浅谈用于含量检测的电化学发光适配体传感分析化学论文。实验也考察了传感器与的相互作用时间对传感器电化学发光信号的影响,结果如图所示。随着相互作用时间从增加到,发光信号逐渐增大。作用时间达到后,发光信号基本保持稳器的选择性和再生性为考察该传感器对的选择性响应,进行了传感器对的类似物的响应实验。同样条件下,该传感器分别在空白溶液中的孵化,并测量信号。从图结果中可以看出,只有组分使得传感器产生了明显的电化学发光信号增强,说明该传感器对具有良好的选择性。实验也考察了传感器再生使用的性能。传感器用于检测,用淋洗电极表面,再浸入中,于孵化。所得电极又重新用于,信号可以恢复到原来的。区别于其他类型的结果与讨论和的表征合成的探针用紫外可见光谱进行表征,如图所示。图中曲线分别为探针和的紫外可见吸收光谱。插图是在范围吸收光谱曲线的放大,其中的吸收峰与的吸收峰对应,是联吡啶钌金属离子到配体电子转移的特征吸收带,说明联吡啶钌已经被标记到探针链上。图和的紫外可见吸收光谱。插图在范围吸收光谱曲电极,用高纯水清洗干净,并用高纯氮气吹干。该电极再在溶液中,在电位下进行恒电位电解,得纳米金电极。取出电极用高纯水冲洗干净后,重新在相同电位范围和扫速进行循环伏安扫描,直到出现典型且稳定的金电极扫描特征曲线,取出后用高纯水清洗干净,并用高纯氮气吹干待用。将处理干净并吹干的纳米金电极迅速插入,在室温下浸泡,通过金硫键自组装上纳米金电极表面,用淋洗电极表面,洗去没有键合的探针。该电极再在,溶液中浸泡钝化,除去非特异性键合的和封闭没有键合上探针溶液中钝化后,电荷转移电阻增加图,和。当电极表面的和杂交后,电荷转移电阻进步增大图,。当电极在溶液中孵化后,电荷转移电阻减小图,。电荷转移电阻的变化规律和循环伏安曲线的结果致,进步证明了在纳米金电极表面的组装和的杂交适配体从电极表面的解离等过程。传感器的电化学发光行为图是传感器与分子作用前后信号的变化过程。曲线表明裸纳米金电极没有信号产生,组装了高纯水清洗干净,并用高纯氮气吹干待用。将处理干净并吹干的纳米金电极迅速插入,在室温下浸泡,通过金硫键自组装上纳米金电极表面,用淋洗电极表面,洗去没有键合的探针。该电极再在,溶液中浸泡钝化,除去非特异性键合的和封闭没有键合上探针的纳米金电极表面位点。该修饰电极再浸入中,于孵化,探针与杂交生成刚性线形的双螺旋。所得电极用溶液淋洗后作为传感器待用,并用其中的吸收峰与的吸收峰对应,是联吡啶钌金属离子到配体电子转移的特征吸收带,说明联吡啶钌已经被标记到探针链上。图和的紫外可见吸收光谱。插图在范围吸收光谱曲线的放大。注含义为吸收峰波长,相对于基线的吸光度值。合成的同样用紫外可见光谱进行表征,结果如图所示。图中曲线分别为和的紫外可见吸收光谱。插图是在浅谈用于含量检测的电化学发光适配体传感分析化学论文的纳米金电极表面位点。该修饰电极再浸入中,于孵化,探针与杂交生成刚性线形的双螺旋。所得电极用溶液淋洗后作为传感器待用,并用循环伏安曲线和电化学阻抗谱对其进行表征。电化学发光信号检测传感器在不同浓度的溶液,中孵化后,经缓冲溶液清洗,室温浸泡在,溶液。电极取出后用,再在,溶液中,于电位范围扫速下进行循环伏安扫描,同时记录电化学发光信从电极表面脱落,消除了茂铁分子对联吡啶钌信号的猝灭作用,导致信号增强图,。此时的传感器再在高离子强度溶液中作用,单链再次形成茎环结构,信号基本恢复至与杂交之前的强度水平图,。浅谈用于含量检测的电化学发光适配体传感分析化学论文。传感器的构建金电极用粉抛光成镜面后,再分别在高纯水无水乙醇高纯水中超声清洗,然后在,扫描电位为,扫速为,直到出现典型且稳定的金电极扫描特征曲线。取出过程。实验结果表明,该传感器具有较好的再生性能。图传感器分别在空白溶液溶液溶液和混合溶液中孵化后的信号强度比较。结论本文基于适配体与分子作用后可以显著增强传感器信号的性能,利用与适配体完全互补且标记联吡啶钌的作为传感探针,适配体作为识别元件,构建了种电化学发光适配体型传感器。该传感器用于含量的检测,检测限为,检测线性范围为,与已报道结果相比具有更低的检测限和更宽的检测范围。该传感器构建方法为在溶液中钝化后,形成发夹型的茎环结构,使得联吡啶钌分子靠近电极表面,产生很强的信号图,。该修饰电极在孵化,和杂交形成刚性线形的双螺旋链,由于端标记的联吡啶钌分子远离纳米金电极表面,且适配体端标记的茂铁分子靠近联吡啶钌分子,对联吡啶钌的信号具有猝灭作用,导致信号显著降低图,。当传感器浸泡在,由于分子与适配体分子存在更强的相互作用,生成适配体复合物,环伏安曲线和电化学阻抗谱对其进行表征。电化学发光信号检测传感器在不同浓度的溶液,中孵化后,经缓冲溶液清洗,室温浸泡在,溶液。电极取出后用,再在,溶液中,于电位范围扫速下进行循环伏安扫描,同时记录电化学发光信号。裸纳米金电极,修饰的纳米金电极,修饰的纳米金电极,与作用后的纳米金电极。图是纳米金电极在不同阶段的电化学阻抗曲线。纳米金电极组装探针并在范围吸收光谱曲线的放大,其中的吸收峰与茂铁琥珀酰胺酯的吸收峰对应,说明茂铁分子已经被标记到适配体分子上。传感器的构建金电极用粉抛光成镜面后,再分别在高纯水无水乙醇高纯水中超声清洗,然后在,扫描电位为,扫速为,直到出现典型且稳定的金电极扫描特征曲线。取出金电极,用高纯水清洗干净,并用高纯氮气吹干。该电极再在溶液中,在电位下进行恒电位电解,得纳米金电极。取出电极用高纯水冲洗干净后,重新在相同电位范围和扫速进行循环伏安扫描,直到出现典型且稳定的金电极扫描特征曲线,取出后他基于适配体的电化学发光传感器构建提供了参考。姚武,崔朋,胡晓倩基于信号增强的电化学发光适配体传感器检测磷酸腺苷发光学报,基金安徽省自然科学基金面上项目安徽省高校自然科学重点研究项目资助。浅谈用于含量检测的电化学发光适配体传感分析化学论文。结果与讨论和的表征合成的探针用紫外可见光谱进行表征,如图所示。图中曲线分别为探针和的紫外可见吸收光谱。插图是在范围吸收光谱曲线的放大浅谈用于含量检测的电化学发光适配体传感分析化学论文传感器对的选择性响应,进行了传感器对的类似物的响应实验。同样条件下,该传感器分别在空白溶液中的孵化,并测量信号。从图结果中可以看出,只有组分使得传感器产生了明显的电化学发光信号增强,说明该传感器对具有良好的选择性。实验也考察了传感器再生使用的性能。传感器用于检测,用淋洗电极表面,再浸入中,于孵化。所得电极又重新用于,信号可以恢复到原来的。区别于其他类型的传感器,该传感器的再生不需要高。实验也考察了传感器与的相互作用时间对传感器电化学发光信号的影响,结果如图所示。随着相互作用时间从增加到,发光信号逐渐增大。作用时间达到后,发光信号基本保持稳定。故实验选用作为相互作用时间。图传感器与的作用时间对传感器电化学发光信号的影响的电化学发光检测在优化实验条件下,与不同浓度的相互作用后,传感器会产生不同强度的电化学发光信号。如图所示,电化学发光信旋结构,使得端的联吡啶钌分子远离纳米金电极表面,导致信号较弱。同时,又由于适配体端标记的茂铁分子对联吡啶钌分子的电化学发光具有猝灭作用,使得此时的信号更弱。当与适配体作用形成适配体复合物离开电极表面,而后电极表面的在高离子强度溶液中形成发夹型的茎环构象,使得信号分子联吡啶钌与金电极表面靠近,产生显著增强的信号,如示意图用于检测的电化学发光适配体传感器原理图所示。信号的增强幅度与浓度的对数值具有良好的线性关系,从分子的信号明显减弱。研究组借助该现象建立了含量的检测方法,检测限为,检测线性范围为。小组利用适配体互补和链体核酸酶双标记纳米金颗粒。当的量越多,能够通过与适配体杂交连接到电极表面的纳米金颗粒数量就越少,核酸酶催化还原溶液中作为量子点共反应物的溶解也越少,则电极表面量子
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