1、“.....等技术,但仍存在操作繁琐费时成本高等问题,而纳米纳米孔,将氮化硅片用水和乙醇清洗数遍,装入定制的聚氟乙烯样品池装置中,如图所示,分别加入和,用银氯化银电极将样品池装置与用电脑控制的电脉冲输出仪连接,电流脉冲施加在样品池装置的端。当电场达到临界值时,氮化硅薄膜就会发生击穿,从而在氮化硅薄膜上形成纳米尺寸的孔洞。本文所使用的氮化硅薄膜会在电脉冲达到左右时被击穿形成纳米孔洞,在相对较低的电压下对其进行扩大,从而达到目标孔径。孔径的大小可以用电流电压关系曲线和化学结构。端粒是真核生物染色体线性分子末端的段富含鸟嘌呤的重复序列,维持着染色体稳定性。该重复序列的链悬突形成的特殊结构可以使几条链的残基相互连接起来,形成联体。当端粒序列形成联体后,它在不同的金属离子电导液中形成的级结构的构象也是不同的,如双重重复人体端粒序列......”。
2、“.....在高浓度钠离子电导液中形成篮筐结构,而在高浓度钾离子电导液中则形成平行与反平行两种构型,。由于端粒的这种独特序列可能有关四联体折叠监测的分析及固态纳米孔上端粒序列的共价修饰的研究分子生物学论文联体的端粒序列,通过改变值控制反应体系,从而使得联体可逆地形成与解开在环境下调节值来调控联体修饰的纳米通道的开合。对于利用生物孔研究联体,因为孔径的限制只能观测到联体结构解开后的过孔信号,不能监测到完整结构过孔,微流道器件也只能监测联体是否形成,不能比较联体不同结构的差异。本文提出种在限域空间内,动态监测人体端粒序列在金属离子诱导下形成联体的方法,将端粒序列共价固定在纳米孔内,在不同金属离子诱导下形成不同构象的联体,通过分析其引起的离子堵塞联体结构的手段包括紫外光谱圆色向谱核磁共振谱射线衍射,凝胶电泳法热变性及表面等离子体共振等......”。
3、“.....无法实现单分子水平实时监测联体的形成过程及构象变化,也无从得知联体的形成诱因,且灵敏度不高。之后发展了些如单分子荧光光镊,等技术,但仍存在操作繁琐费时成本高等问题,而纳米孔单分子技术则为研究联体复杂构象提供了种新方法。纳米孔研究联体结构形成机制主要有两个方向,即生物纳米孔和固态纳米孔。生物纳米孔是天然形成的孔,生物相容性好,固定的孔径和孔序列在金属离子诱导下形成立体结构产生的电流堵塞幅值和持续时间分布关系。而图中的直方图则分别代表联体结构形成后在孔内堵塞事件的信号幅值图和和持续时间图和的统计结果。可以看到在不同离子的电导液中,其产生的信号的幅值和持续时间都有很大不同。图中数据统计分析显示,在电导液中信号的电流堵塞幅值分布最集中,在电导液中次之,在电导液中最分散。这说明相比于其他两种电导液体系,端粒序列在电导液中的构象转变没有另外两种电导液中的构象多样......”。
4、“.....由图可以看到,未作处理的氮化硅表面图是疏水的,在浸泡食人鱼溶液后图水与氮化硅表面的接触角明显变小,亲水性提高。修饰分子后图的氮化硅表面与水的接触角增大,亲水性下降,这表明分子已经修饰到氮化硅表面,其末端的环氧基是疏水的,导致接触角变大。最后在氮化硅表面固定后图,其亲水性改善,接触角变小,说明端粒序列修饰到了氮化硅片上,与前面修饰孔的曲线测试结果吻合。纳米孔直径以及氮化复杂结构提供实验参考。参考文献应乐倩,余晖,王雨婷,等端粒损伤与细胞衰老的研究进展中国细胞生物学学报,王森,梁丽媛,唐婧,蔡瑶,翁婷,尹雅洁,王亮,王德强固态纳米孔上端粒序列的共价修饰与联体折叠监测微纳电子技术,基金中国科学院青年创新促进会项目重庆市基础科学与前沿技术研究重点项目......”。
5、“.....如果施加特定电场,基于电介质击穿模型,可以根据通道电导的数值间接推算出击子电导液中,信号的持续时间明显小。综合这两个方面来说,不管在信号幅值的分布上,还是在信号持续的时间上,都可以说明在电导液中由端粒序列折叠产生的联体结构的稳定性最好。图膜片钳系统记录电流信号工作示意图结果与讨论纳米孔修饰前后直径及亲水性的表征在电导液中氮化硅薄膜表面带负电。如果施加特定电场,基于电介质击穿模型,可以根据通道电导的数值间接推算出击穿后所形成的纳米孔直径大小,计算公式为式中为纳米孔直径为通道长度即薄膜厚度为溶液电导率为孔电导。图为纳米孔修饰前后的示意在纳米孔中因为结构的变化而产生的电流信号,将探测得到的电流信号进行统计并分析,图为纳米孔装置在端施加电压,不同离子电导液中所得到的信号......”。
6、“.....代表着孔内端粒序列在金属离子诱导下形成立体结构产生的电流堵塞幅值和持续时间分布关系。而图中的直方图则分别代表联体结构形成后在孔内堵塞事件的信号幅值图和和持续时间图和的统计结果。可以看到在不同离子的电导液中,其产生的信号的幅值和持续时间都有很大不同。图中数据统计分析显示,在电导液中信号的电流堵塞幅值分量级的孔道。由于待测分子通过这个孔道或者结构发生变化时产生物理占位,导致通过孔道的离子数量变化,从而引起离子电流的波动。通过采集分析离子电流变化情况可以推断过孔分子的物理尺寸和化学结构。图纳米孔修饰前后的示意图和曲线图图为氮化硅薄膜表面修饰过程中的接触角表征结果。由图可以看到,未作处理的氮化硅表面图是疏水的,在浸泡食人鱼溶液后图水与氮化硅表面的接触角明显变小,亲水性提高。修饰分子后图的氮化硅表面与水的接触角增大,亲水性下降......”。
7、“.....其有关四联体折叠监测的分析及固态纳米孔上端粒序列的共价修饰的研究分子生物学论文后所形成的纳米孔直径大小,计算公式为式中为纳米孔直径为通道长度即薄膜厚度为溶液电导率为孔电导。图为纳米孔修饰前后的示意图和曲线图。图和分别为修饰前后的纳米孔装置示意图。如图和所示,裸氮化硅纳米孔和修饰纳米孔在电导液中测试的曲线斜率明显不同,根据式可得膜厚,电导液电导率为,由曲线斜率可分别推算出裸氮化硅纳米孔直径约为,而修饰端粒序列后纳米孔的直径约为。有关四联体折叠监测的分析及固态纳米孔上端粒序列的共价修饰的研究分子生物学论文序列修饰的氮化硅纳米孔在含有不同金属离子的电导液中实现了对联体形成的检测。实验发现固定在氮化硅孔内的端粒序列所形成的分子间联体在电压的作用下并不稳定,其构象在折叠和解折叠之间变化......”。
8、“.....施加电压的大小也会改变联体的稳定性,随着电压的增加联体结构的持续时间下降。实验结果为基于纳米孔单分子检测平台的联体复杂构象的解析提供了新的方法,为利用纳米孔分析联体等生物大分中通过蛋白质孔,从而产生过孔电信号,且通过对比不同种类的电导液中产生的过孔电信号持续时间和幅值,来分析联体形成的差异。中国科学院实验组在聚合物做成的小孔壁上连接可形成联体的端粒序列,通过改变值控制反应体系,从而使得联体可逆地形成与解开在环境下调节值来调控联体修饰的纳米通道的开合。对于利用生物孔研究联体,因为孔径的限制只能观测到联体结构解开后的过孔信号,不能监测到完整结构过孔,微流道器件也只能监测联体是否形成,不能比较联体不同结构的差异。本文提出种在和曲线图。图和分别为修饰前后的纳米孔装置示意图。如图和所示,裸氮化硅纳米孔和修饰纳米孔在电导液中测试的曲线斜率明显不同......”。
9、“.....电导液电导率为,由曲线斜率可分别推算出裸氮化硅纳米孔直径约为,而修饰端粒序列后纳米孔的直径约为。结论本文提出了种利用固态纳米孔单分子技术鉴别在不同金属离子媒介中端粒序列形成不同联体构象的方法。首先通过共价修饰技术成功将端粒序列固定在氮化硅纳米孔内,并用接触角测试数据以及纳米孔修饰前后的曲线特征表征了端最集中,在电导液中次之,在电导液中最分散。这说明相比于其他两种电导液体系,端粒序列在电导液中的构象转变没有另外两种电导液中的构象多样。在电导液和电导液中产生的信号分布范围比在电导液中产生的信号分布范围更大,说明端粒序列在电导液和中有更自由的结构变换,因此造成电信号的分布更加广泛。在的电压下,在种电导液中产生信号的幅值高斯拟合值和信号持续时间指数衰减拟合值如表所示,可以看出在电导液中信号的持续时间最长,这也说明了在电导液中端粒序列折叠成的联体结构更加稳定......”。
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