1、“.....通氮除氧,分别加入不同浓度的干扰物质谷胱甘肽氯化铵亚硝酸钠精氨酸双氧水,采用循环伏安法进行电化学检测,扫速为,重复试验次结果与讨论蛋白纯化分析对表达纯化各步骤样品进行分析,结果如图所示第泳道是重组菌超声破碎慢的通入气体,冰上放臵反应后,在波长范围内扫描,得到还原型与形成复合物的紫外光谱细胞色素修饰热裂解石墨电极的制备麂皮材料上添加少量的氧化铝粉末,用次蒸馏水浸润,热解石墨电极,直径于麂皮材料上顺时针方向抛光,无水乙醇中超声波清洗次,次蒸馏水中超声清洗次,每次,室温晾干,取修饰液戊醛溶液牛血清白蛋白溶液和蛋白样品,混合均试析对及其直接电化学的催化检测分析化学论文值约为,向培养基中加入终浓度为,培养离心收集菌体,菌体臵于冰上预冷后使其停止蛋白表达加入裂解液值,重悬菌体,加入溶菌酶冰上孵育,反复冻融次,超声破碎菌体离心,收集上清液,过滤膜后......”。
2、“.....依次用咪唑洗脱液值,含比为〯储备液卡那霉素上海生工镍亲和纯化柱康为世纪异丙醇氨基酮戊酸和异丙基硫代半乳糖苷购自公司其他试剂均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司氧化碳气体和氮气,购自武汉翔云公司,溶液参照文献制备,制备得到的母液浓度为,避光密闭保存在带有橡皮塞的棕色玻璃瓶中电泳仪北京仪器厂紫外可见分光光度计美国,效地产生和清除的清除机制具有多样性的特点,的清除机制之依赖于还原酶,还原酶还原为来源于莱茵衣藻,属于细胞色素大家族它除具有酶的典型特性外,还能够实现的催化还原,该催化反应需要提供电子,戊醛是传感器研究领域十分常用的种同型双功能交联剂,通过它的两个醛基分别与蛋白质或酶的氨基结合,形成酶受体戊醛结合物本研究基于催化特性,将和牛血清白蛋白混合,同时加入戊摘要采用戊醛交联法将细胞色素固定在热解石墨电极表面......”。
3、“.....构建了种新型氧化氮生物传感器并考察了电化学生物传感器的选择性与稳定性结果表明实现了直接电子传递,氧化还原峰电位位于和,对具有电催化活性,其催化还原峰位于的检测线性范围为,检测限为,且该生物传感器具有良好的稳定性及选江苏农业科学,王开聪,刘贺氧化氮在雌性动物排卵机制中的研究进展养殖与饲料,马玉涵,蒋圣娟,张晓龙,等植物氧化氮合成清除体系及其生理作用的研究进展中国农学通报,关美艳氧化氮清除系统在拟南芥应答镉胁迫过程中的作用及其机制杭州浙江大学,王海燕,图力古尔,陈强,等真菌细胞色素研究进展食用菌学报,陈舒丽,刘德立,蔡朝晖,等细胞色素在大肠杆菌中的克隆表达及分离纯化生物学杂志,张文勇,葛振时,谷胱甘肽精氨酸氯化铵的电流差值为负值,的峰电流持续增加了近倍,且随着浓度的不断升高,峰电流在不断地上升,而其他物质对应的电流值并不具有规律性的变化该结果表明......”。
4、“.....但对其他常见含氮物质或强氧化物不具有催化活性,该检测技术具有特异性图修饰热解石墨电极的选择性结语本研究将构建成功的原核表达载体通过热激转化法转化到大肠杆菌,以还原峰电流在逐渐升高,表明在不断提供电子的作用下,不断催化与其结合的还原为,离开的卟啉铁,自由的卟啉铁离子在电极表面发生还原,导致处还原峰电流的不断升高,符合细胞色素催化的还原反应机理图与不同浓度溶液的循环伏安图选取谷胱甘肽精氨酸氯化铵亚硝酸钠及双氧水种物质来验证该检测方法的选择性这几种物质在生物体内存在较普遍,在检测,该复合物从电极得到个电子,发生还原,还原峰电位位于,同时由于卟啉铁的自由铁离子减少,处还原峰电流不断降低由于固定于电极表面的细胞色素的量定,所以加入定浓度后,与的结合达到饱和......”。
5、“.....的浓度在试析对及其直接电化学的催化检测分析化学论文龙,赵润柱壳聚糖固定糖化酶及其酶学性质研究保鲜与加工吴云华,吴亚婷,李勇水稻脱落酸受体与融合蛋白的原核表达及纯化中南民族大学学报自然科学版,姜楠,吴云华细胞色素的直接电化学及对氧化氮的电催化检测中南民族大学学报自然科学版,基金国家自然科学基金资助项目中央高校基本科研业务费专项资金资助项目试析对及其直接电化学的催化检测分析化学论文与,及其催化形成的复合物均具有电化学信号,能够实现的直接电化学检测本研究利用这催化反应机理,并基于酶促反应具有专性强,灵敏度高的特点,开发了种的检测技术,该检测技术只对具有响应,而对于些在机体内产生的前体物质如谷胱甘肽不具有电化学响应后续拟通过进步探究和改进,有望将该检测技术应用到实际样品的检测,提高其实用性参考文献周琳,杨柳燕,潘琦,等外源氧化氮处理对山茶抗寒性的影响高于......”。
6、“.....电位低于,卟啉铁为价的还原态图和的循环伏安图考察测定液值对直接电化学的影响,将修饰电极臵于不同值的溶液中,进行循环伏安扫描,结果如图所示特征还原峰峰电位随着缓冲溶液值的改变而发生定程度的迁移,由此得到图,即还原峰电位与缓冲液值的关系图,还原峰电位与缓冲液值成反半乳糖苷作为诱导剂,成功实现了的异源原核表达通过超声破碎及镍亲和柱层析技术,对进行提取和纯化,最终得到了具有活性的通过戊醛和共价交联技术将蛋白固定于热解石墨电极表面,利用电化学工作站,实现了的直接电化学检测以及催化的机理验证,并探讨了该检测方法的特异性结果表明具有的特性,能够催化的还原,且该催化反应需要的际样品时可能会以干扰物质的形式存在,且谷胱甘肽和精氨酸可作为生物体合成的底物在相同的实验条件下,加入干扰物质的浓度与的浓度相同,混合均匀后进行循环伏安扫描,重复次为了便于分析......”。
7、“.....结果如图所示由图可知浓度为时,其它物质的峰电流增加值均较低,相较之下,对应的峰电流增加值较大浓度为范围内,还原峰电流增大值与加入的浓度之间呈现线性关系,线性回归方程为,检测限为图不同浓度与复合物电流差值的线性关系图修饰热裂解石墨电极放入溶液,不断地向反应池中加入溶液,直至与处峰电流不再发生变化,此时与结合达到饱和,再依次向反应池中加入母液浓度为的溶液,混合均匀后进行循环伏安扫描,结果如图所示随着溶液中浓度不断地增大,处比关系,缓冲液的值越高,还原峰电位越低催化还原修饰热裂解石墨电极放入溶液,得到了其活性中心卟啉铁的氧化还原峰峰不断地向测定池中加入溶液,磁力搅拌混合均匀后进行循环伏安扫描,结果如图所示随着的不断加入,处的还原峰电流在不断升高,同时伴随处还原峰电流不断降低......”。
8、“.....处的还原峰电流和处还原峰电流不再发生变化与活性中心的卟啉铁的铁离子结合形成复合试析对及其直接电化学的催化检测分析化学论文化学在范围内,扫速为,对修饰热裂解石墨电极进行循环伏安扫描如图所示不含修饰热裂解石墨电极,在扫描范围内,无任何氧化还原峰而修饰热裂解石墨电极,有对峰形较好的氧化还原电流峰,其氧化峰电位位于,还原峰电位位于,氧化还原峰电位差值为在热裂解石墨电极表面实现了直接电化学,其活性中心的卟啉铁与电极之间实现了直接电子传递,电位离心的沉淀和上清液第泳道为镍柱流出液,可见待纯化样品与在镍亲和纯化柱冰上孵育结合后,由于杂蛋白与填料结合不牢固,直接流出第泳道是咪唑的梯度洗脱液,少数杂蛋白被梯度浓度咪唑缓冲液洗脱下来,最后经高浓度咪唑缓冲液洗脱得到纯度较高的目的蛋白,且其分子量大小,与理论预测的大小致实验结果表明表达纯化成功......”。
9、“.....交联固定过夜,得到修饰热裂解石墨电极不含有修饰热裂解石墨电极作为对照电解池中加入的溶液,氮气除氧,保持氮气氛,将支电极臵于检测池,不断地加入溶液,磁力搅拌子混合均匀后,进行循环伏安扫描检测,扫速为催化机理验证向中的溶液中不断加入溶液,直至该催化反应达到饱和状态后,向反应池中不断地加入梯度体积洗脱杂蛋白,并收集每步的最后流出液,最后咪唑洗脱液洗脱目的蛋白,收集所有洗脱液,经超滤管浓缩,用于后续实验细胞色素的差示光谱测定采用差示光谱法对进行定量分析取测定液和的蛋白液样品混匀,加入连亚硫酸钠,混匀后于冰上静臵,将上述溶液等量分为,分别加入到两个比色皿中,在波长范围内扫描进行基线校准,向其中个比色皿中缓电化学工作站上海辰华仪器标准电极体系修饰的热解石墨电极为工作电极,甘汞电极为参比电极......”。
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