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阿里红多糖的应用对刚地弓形虫RH株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响(细胞学论文) 阿里红多糖的应用对刚地弓形虫RH株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响(细胞学论文)

格式:word 上传:2023-05-06 13:04:00

《阿里红多糖的应用对刚地弓形虫RH株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响(细胞学论文)》修改意见稿

1、“.....余试剂均为国产分析纯。方法小鼠腹腔巨噬细胞的提取分离与纯化小鼠无菌摘取眼球并断颈处死,酒精浸泡后沥干,臵于超给药模型并体外培养,收集各时间点所得细胞爬片,以甘油固定于清洁载玻片上,多聚甲醛固定,滴加荧光染液孵育,即时臵于荧光显微镜下,摄像软件观察并拍照,由摄像软件直接统计各实验组小鼠腹腔巨噬细胞感染率,将镜下摄片划分视野区域,弃去空白视野后保留阳性区域,圈划巨噬细胞核周围无点状弓形虫细胞核的正常细胞区域,感染率阳性区域正常细胞区域阳阿里红多糖的应用对刚地弓形虫株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响细胞学论文射器回抽腹腔内液体,加入臵于冰上的离心管中以防巨噬细胞贴壁。眼科剪将腹膜剪个小口,用枪头加液反复冲洗小鼠腹腔内......”

2、“.....离心半径离心,所得细胞沉淀重悬于完全培养基青链双抗中,取部分细胞悬液常规台盼蓝染色计数,当细胞活性大于且无红细胞污染时,可臵于培养瓶或培养孔板中常规体外培养。药物干预换算实际浓度称量粗提物研磨成细粉,加入以磁力缓冲液青链霉素双抗溶液购自,胎牛血清购自杭州季青生物试剂公司,缓冲液购自武汉博士德生物公司。粗提物由新疆医科大学药学院天药生药学教研室常规制备,从阿里红干药材中提取,得率,多糖含量,提取物的活性和质量已经鉴定。碳酸纤维素滤膜购自美国密理博公司荧光染料购自公司细胞增殖检测试剂盒购自日本同仁化学研究所株速殖子无法侵入巨噬细胞,且形态钝圆,细胞核呈核固缩之强亮荧光显示,提示未侵入巨噬细胞的虫体出现凋亡现象,爬片中巨噬细胞伸出伪足明显,细胞形态多不规则见封图。内感染率仅,显著低于感染对照组。各药物组巨噬细胞感染率变化同感染对照组......”

3、“.....至感染时中剂量组和高剂量组巨噬细胞感染率均低于感染对照组,差异有统计学意义低剂量组巨噬细胞感染率与感染对照组相图小鼠腹腔巨噬细胞增殖变化对小鼠腹腔巨噬细胞体外感染株速殖子的影响亲嗜性染料荧光染色观察发现空白对照组巨噬细胞为直径约卵圆形或不规则,细胞核呈现均质微弱蓝色荧光,细胞质呈暗蓝色微弱荧光。纯化后的株速殖子悬液滴片染色后虫体为左右新月形或香蕉状,胞质中有核直径约,呈微弱荧光。感染对照组细胞爬片感染即观察到部分巨噬细胞胞质形态不规则,细胞质中出现米粒样能通过上调机体脾细胞巨噬细胞等免疫应答,抗氧化性损伤等作用发挥其抗肿瘤抗流感病毒及新城疫病毒感染等活性。统计学处理统计学分析采用统计软件和统计绘图软件,组间比较采用检测,为差异有统计学意义。结果对小鼠腹腔巨噬细胞毒性检测及药物值以波长的吸光度值检测各实验组细胞板孔中小鼠腹腔巨噬细胞的增殖变化......”

4、“.....结果粗提物对小鼠腹腔巨噬细胞的为,安全药物剂量为以下。荧光染色发现高剂量组感染时细胞爬片中株速殖子无法侵入巨噬细胞且出现核固缩强亮荧光凋亡现象,内感染率仅,显著低于感染对照组。各药物组巨噬细胞感染率在各时间均低于感染对照组。时中高剂量组巨噬细胞感染率分别为和,选择剂量作为后续实验的药物浓度。阿里红多糖的应用对刚地弓形虫株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响细胞学论文。摘要目的探索药用植物阿里红多糖,粗提物对刚地弓形虫,株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞及虫体增殖和凋亡的影响。方法法计算粗提物对照组。至感染时中剂量组和高剂量组巨噬细胞感染率均低于感染对照组,差异有统计学意义低剂量组巨噬细胞感染率与感染对照组相比差异无统计学意义统计结果见表......”

5、“.....组间比较采用检测,为差异有统计学意义。结果对小鼠腹腔巨噬细胞毒性检测及药物值以波长的吸光度值检测各实验组细胞板孔中小鼠腹腔巨噬细胞的增殖变化,原阿里红多糖的应用对刚地弓形虫株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响细胞学论文增殖,稳定存活天后逐渐死亡。观察各浓度剂量药物作用时的细胞增殖变化见图。各剂量作用时吸光度值均不同程度高于正常对照组,和两个剂量组的巨噬细胞给药后吸光度明显降低,生物倒臵显微镜下观察也发现部分死亡细胞飘散在培养基中,由于药物浓度高,镜下可观察到极小的多糖立方结晶不能充分溶解。经测算的药物为,选择剂量作为后续实验的药物浓度弓形虫株速殖子体外对小鼠腹腔巨噬细胞的感染和细胞内增殖,并在感染初期有抑制虫体入侵巨噬细胞诱导虫体凋亡的作用。关键词凋亡刚地弓形虫小鼠腹腔巨噬细胞感染阿里红多糖阿里红为多孔菌科层孔菌属植物苦白蹄的子实体,维吾尔语称哈里坤......”

6、“.....其粗提物中以多糖,为主要活性成分,形或香蕉状,胞质中有核直径约,呈微弱荧光。感染对照组细胞爬片感染即观察到部分巨噬细胞胞质形态不规则,细胞质中出现米粒样微弱蓝色荧光形态,与株速殖子细胞核的大小形态致。感染爬片中部分巨噬细胞呈现典型假包囊形态,表现为巨噬细胞胞核周围几个或十几个虫体细胞核集中排列。随感染时间延长感染率逐渐升高,感染高峰出现在感染,至感染时爬片中部分巨噬细胞已经崩解,被感染的巨噬细胞及崩解的细胞碎,低于感染对照组的,差异有统计学意义低剂量组巨噬细胞感染率为,与感染对照组相比差异无统计学意义,。弓形虫基因表达水平显示感染时高中低剂量的相对增殖抑制率分别为和。流式细胞术检测高剂量药物组感染时细胞上清中株速殖子细胞周期发现期前典型亚倍凋亡峰,占弓形虫总数的......”

7、“.....分设空白对照组强感染对照组和高中低剂量组。荧光染色观察虫体感染小鼠腹腔巨噬细胞形态及感染率变化相对定量法检测各实验组弓形虫基因表达水平并计算虫体相对增殖抑制率结合流式细胞术检测感染时高剂量代提取的小鼠腹腔巨噬细胞在体外常规培养下呈静息状态并不会被激活及增殖,稳定存活天后逐渐死亡。观察各浓度剂量药物作用时的细胞增殖变化见图。各剂量作用时吸光度值均不同程度高于正常对照组,和两个剂量组的巨噬细胞给药后吸光度明显降低,生物倒臵显微镜下观察也发现部分死亡细胞飘散在培养基中,由于药物浓度高,镜下可观察到极小的多糖立方结晶不能充分溶解。经测算的药物为片粘连成片呈棉絮状,感染细胞周围可见个别游离速殖子,点状荧光直径与弓形虫细胞核直径相符。高剂量组感染时细胞爬片中可观察到多数株速殖子无法侵入巨噬细胞,且形态钝圆,细胞核呈核固缩之强亮荧光显示......”

8、“.....爬片中巨噬细胞伸出伪足明显,细胞形态多不规则见封图。内感染率仅,显著低于感染对照组。各药物组巨噬细胞感染率变化同感染对照组,但各时间点感染率均低于感染阿里红多糖的应用对刚地弓形虫株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响细胞学论文。阿里红多糖的应用对刚地弓形虫株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞的影响细胞学论文。图小鼠腹腔巨噬细胞增殖变化对小鼠腹腔巨噬细胞体外感染株速殖子的影响亲嗜性染料荧光染色观察发现空白对照组巨噬细胞为直径约卵圆形或不规则,细胞核呈现均质微弱蓝色荧光,细胞质呈暗蓝色微弱荧光。纯化后的株速殖子悬液滴片染色后虫体为左右新月净工作台中固定,无菌器械剪去腹部皮毛暴露腹膜,注射器抽吸含液,更换针头注射入小鼠腹腔,以酒精棉球轻柔按摩小鼠腹部下以上,静臵,注射器回抽腹腔内液体,加入臵于冰上的离心管中以防巨噬细胞贴壁......”

9、“.....用枪头加液反复冲洗小鼠腹腔内,收集所有腹腔冲洗液,离心半径离心,所得细胞沉淀重悬于完全培养基青链双抗中,取部分细性细胞区域,统计各实验组张细胞爬片中每张爬片个密集视野的平均值。主要试剂弓形虫株速殖子悬液由新疆医科大学人体寄生虫教研室长期保种传代基础培养基缓冲液青链霉素双抗溶液购自,胎牛血清购自杭州季青生物试剂公司,缓冲液购自武汉博士德生物公司。粗提物由新疆医科大学药学院天药生药学教研室常规制备,从阿里红干药材中提取,得率,多糖含量,提取物的活性和质量已经搅拌器充分溶解,膜过滤除菌,结合所得实验结果,将分设高中低药物剂量组。于株速殖子体外感染小鼠腹腔巨噬细胞模型建立后吸弃各细胞板孔中的培养基,补充完全培养基孔,并加入各剂量药液孔,使药物终浓度分别为。同时分设巨噬细胞空白对照和感染对照组,加入作为对照,各实验组设个复孔,实验过程重复次......”

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